广元市利州区中西医结合医院输血科生物安全手册56页.doc
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1、生物安全手册文件编号:GYLZZXY-SXK-RF02 广元市利州区中西医结合医院输血科 广元市利州区中西医结合医院输血科生物安全手册制订人:李平升修订人:输血科生物安全小组批准人:周丕蓉法律、法规依据:实验室生物安全手册.WHO. 2003年第二版微生物和生物医学实验室生物安全通用准则.卫生部病原微生物实验室生物安全管理条例2002年. 行政法规中国医学微生物菌种保管管理办法2004年. 卫生部执行范围:广元市利州区中西医结合医院输血科各实验室制订时间:2009年10月26日批准时间:2009年10月30日执行时间:2009年10月30日目 录实验室生物安全管理责任制实施细则 实验室生物安全2、管理组织 实验室生物安全防护制度及措施 实验室出入管理制度 实验室消毒隔离制度 感染性材料管理制度 锐器安全使用管理制度 菌(毒)种安全管理制度 危险化学品安全管理制度 工作人员健康监护制度 工作人员生物安全教育与培训制度 工作人员生物安全防护制度 生物安全工作自查及检查制度 实验室人员准入制度 意外事件处理与报告制度 实验室资料档案管理制度 实验室安全保卫制度 病原微生物样本采集、运输、处理与保管程序 医疗废弃物管理程序 高致病性病原微生物防护与上报及感染物消毒程序 病原微生物风险评估和风险控制程序 实验室生物安全事件和涉恐事件应急处理预案 实验室生物安全规范 实验室生物安全管理责任制实施细3、则1、目的为了保护实验室工作人员和环境的安全,以科学的态度和方法对待实验室生物安全问题。根据世界卫生组织实验室生物安全手册2003年第二版、卫生部微生物和生物医学实验室生物安全通用准则医疗机构临床实验室管理办法、病原微生物实验室生物安全管理条例、中华人民共和国传染病防治法实施办法和人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验室活动安全审批管理办法制定本管理细则。 2、适用范围:本管理细则适用于输血科各专业实验室。3、具体内容31生物安全实行二级责任制,医院设立生物安全管理委员会,检验科设立生物安全管理小组,在医院生物安全管理委员会的指导下,检验科生物安全管理小组全面负责实验室生物安全工作。32检验4、科制定生物安全手册,工作人员在进入实验室工作前要学习并按手册要求操作,内容包括:实验室出入管理规定;实验室消毒隔离制度;感染性材料管理制度;锐器安全使用管理制度; 菌(毒)种安全管理制度;危险化学品安全管理制度;工作人员健康监护制度;工作人员生物安全教育与培训制度;工作人员生物安全防护制度;生物安全工作自查及检查制度。实验室人员准入制度。意外事件处理与报告制度。实验室资料档案管理制度。实验室安全保卫制度。病原微生物样本采集、运输、处理与保管程序;医疗废物管理程序。高致病性病原菌标本防护与上报及感染物消毒程序。病原微生物风险评估和风险控制程序。实验室生物安全事件和涉恐事件应急处理预案。3.3各专5、业组长制定以下文件、程序和记录实验室使用登记本、记录本;紧急情况的登记和处理记录本;实验室入口须贴上生物危险标志,注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。3.4合理使用生物安全柜,操作完成后,如实填写使用记录。3.5加强对工作人员尤其是新来人员的生物安全防护的培训,并认真填好工作人员培训记录,具体内容包括:培训目的:认识实验室工作的潜在危险,掌握预防暴露以及暴露后的处理程序,接受实验室安全教育,自愿从事实验室工作,只有经过培训合格的实验室工作人员,方可上岗和使用生物安全柜;培训内容:临床实验室的安全防护、生物安全手册、生物安全柜的合理使用等;培训安6、排:每年至少举办1-2次培训,纳入“科室业务学习安排”,年终要进行安全防护知识的考核。培训人员:科室工作人员、新来人员、进修、实习生、工人等。授课老师:由科室指定中级以上的实验技术人员进行授课,授课内容要根据每年程序的变动进行更新。3.6实验室的工作人员必须严格遵守实验室的所有制度、规定和操作规程;3.7认真作好检验器材、检验单、废弃标本及相关人员的消毒处理,具体方法参见实验室消毒隔离制度及医用废弃物管理制度。3.8每个月由生物安全防护管理小组进行不定期的检查。实验室生物安全管理组织一、 管理原则统一领导、分级负责;明确职责、分工协作;科学规范、层层落实;预防为主、常备不懈。二、管理目标通过实7、验室生物安全体系的构建及完善,建立长效机制,确保实验室生物安全管理工作持续有效。三、管理组织医院生物安全管理组织:生物安全管理委员会。实验室生物安全管理组织:生物安全管理小组。生物安全管理小组组长由周丕蓉同志担任,组员由石雪峰、杨春龙、赵娜、唐宏、李平升组成。四、 生物安全管理小组职责1、生物安全管理小组职责:负责实验室生物安全评估、生物安全管理手册的制定、审核及实验室生物安全管理、执行情况的监督检查。2、生物安全管理小组组长职责:本科生物安全管理总负责人,负责组织制定本科生物安全计划、标准操作程序、实验室管理规章制度、突发事故应急预案等文件,对实验室所有员工和来访者的安全负责,负责培训员工,8、决定进入实验室人员。3、生物安全管理小组组员职责:生物安全管理小组组员是所在实验室生物安全管理负责人。赵娜负责体液室生物安全;石雪峰负责微生物室的生物安全;李平升负责生化室的生物安全;石雪峰负责免疫室的生物安全;杨春龙负责血液室的生物安全;杨春龙负责血库的生物安全。具体负责该专业生物安全工作内容(仪器设备、工作台面、地面消毒、废弃物处理,工作人员防护等),发现并及时纠正不规范操作,协助处理实验室事故,并上报实验室生物安全管理负责人,做好相应记录。4、实验室人员职责:在实验室生物安全管理负责人指导下,负责编写安全作业指导书。遵守实验室规章制度,严格按标准操作规程操作,接受安全监督员监督。有权要求9、消除实验室环境实施、设备存在的不安全隐患,装备必须的个人安全防护设备。对不遵守实验室规章制度、不按标准操作规程操作或不接受安全监督员监督导致的安全事故负直接责任。五、 生物安全管理组织图医院生物安全管理委员会 检验科生物安全管理小组组长: 周丕蓉组员:李平升 石雪峰 赵娜 唐宏 安全员:李平升唐宏:生化室石雪峰:微生物室李 平升:血液室赵娜:体液室石雪峰:免疫室石雪 峰:痰检室李平升:血库实验室生物安全防护制度及措施1、目的保护生态环境、人类健康和实验室工作人员的安全,增强安全意识,落实管理责任;健全实验室生物安全管理制度。2、范围适用于检验科各实验室及工作人员。3、内容根据世界卫生组织20010、3年第二版实验室生物安全手册和卫生部2002年发布的行业标准WS233-2002微生物和生物医学实验室生物安全通用准则及国务院颁布的病原微生物实验室生物安全管理条例特制定实验室生物安全防护制度及措施。3.1生物安全管理制度合理、科学的实验室布局,实验室内整洁,便于清洁消毒,出口和通道必须保持畅通无阻,不准堆放物品、垃圾、装置和设备。安全门必须保持畅通,不得堵塞。临床医学实验室应通风透气,在通气不好的实验室要安装通气橱,通气设备指派专人负责(使用、维护),根据需要每日至少进行一次,并登记、签名。临床医学实验室窗户需具备钢丝网纱窗,以防外界“虫害”入侵,钢丝网纱窗的完整性,由各专业组长负责。临床医11、学实验室需要安装空气净化设备,空气净化次数根据实验室需要而定,每天至少两次,由各专业组长(或者组长指派人员)负责使用和记录。临床医学实验室应具有充分的消毒灭菌装置:紫外消毒装置、过虑消毒装置(生物安全柜)、液体消毒装置等,细菌室应具备上述所有设备,每种设备由各专业组长(或者组长指派人员)负责维护、使用和记录。临床医学实验室需有洗涤设备:实验室工作人员在接触标本和培养物后,必须经过水淋方可离开实验室。 临床医学实验室出入要执行临床医学实验室出入制度。 临床病原微生物实验室拟开展的病原微生物培养、药敏实验、分离、鉴定、血清学检测仅限于病原微生物实验室生物安全管理条例规定中的第三类、第四类病原微生物12、。菌种、毒株和各种阳性标本的管理要按照菌(毒)种安全管理制度执行。 标本运输、处理制度:所有能够产生气溶胶进行播散的生物制品或标本,都应使用密封的离心管,并在盖紧的离心头或转头中进行。在运输、存放标本时标本应密封。检验科工作(本科、进修、实习、工人、聘用)人员必须遵守生物安全的规章制度,违者根据有关条例由生物安全小组成员共同讨论处罚意见。 菌种、毒株、传染强的标本和有害、有毒的化学药品,由生物安全小组成员中选专人保管,同时做好出入登记,违者重处。 为了达到生物安全的目的,在尽可能节约的情况下,科室应准备足够的工作服、隔离衣、防护面罩、鞋帽、手套等。尤其是细菌室等生物因子密集的地方。 各实验区应13、有明确的污染区、半污染区、清洁区的标识。 实验室用电安全.1 仪器用电:作为仪器维护措施的一部分,应进行年度的安全用电检查并建立档案记录。每年至少对所有电插座的接地和电缆的完整性进行检查一次,并将结果记录在案。.2 高压设备:为保证高压设备的安全,应由专业电工维护。.3地线:电器设备必须接地或用双层绝缘。电线、电源插座、插头必须完整无损。在潮湿环境的电器设备,要安装接地故障断流器。 化学危险品安全.1临床化学实验室存在有许多腐蚀性、毒性、易燃和不稳定试剂,属化学危险物品。实验室工作使用化学危险物品,应向有关机构备案,并遵守相应管理规定。所有化学危险物品的容器都应有清晰标记。存放地点应通风透气,14、保管应专人、专柜、出入登记。3.2 医学实验室生物安全防护措施为了增强检验科工作(本科、进修、实习、工人、聘用)人员生物安全意识,必须经过生物安全相关知识培训,考核合格后方可上岗,而且每年接受一次最新的培训。对新进人员要进行岗前培训,考核合格后方可上岗。禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后进入。工作人员在工作中必须穿戴工作服和手套,离开实验室时,工作服必须留在实验室。工作服送至医院洗衣房中洗涤,不能带回家中。脱掉手套后和离开实验室前要洗手。禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。以移液器吸取液体,禁止口吸。严格遵守锐器使用管理办法,防止锐器损伤,如15、受锐器损伤,按“医学生物实验室事故的应急措施”进行处理。试管离心前,观察试管有无破裂,离心管套底部有无缓冲垫,以避免离心时试管破裂,造成实验室污染。每天至少消毒一次工作台面,污染物质溅出后要及时消毒,具体方法参照“实验室消毒、灭菌措施”。所有培养物、废弃物在运出实验室之前必须进行灭活,如高压灭活。实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒,具体方法参照“实验室消毒、灭菌措施”。工作人员应每年接受一次健康检查,尤其是HBV、HCV、TB等血源性和呼吸道传染性疾病。对无免疫能力者,给予预防接种。要充分认识气溶胶对实验室的污染和对工作人员健康的危害,在标本离心、剧烈震荡、混匀、开启、放置过程中均可产生气16、溶胶,所有标本分离、离心统一在标本处理处进行,对强传染性的标本在生物安全柜中进行,工作人员需采取面部保护措施如眼镜、口罩、面罩或其它防溅装置;标本除取样外,其他环节密闭。可能接触潜在传染源、被污染的实验台表面或设备时,需戴手套。当检测工作结束时或手套破损时,应摘除手套。一次性手套不用清洗、不能重复使用。戴手套不能接触“洁净”设施表面(如键盘、电话等),也不宜到实验室外。工作人员在工作中手应远离口、鼻、眼及其它粘膜,减少实验室感染的危险。人员暴露于病毒或其它感染性微生物时,及时向实验室负责人汇报并记录,同时参照医学生物实验室事故的应急预案进行处理。强致病性微生物,如SARS病毒、结核杆菌的生物安17、全防护措施参照“强致病性病原菌标本检测的消毒灭菌及防护制度”。实验室出入管理制度1、目的根据卫生部微生物和生物医学实验室生物安全通用准则,为加强科室实验室管理,确保检验质量,防止实验室污染,制定本规定。2、适用范围本科实验室按照二级生物安全防护实验室标准管理;本规定适用于本科所有实验室。3、具体内容3.1 本科实验室是进行临床检验和教学科研实验的场所,不作它用。3.2实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员。在独立进行工作前还需在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训,达到合格标准,方可开始工作。3.3 实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及其岗位之前必须经过实验室主任的批18、准。3.4非本室人员到实验室做实验,须经实验室主任批准,并办理有关手续。3.5非实验有关人员和物品不得进入实验室; 在实验室内不得进行与实验无关的活动。3.6实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育,自愿从事实验室工作; 3.7进入实验室时,应穿着工作服或罩衫等防护服。当知道防护服已被危险材料污染应立即更换。离开实验室区域之前应脱去防护服。3.8禁止在工作区内使用化妆品和处理隐形眼镜。长发应束在脑后。在工作区内不应配带戒指、耳环、腕表、手镯、项链和其它佩饰物品。3.9实验室内严禁吸烟、吃饭、饮水等。3.10工作中工作人员必须戴手套,以防生物危险、化学品污染、冷和热、标19、本污染、刺伤、擦伤和动物抓咬伤等。在工作完成或中止后应摘掉手套并放入医用垃圾袋中,交医院污物处理部门处理。摘除手套后、使用卫生间前后、离开实验室前、进食或吸烟前、接触每一患者前后应例行洗手。3.11鞋应舒适,鞋底防滑。在从事可能出现漏出的工作时可穿一次性防水鞋套。3.12对污染的防护服应用黄色塑料袋封装好,交医院洗涤部门处理。工作服不得穿着外出,更不能携带回家。3.13实验结束后,实验室工作人员要认真检查门、窗、水、电以及室内存放的高压容器等,杜绝不安全隐患,确保实验室安全。 3.14离开实验室时,应向交接人员做好交接班工作。3.15实验结束后,关掉仪器设备电源开关,将仪器设备整理好,实验现场20、整理干净。用肥皂流水充分洗手后方可离开实验室。实验室消毒隔离制度1、目的检验科是病人标本直接感染的场所,检验科工作人员直接接触病原体的机会多,所收集的标本、污物及发出去的报告单均存在直接传播疾病的可能。所以搞好检验科的消毒对防止环境感染和自身感染有着重要的意义。检验科的消毒范围包括工作场所的空气,桌椅表面,工作台面,使用的仪器、材料、废弃标本的处理。发出的报告单及工作人员的手、衣、帽、鞋等。2、适用范围本消毒办法适用于检验科各实验室。3、具体内容3.1区域(部门)消毒 清洁区消毒 每天擦试桌椅、地面。每周一次大消毒。可采用250500mg/L有效氯消毒剂溶液或0.10.2%过氧乙酸溶液。作用时21、间为30分钟,每天开窗通风数次。半污染区的消毒,每日采用有效氯含量250500mg/L消毒剂或0.10.2%过氧乙酸擦拭,桌椅地面的消毒液用5001000mg/L有效氯擦洗,时间30分钟。 污染区的消毒污染区包括各实验室的标本收集、存放、处理室等处。消毒方法如下:物体表面的消毒,包括桌、椅、台面及某些仪器表面和地面。.1桌椅等表面每天开始工作前用清水擦抹1次,下班前用250500mg/L有效氯溶液或0.10.2%过氧乙酸擦洗1次,作用时间3060分钟。.2地面应在开始工作前用清洁湿拖帕拖地1次,下班前用高于消毒台面浓度(10002500mg/L有效氯)的消毒液进行消毒。.3工作台面可采用干净布22、铺于上面,工作完毕后,将布用煮沸消毒。若台面有传染性标本外溢或器皿破损,应立即消毒。用消毒液浓度为10002000mg/L有效氯溶液或0.20.5%过氧乙酸洒于被污染的表面,并浸盖于污染物表面。时间为3060分钟,再抹掉。抹布要浸泡在消毒液中或煮沸30分钟。地面若被明显污染则可采用同样方法进行消毒。对放置标本的表面应按同样的方法消毒处置。工作台面被肝炎或结核杆菌污染时,应用10002000mg/L有效氯溶液或0.5%过氧乙酸溶液浸泡3060分钟;工作台面被真菌标本污染,应采用石碳酸倒在污物上,并在石碳酸上盖34层浸石碳酸的卫生纸,至少保持30分钟,再将其清洗。必要时可将房间密闭,进行空气消毒处23、理。.4各种表面、台面可采用高强度紫外线灯进行照射。所有清洁器材、用具不得三个区域共用,专区专用,用后及时消毒。半污染区和污染区的衣帽一周换洗2次,拖鞋用250500mg/L有效氯浸泡30分钟。3.2空气消毒 实验室必须有良好的通风环境,应有换气,排气设备,保证实验室的通风和空气清新。可采用多功能消毒机进行空气消毒。也可采用13g/m3过氧乙酸熏蒸6090分钟。3.3 器材的消毒金属器材.1穿刺取血针一人一份,一用一消毒,集中灭菌处置。.2采集血液标本,必须做到“一人一针一筒”、“一人一垫一带”。针头、注射器均用一次性用具。用后的针头,注射器浸泡在2000mg/L消毒液4小时,装在纸箱里送到供24、应室进行统一消毒毁形处置。针头应置于耐刺容器中。压脉带用后浸泡消毒。.3小的金属器材如接种环可用酒精灯烧灼灭菌。.4较大金属器材用2%碱性或中性戊二醛溶液浸泡2h后,清洗沥干高压灭菌。 玻璃器皿.1被污染的吸管、玻璃试管、玻片、滴管应置于每日配制的2000mg/L-2500mg/L有效氯消毒剂中或(0.5%肥皂液),再煮沸1530分钟后洗刷、沥干、采用3760烘干。.2微生物实验用的吸管、试管、琼脂板单独进行煮沸30分钟,有毒菌株用0.5%过氧乙酸或2000mg/L有效氯浸泡4小时,煮沸1530分钟,清洗,晾干,115压力灭菌15分钟。.3生化及免疫实验用的器皿,浸泡于重铬酸钾浓硫酸清洁液内225、4h用清水冲洗干净,烘干备用。塑料、橡胶器械.1一次性使用的塑料制品,一次性手套及无纺布制品帽子、衣、口罩均应放入黄色污物袋内集中焚烧。.2实验用的非一次性手套,受污染的吸液球用0.5%1%肥皂液或洗涤剂全部浸入,煮沸1530分钟,然后清洗,晾干,耐热的用115压力灭菌15分钟。不耐热的塑料用0.5%过氧乙酸浸泡1小时。.3离心机内的塑料套管,采用2%戊二醛溶液擦拭,以杀灭肝炎病毒或结核杆菌。.4血清反应板用0.5%过氧乙酸或2000mg/L有效氯浸泡4小时。 贵重仪器显微镜、分光光度仪、离心机、天平、酶标检测仪、细胞计数器、血液生化分析仪、微生物分析仪、气相色谱仪、冰箱、培养箱等,不能用消毒26、液浸泡。可采用2%碱性或中性戊二醛溶液或1%洗必泰酒精溶液擦拭,半小时后用清水擦净。 手消毒.1工作前后均用肥皂流水洗手23分钟(洗手6步法)再用流水冲洗,用消毒纸巾或个人毛巾擦干。.2工作人员操作时应戴手套,如手被传染病菌污染立即用0.2%过氧乙酸或1000mg/L有效氯浸泡3分钟然后用清水冲洗。 检验科检验报告现尽量要求打印报告,如不能打印报告,凡送出检验单用便携式高强度紫外线消毒3s5s或用医用微波炉消毒中火3分钟。 感染性材料管理制度1、 目的防止感染性材料引起感染或环境污染。2、 适用范围各种标本和感染物品、各种盛装容器和处置物品。3、 具体内容3.1严格区分感染性材料和非感染性材料27、,感染性材料在保存、运输、使用和处理各环节都必须处于严格控制状态。3.2盛装感染性材料的容器必须是有明显标识的专用品。3.3盛装感染性材料不得超过包装物或者容器的3/4,应当使用有效的封口方式,使包装物或者容器的封口紧实、严密。3.4包装物或者容器的外表面被污染时,应对被污染处进行消毒或增加一层包装。3.5生物实验室高危险废物,应当在产生地进行高压灭菌,然后按感染性废物收集处理。3.6损伤性材料放入锐器盒中,不得放入收集袋中,以防泻漏或造成锐器伤。3.7所有感染性材料出实验室时需标明产生实验室名称、类别、产生日期及需要特别说明的内容。3.8专职运送人员每天从感染性医疗废物产生地点将分类包装的医28、疗废物按照规定的时间和路线送至指定的暂时贮存地点。3.9运送时使用专用电梯或专用时段运送,运送后对电梯及其他相关物品进行清洁消毒并记录。3.10感染性材料废物存放点应有明显生物危害标识,防止非工作人员接触。3.11一旦发生感染性材料流失、泄漏、扩散等意外事故时,应及时采取处理措施,并启动意外事件应急预案,同时向科室内安全员和科室负责人报告,由其向院感上报。对致病人员提供医疗救护和现场救援工作。处理结束后写出事情经过与今后的预防措施,交保卫科备案。3.12在收集、运输、使用和处理感染性材料时,工作人员必须作好生物安全防护。锐器安全使用管理制度1、 目的为了保护实验室工作人员的安全,以便更好地完成29、本职工作,以科学的态度对待实验室的生物安全问题,特制定检验科锐器使用管理办法。2、 适用范围本管理办法适用于检验科各专业实验室。3、 具体内容 检验科锐器包括刀、剪、注射针头和破损的玻璃器皿等坚硬锐利器具,使用时稍不小心就有可能刺破或割破皮肤而发生实验室感染。因此,特制定锐器使用管理办法,规范锐器的使用和管理,强化实验室工作人员安全使用锐器的意识。管理办法包括锐器的贮存与使用以及事故性刺伤、划伤或擦伤的处理两方面。3.1 锐器的贮存与使用刀、剪、玻璃器皿等锐器应放置在坚固的容器中。实验室使用锐器要特别小心,防止刺伤、划伤。尽可能用塑料器材代替玻璃器材。注射器尽可能应用一次性的。用过的针头禁止折30、弯、剪断,重新盖帽,直接放入锐器盒中,一次性注射器用后放入消毒液中消毒,由医院统一收集处理。非一次性锐器(如刀、剪)的消毒参照“实验室消毒隔离制度”。处理锐器时必须戴手套,脱掉手套后要洗手。试管离心前,观察试管有无破裂,离心管套底部有无缓冲垫,以避免离心时试管破裂,造成实验室污染。3.2 事故性刺伤、划伤或擦伤的处理使用锐器进行致病微生物实验时,可能无意中刺伤或划伤皮肤,引起严重的实验室感染。一旦发生这种意外,必须立即报告实验室负责人,同时参照“医学生物实验室事故的应急措施”进行处理,并按规定报告预防主管部门。菌种/毒株安全管理制度1、目的为确保实验室工作人员不受实验对象侵染,确保周围环境不受31、其污染,必须加强菌(毒)种的管理,特制定本管理办法。2、适用范围本管理办法适用于微生物检验室。3、具体内容3.1菌种或毒种的保存种类标准菌株:ATCC25922大肠埃希菌、ATCC25923金黄色葡萄球菌、ATCC27853铜绿假单胞菌、ATCC29212粪肠球菌、 ATCC13883肺炎克雷伯菌ATCC90028白色念珠菌等,由卫生部临床检验中心提供。保存丙级菌种:如葡萄球菌、大肠埃希菌、克雷伯菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌等条件致病菌。如实验室检出甲类菌种或毒种,应立即消毒、灭菌处理。任何人不得私自保存鼠疫杆菌、霍乱弧菌、炭疽杆菌、结核杆菌等传染性强的菌种。3.2菌种或毒种的保存方式需氧菌采用32、半固体保存,35培养18-24小时后置4冰箱保存一个月,每月传代一次。链球菌、肺炎链球菌、嗜血杆菌等苛氧菌的保存:将对数生长期的培养物混悬于0.5-1.0ml无菌兔血小管中,置-20冰箱保存。3.3微生物室设立菌种专管人员,菌种保存于有锁冰箱中,房门专人加锁,确保菌种安全。保管人员变动时, 必须严格交接手续。3.4建立菌种保管及发放登记册,包括细菌名称、分离日期、鉴定日期、鉴定方法、耐药机制、签发者等并注明使用、转移、销毁情况及原因,见附表。3.5凡科研、临床新药试验需要转移菌种,须填写使用申请,经微生物室组长签字同意后,方可在菌种专管人员处签名领取。3.6各种菌种应按规定时间转种,一般在转种33、三次后作一次全面的鉴定,注意菌种有无污染及变异,如发现污染及变异时,应及时更换。并做好相应记录。3.7菌种或毒种的消毁必须有科主任、微生物工作人员在场,并注明销毁情况的原因,作好记录。3.8菌种保存范围及向外单位转移,应按国家卫生部的规定执行。危险化学品安全管理制度1、目的为保障全院工作人员和患者生命、财产安全和环境,必须进一步加强危险化学品的安全管理。根据国务院化学品危险物品安全管理办法和中华人民共和国国家标准制定本管理办法。2、适用范围本管理办法适用于检验科各实验室。3、具体内容3.1危险化学品使用与管理 危险化学品的申购、领用要坚持专人审批、专人领用、专人保管。检验科将审批人、领用人、保34、管人名单送保卫处备案。人员变动时,须经实验室主管批准,做好交接工作,并及时通知保卫处。 建立危险化学品帐册,从购进、入库、领用、使用、处理都必须及时、准确作好记录,做到帐物、帐帐相符。 剧毒品的管理必须从严。领用剧毒品时必须有领用监督人到场。坚持五双制度双人收发、双人记帐、双人双锁、双人运输、双人使用。用多少买多少,用多少领多少,剩余物品及时存放于专柜内。定期检查,做到帐物相符。使用危险化学物品的实验室与个人,必须遵守各项安全生产制度和操作规程,严格落实安全防护措施。使用单位在危险化学品工作场所应建立事故应急处理方案和措施。储存化学危险品,应当符合下列要求:.1化学危险品应当分类、分项存放,相35、互之间保持安全距离;.2遇火、遇潮、容易燃烧、爆炸或产生有毒气体的化学危险品,不得在露天、潮湿、漏雨和低洼容易积水的地点存放;.3受阳光照射易燃烧、易爆炸或产生有毒气体的化学危险品和桶装、罐装等易燃液体、气体应当在阴凉通风地点存放;.4化学性质防护和灭火方法相互抵触的化学危险品,不得在同一仓库或同一储存室内存放;.5存放剧毒物品的部门必须备有保险箱,存放剧毒物品的保险箱钥匙应安全保存;.6化学危险品的存放区域应设置醒目的安全标志。 化学危险品发现丢失、被盗时,应当立即报告上级领导和保卫部门。3.2危险化学品的养护化学危险品入库时,应严格检验物品质量、数量、包装情况、有无泄漏。 化学危险品入库后36、应采取适当的养护措施,在贮存期内,定期检查,发现其品质变化、包装破损、渗漏、稳定剂短缺等,应及时处理。 库房温度、湿度应严格控制、经常检查,发现变化及时调整。3.3废弃危险化学品处置废弃危险化学品各单位应专人负责分类收集,妥善贮存,容器外加贴废弃物品标签,容器封闭可靠。废弃剧毒品、危险化学品的处理,应向保卫处提出书面申请,上报公安局获准后,由保卫处定期回收,送至有资质单位处理。 各实验室不得自行处置废弃危险化学品。严禁随意排入地面、地下及任何水源,防止环境污染与生态破坏。工作人员健康监护制度1、 目的为了保障实验室工作人员的健康,以便更好地完成本职工作,特制定检验科工作人员健康监护制度。2、 37、适用范围本制度适用于检验科所有工作人员。3、 具体内容3.1所有人员(本科、进修、实习、工人、聘用)必须经过生物安全相关知识培训,同时认真填写工作人员培训记录,存档保存,以证明其对工作及实验室全部设施中潜在的风险受过培训。3.2所有工作人员每年须接受一次健康检查,包括心电图、B超、胸透、HBV、HCV、HIV、TB等血源性和呼吸道传染性疾病的检查。同时,将检查结果汇总于实验技术人员健康检查登记记录,存档保存。3.3对从事危险性工作的人员(如HIV抗体初筛实验人员等),应收集基本血清留底,并根据需要定期收集血清样本,进行检测,同时将检验结果存档,如有问题及时处理。3.4对所有人员根据可能接触的生38、物接受必要的免疫接种(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等),以预防感染。3.5工作人员在操作过程中发生意外,如针刺和切伤、皮肤污染、感染性标本溅及体表和口鼻眼内、衣物污染、污染试验台面等均视为安全事故。应视事故类型等不同按照实验室事故应急处理规程立即进行紧急处理。在紧急处理的同时,详细记录事故经过和损伤的具体部位和程度等,由专家评估是否需要进行预防性治疗。(如:抗病毒治疗或抗感染治疗等)。工作人员生物安全教育与培训制度1、目的为了加强工作人员尤其是新来人员生物安全防护意识,以科学的态度对待实验室的生物安全问题,保护实验室工作人员安全,防止生物安全事故的发生,特制定本培训教育制度。 2、适用范围检验科全体39、工作人员、进修、实习生3、具体内容3.1培训目的:认识实验室工作的潜在危险,掌握预防暴露以及暴露后的处理程序,接受实验室安全教育,自愿从事实验室工作,只有经过培训合格的实验室工作人员,方可上岗和使用生物安全柜。3.2培训内容:临床实验室的安全防护、生物安全手册、生物安全柜的合理使用等。3.3培训安排:科室每年至少举办1-2次培训,纳入“科室业务学习安排”,年终要进行生物安全防护知识的考核。3.4培训人员:科室工作人员、新来人员、进修生、实习生、工人等。3.5授课老师:由科室指定中级以上的实验技术人员进行授课,授课内容要每年更新。3.6培训后,要认真填写工作人员培训记录,见附表,存档保存。工作人40、员生物安全防护制度1、目的为了加强工作人员生物安全防护的意识,以科学的态度对待实验室的生物安全问题,保护实验室工作人员安全,特制定本制度。2、适用范围检验科全体工作人员、进修、实习生3、具体内容3.1工作人员必须具有高度的责任心和安全防护意识。3.2工作人员进入实验室内必须穿工作衣、戴工作帽、口罩和手套。禁止非本室工作人员进入工作区。3.3严格按照标准操作规程进行规范操作。3.4禁止在工作室内吸烟、饮水和进食。3.5每天至少对实验室进行一次清洁和消毒。工作后、下班前,要对工作台面和用品用消毒剂擦洗一次,地面每周至少用消毒剂擦洗一次。3.6清洁工具分区使用、分开洗涤、分别放置,标识明显。3.7桌41、面、地面及物品或工作人员裸露部位被污染,应按实验室事故应急处理预案进行处理。3.8按照锐器管理制度管理、使用和处理锐器。3.9废弃物按实验室废弃物管理制度处理。3.10下班前工作人员必须将双手浸入消毒液洗净后方可离室。生物安全工作自查及检查制度1目的:为避免生物危险因子造成实验室人员暴露,向实验室外扩散并导致危害,保护实验人员极其周围环境、人员安全,特制定生物安全自查及检查制度。2范围:检验科各实验室3内容:3.1 实验室应严格按照“医学生物实验室出入管理规定”,对来访者要求科主任签字同意,作好出入登记。3.2 实验室入口及污染区应粘贴生物危险标记,注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名、联系42、电话等。3.3 实验室工作人员应按照“生物安全实验室技术规范”严格各项实验操作,生物安全小组对执行情况进行检查考核。3.4 实验室工作人员应严格按照“实验室消毒隔离制度”和“医用废弃物管理制度”作好消毒隔离工作及废弃物处理工作。3.5 生物安全工作管理小组定期检查实验室生物安全设施、设备是否正常工作,个人防护用品是否佩戴齐备。3.6 发生生物安全事故,应按照“实验室事故应急处理预案”进行处理,并作好相关汇报和记录。3.7 生物安全检查内容见生物安全检查记录表。实验室人员准入制度1、目的:规范进入检验科人员条件,保证实验室人员素质和能力2、适用范围:检验科专业人员3、内容:3.1实验室专业技术人43、员应当具有全日制中专以上检验医学学历,并取得专业技术职务任职资格。3.2实验室一般工作人员应当具有全日制初中以上学历,并通过医学知识、公共安全知识和生物安全知识等培训,并取得相应合格证。3.3实验室专业技术人员进入实验室前必须经过专业知识和技能、质量管理、公共安全、生物安全等培训和考核,考核合格方能进入实验室。3.4实验室专业技术人员进入各专业岗位前,必须经过培训,熟悉该岗位制度、职责、SOP、生物安全防护知识等。3.5实验室专业人员每年至少进行一次生物安全培训和考核,一次意外事故应急处理演练。意外事件处理与报告制度1、目的:能够及时有效处理意外事件,减少不良后果,避免事件扩大,降低事件发生几44、率。2、适用范围:检验科3、内容:3.1意外事件处理制度3.1.1加强职业道德修养,增强工作责任心,提高安全防范意识,作好安全检查。3.1.2认真按照质量管理文件进行操作,加强质量监督、考核和内审制度,防止差错事故发生。3.1.3发生意外事故时,当事人应立即按实验室事故应急处理预案进行处理。3.1.4一般性差错,如果事后发现应立即做好纠正工作。3.1.5发生差错事故或造成医疗事故,按医院有关规定处罚,责任和经济处罚由个人承担。3.1.6差错发生后,科室领导应做好当事人的思想教育工作,加强防范意识,防止再度发生。3.2报告登记制度3.2.1发生意外事件后当事人应立即向科室负责人作出口头或书面报告45、。3.2.2所有发生的意外事件都必须认真查找原因,当事人应填写书面材料,说明事实经过,表明本人的态度及整改措施,并在科室会议上讨论,做好讨论记录。3.2.3所有的医疗纠纷、差错事故均应登记,科室应作出处置意见,科室不能处理的上报医院有关部门处理。不包庇,不隐瞒,不弄虚作假,不采取大事化小、小事化了的做法。3.2.4差错事故的定性,处罚措施应及时通报当事人和全科同志并做好记录。3.2.5一般差错在三十天内报告医教科。3.2.6严重差错和医疗事故在发生的当日尽快上报医务科和分管院领导。实验室资料档案管理制度1 目的保护实验室资料管理规范,机密信息不被侵犯和泄漏,维护本科诚信、独立、公正的形象。2 46、范围2.1临床医生提供的患者信息;2.2检验结果;2.3参加能力验证实验室的验证结果;2.4质量体系的各阶文件和相应运行资料;2.5 法定保密的信息。3 制度3.1实验室一般资料保存2年,血库资料保存10年。3.2重要病人资料只能交病人本人、委托人和经治医师。3.3管理资料、保密资料由科室档案管理员管理,质量控制资料、一般技术资料和记录由各实验室管理。3.4本科专业保密资料由档案管理员统一保管,实行借阅制。3.5对病人个人信息、检验结果等资料不能外泻。4 职责4.1科主任(1)落实保护机密信息的各项措施所需的资源和责任人;(2)批准借阅保密资料。4.2 专业组组长(1)对各项保密措施的实施进行47、监督检查;(2)对监督检查中发现的问题及时向检验科主任报告。(3)批准本组相关人员借阅本专业保密资料,并报科主任最终批准。(4)对本室人员执行各项保密措施进行监督检查。4.3 档案管理员做好档案的编号和保管;4.4 其它有关人员(1)对本人从事和接触到的保密内容保密;(2)对违反保密的行为进行制止,并向上级报告。5 工作程序5.1临床医生提供的患者信息对临床医生提供的患者信息由承担检验任务的人员负责接收、保管、保密。5.2检验结果检验结果以报告形式发出,通常是向临床医生、患者本人或患者家属报告结果。只有经患者同意或按照法定的条款才可向其它方面报告。如要用于诸如流行病学、人口统计学或其它统计分析48、学,必须是与所有患者识别资料分离后的检验结果。原始数据由产生该数据的工作人员负责日常管理,不得随意乱放,其他人员不得随意翻阅。贮存分析结果和检验报告的计算机,科主任指定专人进行管理,检验科工作人员必须通过密码进入操作系统,才能发检验报告单、查阅和修改检验报告;检验报告单一旦审核,只能由审核者本人才能对结果进行修改。临床医生可通过局域网对检验报告单的内容进行查阅。5.3 能力验证和比对结果参加能力验证和室间质评的检验结果需要保密,档案管理员负责保管。5.4 标本的保密特殊标本按按照法定的条款交有关部门保存。5.5质量体系的各阶文件和相应运行资料的保密。未经科主任同意,所有人员不得将质量体系的各层49、文件和相应运行资料外泄。5.6 法定保密的信息所有人员必须遵循。5.7 监督和违章处罚全检验科必须自觉执行本程序的规定和要求。由各组负责人每季度对保密工作实施监督检查。对违反本程序规定的由各组负责人提出纠正的要求,报科主任批准实施;严重的由相关部门进行行政处罚,直至追究司法责任。实验室安全保卫制度1、目的:防止发生安全事故,保证科室人员物资安全2、适用范围:检验科3、内容:3.1科室内水、电、气器具和管路的安装、修理必须由专业人员进行,所用材料是符合国家标准的合格品,操作符合规范。3.2科室内水、电、气器具的使用必须按规范操作。3.3科室内严禁吸烟。3.4易燃和可燃物品必须按要求分开存放。3.50、5科室内配备足够的消防器材。3.6下班时注意关好水、电、气开关,关好门窗,值班人员加强巡查。3.7每周进行一次安全检查,发现异常情况及时上报整改。3.8对科室人员进行安全教育,参加安全知识学习。3.9生物安全按专门规定执行。病原微生物样本采集、运输、处理与保管程序1、 目的为有效预防医务人员在工作中发生职业暴露感染,防止实验室污染、交叉污染和周围环境污染,特制定本制度。2、 概念病原微生物样本是指含有病毒、细菌、真菌、衣原体、支原体、立克次氏体、螺旋体等具有致病微生物的样本。3、 具体指导原则3.1标本采集为避免交叉污染,检验人员原则上不直接进入病区采集标本,如必须进入时,应穿隔离衣、戴口罩、51、戴帽、戴手套。详细登记有关病例的姓名、性别、年龄、家庭住址、联系电话等基本信息以及标本采集日期。采集的标本放入带盖的容器内,盖紧盖子,加注标识,密封送检。采集标本时不能污染容器外部。3.2标本运输送检的标本要求密封包装,放在专门运输用的容器内,加盖,由专人运送。运送过程严防破碎和外溢。送入检验科由专人签收。3.3标本前处理标本编号、接种、血清分离等步骤原则上在生物安全柜内进行。使用专用的离心机,离心时使用密闭的离心机转头或密闭样品杯。3.4标本检测 标本尽量集中在专用区由专人进行检测,以便标本、仪器、环境集中消毒和处理。尽量避免标本分散到多个实验室。3.5标本检测后处理检测后标本以及检测过程中52、使用过的污染废弃物一律集中放入带盖专用污物桶内,用医疗废物袋盛装,高压灭菌后送医院医疗废物收集处集中处理。所有废液加入消毒剂,使有效氯浓度达到2000mg/L,作用4小时后送医院污水站处理。3.6标本的保存分析前标本根据实验需要合理保存。分析后已发出报告的标本原则上不保存,如有特殊需要保存的标本,应保存在加锁的专用冰箱,并作记录,专人管理。禁止将标本放入其他冰箱,以免造成其它物品的污染。医用废弃物管理程序1、目的防止医用废弃物等感染材料中病原菌引起院内感染或环境污染,所有医用废弃物必须严格消毒处理。2、适用范围各种标本、各种盛装容器和处置物品3、具体内容3.1严禁将医疗废物置于生活垃圾中。3.53、2损伤性废物(如针头、刀片、缝合针等)放入专用防刺伤的锐器盒中,运送时不得放入收集袋中,以防运送时造成锐器伤。3.3防锐器伤:禁止将使用后的一次性针头重新套上针头套。禁止用手直接接触使用后的针头、刀片等锐器。3.4可疑或确诊的传染病病人的废物需消毒,可放入2000mg/l有效氯消毒液浸泡消毒1小时。无法消毒且不会在运送中造成污染的物品(损伤性废物除外)用双层收集袋收集,以防收集、运送时泄漏、扩散、污染。并在收集袋上特别说明的地方写明具体情况。3.5所有医疗废物出科室时需标明产生科室、类别、产生日期及需要特别说明的内容。3.6所有长期存放感染性医疗废物的容器必须有盖,随时关启。3.7盛装医疗废物54、时,不得超过包装物或者容器的3/4,应当使用有效的封口方式,使包装物或者容器的封口紧实、严密。3.8包装物或者容器的外表面被感染性废物污染时,应对被污染处进行消毒处理或增加一层包装。3.9生物实验室高危险废物,应当首先在产生地点进行压力蒸汽灭菌或者化学消毒处理,然后按感染性废物收集处理。3.10运送时使用专用污物电梯或专用时段运送,运送后对污物电梯及其他相关物品进行清洁消毒并记录。3.11院医疗废物专职运送人员每天从医疗废物产生地点将分类包装的医疗废物按照规定的时间和路线送至内部指定的暂时贮存地点。3.12医疗废物存放点或污物桶有相关标识,防止非工作人员接触医疗废物。3.13一旦发生医疗废物流55、失、泄漏、扩散等意外事故时,及时采取紧急措施,并启动意外事故紧急预案,对致病人员提供医疗救护和现场救援工作,同时向科室内医疗废物管理兼职人员或科室负责人报告,由其向院感上报。处理结束后写事情经过与今后的预防措施,交防保科备案。高致病性病原微生物防护与上报及感染物消毒程序1、目的:规范高致病性病原微生物的消毒及防护措施,防止高致病性病原微生物对人员的感染和环境污染。2、适用范围:检验科微生物室等实验室。3、方法3.1 可疑高致病性病原微生物标本收集及运送收集标本的工作人员应穿上隔离衣、带目镜、穿统靴、戴口罩(1218层或双层口罩)、双层帽、戴三双手套。标本收集采用专用标本收集桶(桶内套双层黄色塑56、料袋),收集后立即送检。3.2 可疑高致病菌标本检测及消毒步骤操作人员统一穿上隔离衣、带目镜、穿统靴、戴口罩(18层)、双层帽、戴三双手套,将标本装在专门的标本盘后送到专用二级实验室检测。标本接种分离等检测过程必须在生物安全柜里进行。口罩34小时更换一次。检测后将标本及检测材料立即浸泡在含有效氯2000-2500mg/L消毒液中,4小时后再进行高压灭菌。检测结束后的消毒步骤:(1)用避污纸揭开每个消毒容器盖;(2)将戴有三双手套的手全部浸泡在0.2%过氧乙酸3分钟;(3)穿靴浸泡在0.2%过氧乙酸3分钟;(4)取下第一层手套放入黄口袋后,用2000mg/L含氯消毒剂擦工作台面及仪器,然后将手浸57、泡在0.2%过氧乙酸3分钟。(5)揭第一层帽(放入黄口袋)揭目镜(于0.2%过氧乙酸缸)取口罩(于0.2%过氧乙酸缸)脱隔离衣(放入黄口袋,扎紧)脱靴(穿鞋)。(6)取第二层手套放入黄口袋,双手再浸泡于另一有0.2%过氧乙酸容器中3分钟。(7)取下最后一层手套,用肥皂洗手,流水冲洗三分钟。(8)用0.2%过氧乙酸喷雾空气或用紫外线消毒空气。(9)用0.2%过氧乙酸或2000mg/L含氯制剂消毒地面。3.3检出可疑高致病菌的报告规定 如检出可疑高致病菌应立即向医院院感办报告, 院感办在2小时内报告区、市疾病控制中心。病原微生物风险评估和风险控制程序1、目的:对病原微生物危险度进行评估,实施必要的58、控制措施。2、适用范围:检验科3、内容:3.1检验科生物安全小组对实验室病原微生物的危险度进行风险评估。3.2实验室病原微生物风险评估报告须经医院生物安全委员会批准。3.3病原微生物实验室按照已经批准的风险评估报告进行规定范围内的病原微生物检验工作。3.4按照病原微生物风险评估报告的等级建设实验室生物安全设施。3.5按照病原微生物风险评估报告的等级作好个人生物安全防护。3.6按照病原微生物风险评估报告的等级配备生物安全防护用品,并有一定量的储备。3.7根据病原微生物风险评估报告向卫生行政机关备案。实验室生物安全事件和涉恐事件应急处理预案1、目的根据卫生部微生物和生物医学实验室生物安全通用准则和59、病原微生物实验室生物安全管理条例,为减少涉及潜在传染性材料、化学品或有害物质的不利作用和事件的发生,提供实验室内可能遇到与危险相适应的紧急医学处理措施,特制定本预案。2、使用范围本规定适用于本科所有实验室。3、具体内容3.1少量样本溅泼在工作台面或地面时,以0.5%次氯酸钠或过氧乙酸覆盖1小时后洗去。3.2标本离心时试管破裂,应戴上手套,用镊子将试管碎片夹出。离心机内塑料套管用2000mg/L有效氯消毒液浸泡4小时后用清水洗净。用2%戊二醛擦拭离心机,半小时后用清水擦净。3.3手和足被样本污染时,以0.2%过氧乙酸洗涤消毒;污染工作服应立即更换,用2000mg/L有效氯消毒液浸泡30分钟,交医60、院洗涤室清洗。3.4被大量烈性传染病病原菌污染时,除采取上述应急措施外,立即封闭现场,上报实验室负责人及市疾病预防控制中心,请防疫人员处理。3.5误服微生物悬液者,立即用水含漱,洗胃,催吐等方式处理;若标本溅入或接触到皮肤上,立即用0.2%过氧乙酸浸泡消毒;溅入眼中者,以无菌生理盐水冲洗后,每隔1小时用抗生素眼药水滴眼。视具体情况作针对性的处理。3.6除特殊情况外,禁止在实验室使用针、注射器及其他锐器,尽可能使用塑料器材代替玻璃器材。禁止用手对任何利器进行毁损、弯曲、折断、重新戴套或从注射器上移去针头。禁止用手处理破碎的玻璃器具。如被针刺、刀割或其他形式的损伤,致伤口与病毒标本直接接触,或者带61、病毒样本碰到皮肤,应在伤口旁轻轻挤压,尽可能挤出损伤处的血液,再用肥皂液和流动水进行冲洗,禁止进行伤口的局部挤压;受伤部位的伤口清洗后,应当用消毒液,如75%乙醇或0.5%碘伏进行消毒,并包扎伤口,给予必要的预防和相应的抗生素处理。对于毒性较强的病原体,必须立即向实验室负责人报告,根据不同病原体采取相应的应急措施,并予以详细的登记。3.7 腐蚀品大量溅泼于人身上、应立即用自来水冲洗,若溅泼在工作台面或地面上,应及时冲洗台面或地面,执行者应佩带个人防护用品。3.8易燃品引起火灾应使用CO2灭火器灭火,切断电源,除灭火人员外,其他人员按安全线路撤离,同时报警寻求消防部门援助。3.9水银温度计断裂,62、用毛细管吸走水银,按危险化学品安全管理办法处理。3.10化学品进入眼睛的处理必须立即紧急处理,用大量清水冲洗眼球,并送眼科医生处理;可用一次性吸管吸生理盐水冲洗眼睛,冲水时要将两眼张开,一面冲水一面转动眼球至少15分钟,越早将药品清洗出来,眼睛受害程度越小。3.11吸入有毒物蒸气的处理 在实验室中如呼吸到有毒蒸气时,可能会感觉到头昏目眩,甚至昏倒。此时应迅速离开实验室,到室外空气流通处休息。对昏倒的患者其处理办法为:将患者迅速抬到室外空气流通处;解开患者的钮扣、领带等衣物束缚,平躺通风处;如果呼吸微弱或已消失则要赶快进行口对口人工呼吸,并通知相关科室医生。3.12化学品灼伤的处理 任何化学药品63、(不论水溶性与否),当溅落在皮肤上时应立即用大量水冲洗,并用肥皂清洗。当落在皮肤上的药品属强酸或强碱时则立刻用大量冷水清洗,如大量药品喷洒到全身,则应马上除去衣物并冲水浴。3.13衣服着火时紧急处理不可奔跑;用防火毯或实验衣包裹身体灭火;可在较大空地上翻滚以便灭火;用安全淋洗设备冲洗或用灭火器灭火。3.14触电时紧急处理症状较轻者:即神智清醒,呼吸心跳均自主者可就地平卧,严密观察,暂时不要站立或走动,防止继发休克或心衰。 呼吸停止、心搏存在者:将伤者就地平卧,解松衣扣,通畅气道,立即进行口对口人工呼吸;心搏停止、呼吸存在者:应立即作胸外心脏按压; 呼吸心跳均停止者:现场抢救最好能两人分别施行口64、对口人工呼吸及胸外心脏按压,以1比5的比例进行,即人工呼吸1次,心脏按压5次;如现场抢救仅有1人,应按2比15的比例进行人工呼吸和胸外心脏按压。 处理电击伤时,应注意有无其他损伤。如触电后弹离电源或自高空跌下,常并发颅脑外伤、血气胸、内脏破裂、四肢和骨盆骨折等。以上情况(3.14.2-3.14.5),均需立即通知相关科室医生及时处理。3.15遇火灾、地震或其他自然灾害时,视建筑物或实验室遭破坏程度,隔离污染区和污染源,有效消毒、疏散工作人员,及时上报主管部门。3.16遇生物恐怖事件:立即通知科室负责人及医院有关部门,同时封锁现场,对事件的大小、严重性进行评估作出判断,对有能力和条件处理的事件采65、取相应的措施,对不能处理和无条件处理的事件,维持好现场,等有关部门和人员进行处理。实验室生物安全规范目录第一部分 基本规范1进入规定1人员防护1实验室工作区1生物安全管理1第二部分 实验室技术2移液管和移液辅助器的使用2生物安全柜的使用2血清的分离3离心机的使用3冰箱与冰柜的维护和使用4装有冻干物质安瓿的开启4第三部分 消毒和灭菌4一、定义4二、化学杀菌剂5氯(次氯酸钠)5二氯异氰尿酸钠6氯胺6甲醛6戊二醛7酚类化合物7季铵盐类化合物8乙醇8碘和碘伏9过氧化氢和过氧乙酸9三、清除局部环境的污染9四、洗手清除手部污染10五、高压灭菌10高压灭菌参数10高压灭菌器的装载10高压灭菌器使用注意事项166、1附录112设备的安全性12表A1-1 可能产生危害的仪器设备及其操作12表A1-2 仪器设备相关事故的原因13表A1-3 生物安全设备13表A1-4 个体防护装备14附录215实验室有毒、有害物品标准管理规程15第一部分 基本规范根据感染性微生物的相对危害程度(危险度2级,病原体能够对人致病,但对实验室工作人员或环境不易导致严重危害),本实验室为基础实验室,属于二级生物安全水平。进入规定1、在实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志(图1)。2、只有经批准的人员方可进入实验室工作区域。3、实验室的门应保持关闭。4、儿童不应被批准或允许进入实验室工作区域。5、进入动物房应当经过特别批准。6、67、与实验室工作无关的动物不得带入实验室。图1 张贴于实验室门上的生物危害警告标志人员防护1、在实验室工作时,任何时候都必须穿着工作服。2、在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时,应戴上合适的手套。手套用完后,应先消毒再摘除,随后必须洗手。3、在处理完感染性实验材料和动物后,以及在离开实验室工作区域前,都必须洗手。4、为了防止眼睛或面部受到泼溅物、碰撞物或人工紫外线辐射的伤害,必须戴安全眼镜、面罩(面具)或其他防护设备。5、严禁穿着实验室工作服离开实验室,(如去餐厅、咖啡厅、办公室、图书馆、员工休息室和卫生间)。6、不得在实验室内穿露脚趾的鞋子。7、禁68、止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜。8、禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。9、在实验室内用过的工作服不得和日常服装放在同一柜子内。实验室工作区1、实验室应保持清洁整齐,严禁摆放和实验无关的物品。2、发生具有潜在危害性的材料溢出以及在每天工作结束之后,都必须清除工作台面的污染。3、所有受到污染的材料、标本和培养物在废弃或清洁再利用之前,必须清除污染。4、在进行包装和运输时必须遵循国家和或国际的相关规定。5、如果窗户可以打开,则应安装防止节肢动物进入的纱窗。生物安全管理1、实验室主任(对实验室直接负责的人员)负责制订和采用生物安全管理计划以及安全或操作手册。2、实验室主管(向69、实验室主任汇报)应当保证提供常规的实验室安全培训。3、要将生物安全实验室的特殊危害告知实验室人员,同时要求他们阅读生物安全或操作手册,并遵循标准的操作和规程。实验室主管应当确保所有实验室人员都了解这些要求。实验室内应备有可供取阅的安全或操作手册。4、应当制订节肢动物和啮齿动物的控制方案。5、如有必要,应为所有实验室人员提供适宜的医学评估、监测和治疗,并应妥善保存相应的医学记录。 第二部分 实验室技术实验室伤害以及与工作有关的感染主要是由于人为失误不良实验技术以及仪器使用不当造成的。本部分概要介绍了避免或尽量减少这类常见问题的技术和方法。移液管和移液辅助器的使用1、应用移液辅助器,严禁用口吸取。70、2、所有移液管应带有棉塞以减少移液器具的污染。3、不能向含有感染性物质的溶液中吹入气体。4、感染性物质不能使用移液管反复吹吸混合。5、不能将液体从移液管内用力吹出。6、污染的移液管应完全浸入适当的消毒液中,并在消毒液中浸泡适当时间后再进行处理。7、盛放废弃移液管的容器应当放在生物安全柜内。8、为了避免感染性物质从移液管中滴出而扩散,在工作台面应当放置一块吸有消毒液的纸,使用后将其按感染性废弃物处理。生物安全柜的使用1、生物安全柜运行正常时才能使用。2、生物安全柜在使用中不能打开玻璃观察挡板。3、安全柜内应尽量少放置器材或标本,不能影响后部压力排风系统的气流循环。4、所有工作必须在工作台面的中后71、部进行,并能够通过玻璃观察挡板看到。5、尽量减少操作者身后的人员活动。6、操作者不应反复移出和伸进手臂以免干扰气流。7、不要使实验记录本移液管以及其他物品阻挡空气格栅,因为这将干扰气体流动,引起物品的潜在污染和操作者的暴露。8、工作完成后以及每天下班前,应使用70%的酒精对生物安全柜的台面进行擦拭,但切忌用酒精擦拭玻璃挡板。9、在安全柜内的工作开始前和结束后,安全柜的风机应至少运行5min。10、在生物安全柜内操作时,不能进行文字工作。血清的分离1、只有经过严格培训的人员才能进行这项工作。2、操作时应戴手套以及眼睛和黏膜的保护装置。3、血液和血清应当小心吸取,而不能倾倒。严禁用口吸液。4、移液72、管使用后应完全浸入适当的消毒液中,并在消毒液中浸泡适当的时间,然后再丢弃或灭菌清洗后重复使用。5、带有血凝块等的废弃标本管,在加盖后应当放在适当的防漏容器内高压灭菌。离心机的使用1、应按照操作手册来操作离心机。2、离心管在使用前应检查是否破损。3、用于离心的离心管应当始终牢固盖紧。4、离心桶的装载、平衡、密封和打开必须在生物安全柜内进行。5、离心桶和十字轴应按重量配对,并在装载离心管后正确平衡。6、操作指南中应给出液面距离心管管口需要留出的空间大小。7、空离心桶应当用蒸馏水来平衡。8、每次使用后,要清除离心桶、转子和离心机腔的污染。9、使用后应当将离心桶倒置存放使平衡液流干。10、应当每天检查73、离心机内转子部位的腔壁是否被污染或弄脏,如污染明显,应重新评估离心操作规范。冰箱与冰柜的维护和使用1、冰箱、低温冰箱和干冰柜应当定期除霜和清洁,应清理出所有在储存过程中破碎的安瓿和试管等物品。清理时应戴厚橡胶手套并进行面部防护,清理后要对内表面进行消毒。2、储存在冰箱内的所有容器应当清楚地标明内装物品的科学名称、储存日期和储存者的姓名。未标明的或废旧物品应当高压灭菌并丢弃。3、应当保存一份冻存物品的清单。4、除非有防爆措施,否则冰箱内不能放置易燃溶液。冰箱门上应注明这一点。装有冻干物质安瓿的开启1、首先清除安瓿外表面的污染。2、如果管内有棉花或纤维塞,可以在管上靠近棉花或纤维塞的中部锉一痕迹。74、3、用一团酒精浸泡的棉花将安瓿包起来以保护双手,然后手持安瓿从标记的锉痕处打开。4、将顶部小心移去并按污染材料处理。5、如果塞子仍然在安瓿上,用消毒镊子除去。6、缓慢向安瓿中加入液体来重悬冻干物,避免出现泡沫。 第三部分 消毒和灭菌一、定义关于消毒和灭菌有许多不同的术语,下面是生物安全中较常用的:抗菌剂(antimicrobial) 能够杀死微生物或抑制它们生长和繁殖的制剂。防腐剂(antiseptic) 能够抑制微生物生长和繁殖但不足将其杀灭的物质。防腐剂经常应用于体表。生物杀灭剂(biocide) 所有能够杀死生物体的制剂的统称。化学杀菌剂(chemicalgermcide)用于杀死微生物75、的化学品或化学混合物。清除污染(decontamination)去除和或杀死微生物的任何过程。该词也用于去除或中和有危害的化学品和放射性物质。消毒剂(disinfectant) 用于杀死微生物的化学品或化学混合物,但不一定杀死其孢子。消毒剂常用于非生命物体或其表面。消毒(disinfection) 杀死微生物的物理或化学手段,但不一定杀死其孢子。灭菌剂(microbicide) 能够杀死微生物的化学品或化学混合物。该词常常可以代替“生物杀灭剂”、“化学杀菌剂”或“抗菌剂”。杀孢子剂(sporocide) 用于杀死微生物和孢子的化学品或化学混合物。灭菌(sterilization) 杀死和或去除76、所有微生物及其孢子的过程。二、化学杀菌剂许多杀菌剂对人或环境有害,应当按生产商的说明小心地进行选择、贮存、操作、使用和废弃。为了个人的安全,建议在稀释化学杀菌剂时应戴手套、围裙和保护眼睛的器具。下面介绍一些常规使用的化学杀菌剂,并列出它们的一般用途和安全特征。除非另外标注,杀菌剂的浓度用重量体积(w/v)来表示。表3-1汇总了含氯消毒剂的推荐使用浓度。表1 含氯消毒剂的推荐使用浓度“清洁”情况下a“污染”情况下b所需的有效氯浓度0.1%(1 g/L)0.5%(5 g/L)次氯酸钠溶液(含有5的有效氯)20 mL/L100 mL/L次氯酸钙(含有70的有效氯)1.4 g/L7.0 g/L二氯异氰77、尿酸钠粉剂(含60的有效氯)1.7 g/L8.5 g/L二氯异氰尿酸钠片剂(每片含1.5 g 有效氯)每升1 片每升4 片氯胺(含有25的有效氯)c20 g/L20 g/La 去除大部分污染材料后b 溢流情况(如血液)或大量污染材料没有除去时c 参见正文氯(次氯酸钠)1、氯属于快速作用的氧化剂,是一种可广泛应用的广谱化学杀菌剂。它一般以次氯酸钠(NaOCl)溶液来作为漂白剂销售。但氯的许多副产物可能对人体及环境有害,应该避免滥用含氯消毒剂,特别是漂白剂。2、常规实验室消毒剂的有效氯浓度为1 g/L。处理生物危害性物质的溢出以及含有大量有机物的情况时用含有5 g/L 有效氯的更强作用的溶液。家用78、漂白剂的次氯酸钠溶液含有50 g/L 的有效氯,工业用漂白剂的次氯酸钠溶液含有近120 g/L 的有效氯,因此必须进行相应的稀释来达到工作浓度。3、次氯酸钙Ca(ClO)2的颗粒或片剂一般含有70%的有效氯。用颗粒或片剂配制浓度1.4 g/L 或7.0 g/L 的溶液,其有效氯浓度分别为1 g/L 和5 g/L。4、不建议将漂白剂当作防腐剂使用,但可以用作普通目的的消毒剂以及用于浸泡非金属类的污染材料。在紧急情况下也可以用终浓度含12 mg/L 有效氯的漂白剂来消毒饮用水。5、氯气具有强毒性。因此漂白剂只能在通风良好的地方储存和使用。6、漂白剂不能与酸混合以避免氯气快速释放。二氯异氰尿酸钠1、79、血液或其他生物危害性液体溢出时,可以使用固体NaDCC,并使其作用至少10min后再除去,然后对污染区进行进一步的清理。2、二氯异氰尿酸钠(NaDCC)的粉剂含有60%的有效氯。用NaDCC 粉剂配制的浓度为1.7 g/L和8.5 g/L 的溶液将分别含有1 g/L 和5 g/L 的有效氯。3、NaDCC 片剂一般每片含有1.5g 的有效氯,将1 片或4 片溶于1 升水将分别获得浓度约为1 g/L 和5 g/L 的溶液。4、粉剂或片剂的NaDCC 储存既方便又安全。氯胺1、因氯胺释放氯的速度比次氯酸慢,且有机物对氯胺溶液的影响没有次氯酸溶液那么大,在“清洁”和“污染”情况下都推荐使用20 g/80、L 的浓度。2、氯胺溶液实际上无臭味,但是,浸泡在氯胺中的物品必须要彻底清洗,以除去加入到氯胺-T粉剂中的填充剂的残留物。甲醛1、市场上出售的产品为多聚甲醛一种固体多聚体,呈薄片状或小块状,或为福尔马林一种浓度约为370 g/L(37)的气体水溶液,其中含甲醇(100 mL/L)作为稳定剂。两种形式加热都可以产生气体,用于封闭空间(如生物安全柜和房间)的清除污染和消毒。2、甲醛(5福尔马林水溶液)可以作为液体消毒剂。3、在温度高于20时,甲醛(HCHO)是一种能够杀死所有微生物及其孢子的气体。但甲醛对朊蛋白没有杀灭活性。4、甲醛起效相对较慢,并需要相对湿度达70左右。5、甲醛被怀疑是一种致癌剂81、。它具有刺鼻的气味,其气体能够刺激眼睛和黏膜,因此必须在通风橱或通风良好的地方储存和使用。必须遵守国家化学品安全规定。戊二醛1、戊二醛OHC(CH2)3CHO对繁殖的细菌、孢子、真菌和含脂或不含脂的病毒具有活性。它不具有腐蚀性,比甲醛作用迅速,但也需要几个小时才能杀死细菌孢子。2、通常供应的戊二醛是浓度约20 g/L(2)的溶液,绝大部分产品使用前需要加入与产品一同提供的碳酸氢盐混合物进行“活化”(变成碱性)。活化的溶液根据其配方设计、应用类型和使用频率等情况可以重复使用14 周。如果戊二醛溶液变混浊,就应当将其废弃。3、戊二醛具有毒性,并对皮肤和黏膜具有刺激性,应当避免与其接触。必须在通风橱82、或通风良好的地方使用。不建议采用其喷雾剂或溶液来清除环境表面的污染。必须遵守化学品安全的国家规定。酚类化合物1、许多酚类产品可用于清除环境表面的污染,有些(如三氯生和氯二甲酚)是最常用的抗菌剂。2、酚类化合物是一大类最早使用的杀菌剂。但是,最近出于安全考虑而限制了它的使用。3、它们对繁殖细菌和含脂病毒具有活性,适当配制后,对分枝杆菌也有活性。它们对孢子没有活性,而对于非含脂病毒的活性则不确定。4、三氯生常作为洗手用品。它主要对繁殖的细菌有活性,并且对皮肤和黏膜是安全的。5、有些酚类化合物对水的硬度敏感,并可能导致失活,因此必须使用蒸馏水或去离子水来进行稀释。6、不建议在食物接触的表面和幼儿活动83、场所使用酚类化合物。它们可能被橡胶吸收,也可能渗透皮肤。必须遵守国家化学品安全规定。季铵盐类化合物1、季铵盐类化合物对繁殖的细菌和含脂类病毒具有良好活性,但有些具有潜在危害性的细菌仍能够在季铵盐化合物溶液中生长。某些类型(如苯扎氯铵)也用作防腐剂。2、这些化合物由于其生物降解能力较低,可能在环境中蓄积。3、季铵盐类化合物大多混合使用,也经常与醇类等其他杀菌剂联合使用。4、有些季铵盐类化合物的杀菌作用会受有机质、水的硬度以及阴离子去污剂的显著影响,因此当使用季铵盐化合物进行消毒时,要认真选择预清洁所用的品种。乙醇1、乙醇(C2H5OH)对于繁殖的细菌、真菌和含脂病毒具有活性,但不能灭活孢子,而对84、非含脂病毒的作用则不确定。2、其水溶液最有效的使用浓度约为70(v/v);更高或更低的浓度均不适宜杀菌。3、醇类溶液的主要优点是处理后物品不会留下任何残留物。4、将乙醇与其他试剂混合使用比单独使用更有效,如70(v/v)乙醇和100 g/L 的甲醛混合使用,以及使用含有2 g/L 有效氯的乙醇。5、70%(v/v)乙醇溶液可以用于消毒皮肤、实验台和生物安全柜的工作台面,以及浸泡小的外科手术器械。6、由于乙醇可以使皮肤干燥,所以经常与润滑剂混合使用。7、在不便于或不可能进行彻底洗手的情况下,推荐使用含乙醇的擦手液对轻度污染的手进行消毒。但是必须记住,乙醇对孢子无效,而且不能杀死所有类型的非含脂类85、病毒。8、乙醇是易挥发和易燃的,不能在明火附近使用。9、其工作液应储存在适当的容器内以避免醇类挥发。10、乙醇可以硬化橡胶并溶解某些胶质。11、为了避免乙醇用于其他非灭菌目的,在实验室里对乙醇进行专门的清点和储存是非常重要的。12、含有乙醇溶液的瓶子必须清楚标记以避免被意外高压灭菌。碘和碘伏1、这类消毒剂的作用与氯类似,只是有机质对它们的抑制作用略弱。2、碘可以使纤维和环境表面着色,一般不适合作为消毒剂。但是,碘伏和碘酊是很好的抗菌剂。3、多聚碘(polyvidone iodine)是一种安全可靠的外科手术擦手剂和手术前皮肤抗菌剂。4、碘类抗菌剂一般不适于医疗牙医器械的消毒。5、碘不能在铝或铜86、上使用。6、碘有毒性。含有有机碘的产品必须于410储存,以避免有潜在危害性的细菌在里面生长。过氧化氢和过氧乙酸1、过氧化氢(H2O2)和过氧乙酸(CH3COOOH)是强氧化剂,是一种广谱杀菌剂。对人和环境它们较氯安全。2、过氧化氢能够用于清除实验台和生物安全柜工作台面的污染。3、通常供应的过氧化氢是可以立即使用的3的溶液,或是用无菌水稀释510 倍体积后使用的30的水溶液。但是,那种单独含有36过氧化氢的溶液杀菌作用缓慢而有限。现有产品中含有其他成分来稳定过氧化氢,加速其杀菌作用并降低其腐蚀性。4、过氧化氢和过氧乙酸能腐蚀铝、铜、黄铜和锌等金属,也能使纤维、头发、皮肤及黏膜褪色。5、经它们处理87、的物品必须经过彻底的漂洗后才能接触眼睛和黏膜。6、它们应当储存在避热和避光的地方。三、清除局部环境的污染1、清除表面污染时使用次氯酸钠(NaOCl)溶液;含有1有效氯的溶液适于普通的环境卫生设备,但是当处理高危环境时,建议使用高浓度(5 g/L)溶液。用于清除环境污染时,含有3过氧化氢的溶液也可以作为漂白剂的代用品。2、通过加热多聚甲醛或煮沸福尔马林所产生的甲醛蒸气熏蒸来清除房间和仪器的污染。产生甲醛蒸气前,房间的所有开口(如门窗等)都应用密封带或类似物加以密封。熏蒸应当在室温不低于21且相对湿度70%的条件下进行。清除污染时气体需要与物体表面至少接触8 h。熏蒸后,该区域必须彻底通风后才能允88、许人员进入。在通风之前需要进入房间时,必须戴适当的防毒面具。可以采用气态的碳酸氢铵来中和甲醛。这是一项需要由专门培训的专业人员来进行的、非常危险的操作。四、洗手清除手部污染1、实验室人员需要经常地、彻底地洗手。2、处理完生物危害性材料和动物后以及离开实验室前均必须洗手。3、大多数情况下,用普通的肥皂和水彻底冲洗对于清除手部污染就足够了。但在高度危险的情况下,建议使用杀菌肥皂。手要完全抹上肥皂,搓洗至少10 秒钟,用干净水冲洗后再用干净的纸巾或毛巾擦干。4、应使用纸巾或毛巾来关上水龙头,以防止再度污染洗净的手。5、如果没有条件彻底洗手或洗手不方便,应该用酒精擦手来清除双手的轻度污染。五、高压灭菌89、高压灭菌的湿热法是最常用、最为有效的清除病原体污染的物理手段。灭菌后的物品必须小心操作并保存,以保证在使用之前不再被污染。高压灭菌参数对于大多数目的,下列组合可以确保正确装载的高压灭菌器的灭菌效果:1、134、3min2、126、10min3、121、15min4、115、25min高压灭菌器的装载为了利于蒸汽的渗透和空气排出,高压灭菌物品应松散包装放置在灭菌器内。要使蒸汽能够作用到其内容物。高压灭菌器使用注意事项1、应由受过良好培训的人员负责高压灭菌器的操作和日常维护。2、由有资质人员定期检查灭菌器柜腔、门的密封性以及所有的仪表和控制器。3、应使用饱和蒸汽,并且其中不含腐蚀性抑制剂或其他化学90、品,这些物质可能污染正在灭菌的物品。4、所有要高压灭菌的物品都应放在空气能够排出并具有良好热渗透性的容器中;灭菌器柜腔装载要松散,以便蒸汽可以均匀作用于装载物。5、当灭菌器内部加压时,互锁安全装置可以防止门被打开,而没有互锁装置的高压灭菌器,应当关闭主蒸汽阀并待温度下降到80以下时再打开门。6、当高压灭菌液体时,由于取出液体时可能因过热而沸腾,故应采用慢排式设置。7、即使温度下降到80以下,操作者打开门时也应当戴适当的手套和面罩来进行防护。8、在进行高压灭菌效果的常规监测中,生物指示剂或热电偶计应置于每件高压灭菌物品的中心。最好在“最大”装载时用热偶计和记录仪进行定时监测,以确定灭菌程序是否恰91、当。9、应当注意保证高压灭菌器的安全阀没有被高压灭菌物品中的纸等堵塞。附录1设备的安全性仪器设备在使用时,有些操作可能造成微生物学危害,而另外一些操作或处理则是专门设计用来避免或减少生物学危害的。表A1-1 可能产生危害的仪器设备及其操作仪器危害如何消除或减少危害皮下注射针头 意外接种、产生气溶胶或有害物质溢出 不要重新给针头戴护套或截断针头。 使用针头锁定型注射器以避免针头和注射器的分离,或使用针头和注射器为一体的一次性注射器。 采用规范的实验室技术,例如:注射器抽液时要小心,尽可能减少形成气泡和接种物泡沫。避免用注射器来混合感染性液体;否则,要确保针头的尖端伸入到容器中液面之下,并避免用力92、过大。从有橡皮塞的瓶子中取下针头之前,应用经适当消毒剂浸湿的脱脂棉来包裹针头和塞子。竖直向上将注射器中过量的液体和气泡排到经适当消毒剂浸湿的脱脂棉或装有棉花的小瓶中。 操作感染性物质时均应在生物安全柜中进行。 在对动物进行接种时要进行固定。在进行鼻腔或口腔接种时要使用钝的针头或插管。操作应在生物安全柜中进行。 使用后要进行高压灭菌并确保进行了妥善处理。如果使用的是一次性针头和注射器,只有在高压灭菌后才能拆卸。离心机产生气溶胶、喷溅及离心管破裂 使用可封闭性的容器(安全杯)或密封转子。在气溶胶沉降后(30min)再打开容器或转子,或在生物安全柜中操作。超速离心机产生气溶胶、喷溅及离心管破裂 在离93、心机和真空泵之间安装HEPA 过滤器。 每个转子均有运转时间的记录,并应制订预防性维修保养措施以减少发生机械故障的风险。 在生物安全柜中装、卸容器或转子。厌氧罐爆炸、感染性物质扩散 确保催化剂周围电线盒的完整性。干燥器内爆、玻璃碎片和感染性物质扩散 置于坚固的金属丝笼中。匀浆器、组织研磨机产生气溶胶、泄漏和容器破裂 在生物安全柜中操作并打开仪器。 使用专门设计可以避免在转子轴承和O形垫圈处泄漏的仪器型号,或使用消化器。 在打开匀浆器以前先等候30min 以使气溶胶沉积。冷却以使气溶胶凝聚。 如果使用手动组织研磨器,管外用可吸收材料包裹。超声处理器、超声波清洗仪产生气溶胶、听力损伤、皮肤炎 在生94、物安全柜或密封单元中操作并打开仪器。 确保隔离以免受分频谐波的伤害。 戴上手套以保护清洁剂对皮肤造成的化学危害。培养搅拌器、振荡器、搅拌器产生气溶胶、喷溅和泄漏 在生物安全柜或专门设计的一级屏障内操作。 使用结实的带螺口盖的培养瓶,必要时安装有过滤器保护的出口,并严格固定。冷冻干燥机(冻干机)产生气溶胶和直接接触污染材料 使用O 形连接器来密封整个机器。 使用空气过滤器来保护真空管。 使用有效的清除污染的方法,例如化学法。 配备全金属脱水器和蒸汽冷凝器。 仔细检查所有玻璃真空管表面是否有擦痕。仅限使用专门设计用于真空作业的玻璃器具。水浴器微生物生长。叠氮化钠与有些金属形成爆炸性混合物。 确保定95、期清洁和消毒。 不用叠氮化钠作抑菌剂。表A1-2 仪器设备相关事故的原因事故事故原因减少或消除危害设计或建造有缺陷培养箱有电火花电击没有温度过高断路装置没有提供可靠的接地 符合国家标准不适当使用离心事故转轴上的离心桶吊篮没有平衡 培训和监督工作人员厌氧培养箱爆炸不正确使用气体 培训和监督工作人员不正确配用家用保温瓶爆炸液氮运输不当 使用专门设计的仪器设备家用型冰箱爆炸危险性化学品没有储存在防火防爆容器中,如用渗漏的螺旋瓶盖储存乙醚。 低闪点溶剂和提取物仅贮存在具有火花爆炸保护装置的冰箱或安全柜中。缺乏正确的维护火焰光度计产生的火焰维护过程中各组件的重新组装不正确。 培训和监督工作人员表A1-396、 生物安全设备设备避免的危害安全性特征生物安全柜级气溶胶和喷溅 尽量减小工作入口处向内的气流(正面气流速度);排风经充分过滤 不能保护操作对象级气溶胶和喷溅 尽量减小工作窗口处向内的气流(正面气流速度);排风经充分过滤 可以保护操作对象级气溶胶和喷溅 最高防护 如果内部为层流气流,则可以保护操作对象负压柔性薄膜隔离装置气溶胶和喷溅 最高水平防护喷溅罩化学品喷溅 在操作人员和工作区之间形成屏障移液辅助器由于口吸产生的危害,例如病原体的食入、吸入用口抽吸吸管时所生成的气溶胶、从吸管中吹出或滴出液体、吸管吸入端的污染等 便于使用 控制吸管吸入端的污染,保护移液辅助器、操作者和真空管道 可以灭菌 控制97、吸管尖端的泄漏微型接种环加热器、一次性接种环移动接种环时造成的喷溅 遮护玻璃管或陶瓷管的开口端,采用气体或电加热 一次性的,不需加热设 施 内 用 于收集并运送感染性物质进行灭菌的防漏容器产生气溶胶、溢出和泄漏 有罩或盖子的防漏结构 耐用 耐高压灭菌盛放锐器的一次性容器意外刺伤 耐高压灭菌 坚固,不易刺破实验室和单位间运送物品的容器微生物泄漏 坚固 能盛放溢出物的防水性一级和二级容器 用于吸收溢出物的材料手动或自动的高压灭菌器感染性物质(以保证丢弃或重复使用时的安全) 经批准的设计 有效的加热灭菌螺口盖的瓶子产生气溶胶和泄漏 有效的防护真空管道保护装置气溶胶和溢出液体对实验室真空系统的污染 可98、以阻止气溶胶通过的滤筒式过滤器(颗粒大小0.45m) 装有适当消毒剂的防溢烧瓶。在贮存瓶盛满时橡皮球阀可自动关闭真空系统 整个系统耐高压灭菌表A1-4 个体防护装备装备避免的危害安全性特征实验服、隔离衣、连体衣污染衣服 背面开口 罩在日常服装外塑料围裙污染衣服 防水鞋袜碰撞和喷溅 不露脚趾护目镜碰撞和喷溅 防碰撞镜片(必须有视力校正或外戴视力校正眼镜) 侧面有护罩安全眼镜碰撞 防碰撞镜片(必须有视力校正) 侧面有护罩面罩碰撞和喷溅 罩住整个面部 发生意外时易于取下防毒面具吸入气溶胶 在设计上包括一次性使用的、整个面部或一半面部空气净化的、整个面部或加罩的动力空气净化(powered air p99、urifying,PAPR)的以及供气的防毒面具手套 直接接触微生物划破 得到微生物学认可的一次性乳胶、乙烯树脂或聚腈类材料 保护手 网孔结构附录2实验室有毒、有害物品标准管理规程目 的:建立实验室有毒、有害物品的安全管理规程,防止试剂或药品的丢失以及人员中毒,保障人员安全。范 围:下列物品属危险物品管理的范围,仅供参考。1、致癌物质黄曲霉素B1、亚硝胺、34苯并芘等(以上为强致癌物质);2乙酰氨基芴、4氨基联苯、联苯胺及其盐类、3,3二氯联苯胺、4二甲基氨基偶氮苯、1萘腔、2萘胺、4硝基联苯、N亚硝基二甲胺、丙内酯、4,4甲叉(双)2氯苯胺、乙撑亚胺、氯甲甲醚、二硝基萘、羧基镍、氯乙烯、同苯100、二酚、二氯甲醚、溴化乙锭(EB)、DEPC(焦碳酸二乙酯)、放线菌素D、放射性物质(同位素标记时)等。2、剧 毒六氯苯、羧基铁、氰化钠、氢氟酸、氢氰酸、氯化氰、氯化汞、砷酸汞、汞蒸气、砷化氢、光气、氟光气、磷化氢、三氧化二砷、有机砷化物、有机磷化物、有机氟化物、有机硼化物、铍及其化合物、丙烯腈、乙腈等。(本实验室无上述剧毒化学品)3、高 毒氟化钠、对二氯苯、甲基丙烯腈、丙酮氰醇、二氯乙烷、三氯乙烷、偶氮二异丁腈、黄磷、三氯氧磷、五氯化磷、三氯化磷、五氧化二磷、三氯甲烷、溴甲烷、二乙烯酮、氧化亚氮、铊化合物、四乙基铅、四乙基锡、三氯化锑、溴水、氯气、五氧化二钒、二氧化锰、二氯硅烷、三氯甲硅烷、苯101、胺、硫化氢、硼烷、氯化氢、氟乙酸、丙烯醛、乙烯酮、氟乙酰胺、碘乙酸乙酯、溴乙酸、乙酯、氯乙酸乙酯、有机氰化物、芳香胺、迭氮黄砷化钠、叠氮钠等。(本实验室无上述高毒化学品)4、中 毒苯、四氯化碳、三氯硝基甲烷、乙烯吡啶、三硝基甲苯、五氯酚钠、硫酸、砷化镓、丙烯酰胺、环氧乙烷、环氧氯丙烷、烯丙醇、二氯丙醇、糖醛、三氟化硼、四氯化硅、硫酸镉、氯化镉、硝酸、甲醛、甲醇、胼(联氨)、二硫化碳、甲苯、二甲苯、一氧化碳、一氧化氮、氯仿、吉姆萨(Giemsa)染料、十二烷基硫酸钠(SDS) 、Trizol等。5、低 毒三氯化铝、钼酸胺、间苯二胺、正丁醇、叔丁醇、乙二醇、丙烯酸、甲基丙烯酸、顺丁烯二酸酐、二甲基102、甲酰胺、已内酰胺、亚铁氰化钾、铁氰化钾、氨及氢化胺、四氯化锡、氯化锗、对氯苯氨、硝基苯、三硝基甲苯、对硝基氯苯、二苯甲烷、苯乙烯、二乙烯苯、邻苯二甲酸、四氢呋喃、吡啶、三苯基磷、烷基铝、苯酚、三硝基酚、对苯二酚、丁二烯、异戊二烯、氢氧化钾、盐酸、氯磺甲、乙醚、丙酮、乙酸(浓的)、过硫酸铵等。6、爆炸物品 迭氮化钠、硝酸铵、过氧酸、过氧化氢(双氧水)等。7、自燃物品 黄磷、硝化纤维、胶片等8.易燃物品 红磷、镁粉、谜、醇、汽油等内 容:1. 有毒、有害物品的购买1.1依据实际使用情况,由实验人员填写计划单,报实验室负责人批准。1.2 经实验室负责人批准后,送交采供部购买。1.3采购此类药品需向所103、在地省、自治区、直辖市食品药品监督管理部门或行政部门提出申请,经批准后从经营单位购买。1.4采供部门二人持“毒品购买证”或麻醉、精神药品购买证件到指定单位购买,运送途中需实行有效的防范措施,安全交至仓库管理部门。有限购买证件严禁转借他人。2. 有毒、有害物品的接收2.1 此类药品保管员应由二人担任,负责有毒、有害物品的管理工作。2.2 此类药品保管员须具备较高的素质和品质,工作认真负责,有一定的专业知识和安全知识。2.3 保管员验收二位保管员先后核对实物与购买计划单是否一致。 检查有毒、有害物品包装完好,封口严密,标签清晰,文字完整,易于辨认,无污染、无渗漏、无破损、无混杂、无启封痕迹。精密称104、定(未开口状态)重量,四人(两位保管员,两位采购员)核对确认。以上有一项验收不合格,保管员拒绝接收,报主管领导进行调查,直至符合规定。 验收合格,填写接收记录,四人签名。 瓶外贴上标签。内容包括:编号、购进日期、重量、有毒标志。3. 有毒、有害物品的贮存保管3.1此类物品须置于保险柜中贮存,分类码放整齐,有存放编码记录。建立出入库帐目,及时盘点,做到帐物相符。帐目至少保存二年备查。3.2 贮存环境及条件:严格按化学试剂管理规程中的要求进行贮存;特殊品种按其产品说明书规定的要求进行贮存。3.3 保险柜要双人、双锁保管,二人各有一把锁的钥匙。3.4保管员对化学性质不够稳定的药品每月检查一次,性质稳105、定的每季检查一次。做到帐、卡、物相符,并做好记录,发现问题及时采取措施,并报告主管负责人。3.5 不准在有毒、有害物品存放室内休息、饮食、严禁吸烟。3.6 严禁无关人员进入有毒、有害物品存放室内。4. 有毒、有害物品的发放4.1 使用者需二人领用并在收发记录上签名。4.2 实验室负责人批准签名。4.3 二位保管员(发料人)核对后签名,二人开锁,取出试剂,交给领用人。4.4 领用人复核原包装重量(在分析天平上称重),应与原包装验收重量相符,否则不准开封,并立即报告实验室主管和采供部负责人调查处理,直至符合规定。4.5 检查原包装的完整性,封口严密,封条完好,标签完整,外标识完整等无误后方可开封取106、样。4.6取样完毕后加贴封口条,注明封口人、封口日期、剩余毛重等,退回保管员处。4.7保管员填写发放记录、注明剩余量(毛重),两人签字确认。4.8未经批准领用的试剂不得发放。4.9所有的记录均保存至有毒、有害物品用完后五年方可销毁。4.10有毒、有害物品的销毁凡超过有效期或使用期的有毒、有害物品均应销毁。因某种原因致使其改变物理化学性质的有毒、有害物品应销毁。使用完毕后的有毒、有害物品内包材严禁擅自丢弃,必须交保管员统一管理,统一销毁。此类药品的销毁需登记造册,经所在地县级以上食品药品监督管理部门批准并监督销毁。5. 有毒有害废液及废旧化学试剂的收集5.1实验室的废弃化学试剂和实验产生的有毒有107、害废液、废物,严禁向下水口倾倒或随垃圾丢弃,不可将废弃的化学试剂放在楼道、阳台、庭院等公共场合,违者将受到严格追查和处罚。 5.2有毒有害废液及废弃化学试剂应按下述规定放置: 5.2.1固体,一般应保存在(原)旧试剂瓶中,并注明是废弃试剂,暂存在试剂柜中。 5.2.2液体,化学学院统一购置塑料桶(分三类并印有标志),用以分别收集含卤素有机物、一般有机物、无机物废液。废液收集桶应随时盖紧,并放于实验室较阴凉的位置。6.实验室废物、废液的处理6.1污染物的一般处理原则为:分类收集、存放,分别集中处理。尽可能采用废物回收以及固化、焚烧处理,在实际工作中选择合适的方法进行检测,尽可能减少废物量、减少污108、染。废弃物排放应符合国家有关环境排放标准。 化学类废物。一般的有毒气体可通过通风橱或通风管道,经空气稀释排出。大量的有毒气体必须通过与氧充分燃烧或吸收处理后才能排放。废液应根据其化学特性选择合适的容器和存放地点,通过密闭容器存放,不可混合贮存,容器标签必须标明废物种类、贮存时间,定期处理。一般废液可通过酸碱中和、混凝沉淀、次氯酸钠氧化处理后排放,有机溶剂废液应根据性质进行回收。生物类废物。生物类废物应根据其病源特性、物理特性选择合适的容器和地点,专人分类收集进行消毒处理,日产日清。 液体废物一般可加漂白粉进行氯化消毒处理。固体可燃性废物分类收集、处理。固体非可燃性废物分类收集,可加漂白粉进行氯化消毒处理。满足消毒条件后作最终处置。 可重复利用的玻璃器材如玻片、吸管、玻瓶等可以用消毒液浸泡2-6h然后清洗重新使用,或者废弃。 盛标本的玻璃、塑料、搪瓷容器可煮沸15min.或者用消毒液浸泡2-6h,消毒后用洗涤剂及流水刷洗、沥干;用于微生物培养的,用压力蒸汽灭菌后使用。 微生物检验接种培养过的琼脂平板应压力灭菌30min,趁热将琼脂倒弃处理。