徐州市传染病医院检验科实验室生物安全手册72页.doc
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2024-12-17
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1、检验科生物安全手册 文件编号:XCJ-f01-0130第A版依据中华人民共和国传染病防治法、病原微生物实验室生物安全管理条例、实验室生物安全通用要求(GB19489-20xx)、生物安全实验室建筑技术规范(GB 5034620xx)、卫生部人间传染的病原微生物名录(以下简称名录)及江苏省病原微生物实验室生物安全管理规定(试行)(苏卫科教20073号)等有关法律法规编制编制: 审核: 批准: 生效日期:20xx年9月1日徐州市传染病医院检验科目录生物安全手册总则生物安全组织结构生物安全委员会成立文件、任命文件徐州市传染病医院实验室生物安安全组织管理图实验室生物安全管理制度组织领导、职责与权限准入2、制度设施设备检测维护制度感染性材料的管理健康监护制度生物安全自查制度实验室资料档案管理制度生物安全管理及实验室人员的培训制度意外事件处理及报告制度实验室安全保卫制度实验室生物安全评估 菌毒种管理实验室微生物安全准则检验科消毒及废弃物处理制度实验室危险品管理规定实验室内务管理规定实验室安全管理规定检验科医院感染管理制度烈性传染病实验室人员防护制度实验室安全评估综述实验室风险评估方法基本概念风险分级岗位安全风险病原微生物评估机构和依据风险评估内容具体风险评估实验室设备和技术个体防护用具意外事故应对方案和应急程序消毒和灭菌处理高致病微生物保存和销毁感染物质的运输危害化学品,火电安全应急预案附1 急救3、附2实验室设备和技术附3实验室设施用品及使用说明附4废弃物处理流程图附5高致病微生物处理流程图附6负压BSL-2工作流程图附7紧急撤离路线图附8实验操作自查附9记录表格 总 则目的 为确保实验室全体员工熟悉生物安全法律、法规,建立生物安全意识,保证相关工作人员掌握开展工作必需的生物安全知识和技术,避免实验室感染,防止实验室事故,特制定此手册。依据 病原微生物实验室生物安全管理条例医疗废物管理条例实验室生物安全通用要求可感染人类的高致病性病原微生物菌毒种或样本运输管理规定实验室生物安全手册生物安全实验室建筑技术规范适用范围 适用于进入检验科实验室所有工作人员。修订 国家及卫生部门涉及生物安全的法4、律法规发生修订更改时,本手册应相应作出修订。 检验科生物安全管理组织结构及职责一 医院成立生物安全委员会,全面负责医院生物安全工作。责任人:医院法人二 检验科成立生物安全三级管理组织。一级生物安全管理:责任人科主任1. 由科主任全面负责科内生物安全管理文件的制定。2. 督促、检查各个专业组遵守、落实生物安全情况。3. 设立生物安全监督员一名。4. 组织全科定期、不定期的学习生物安全的相关法律、法规。二级生物安全管理:责任人专业组长1 负责本专业组生物安全工作。2 全面落实生物安全管理有关本组的相关制度。3 对本组的生物安全工作要有管理、有检查、有落实记录。4 组内监督员:由本专业组长兼任本专业5、组的生物安全监督员。5 全面传达相关会议内容,在本组内要达到知晓率100%。三级生物安全管理:责任人组员1 认真执行有关生物安全的各项法规、制度。2 服从本组长的工作安排。3 行为监督员:每一位工作人员均是行为监督员。均具有规范、遵守生物安全管理规范的责任和义务,不但要规范自己的行为,还具有随时纠正不符合规范的行为的义务。相关文件3.1国务院病原微生物实验室生物安全管理条例3.2国务院医疗废物管理条例及卫生部医疗卫生机构医疗废物管理办法3.3实验室生物安全通用要求3.4生物安全试验室建筑技术规范3.5医学实验室安全要求3.6可感染人类的稿致病性病原微生物(毒)种或样本运输管理规定3.7人间传染6、病的病原微生物名录3.8人间传染病的病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法3.9微生物和生物医学实验室生物安全通用准则3.10 WHO实验室生物安全手册第三版(20xx) 徐州市传染病医院生物安全委员会成立文件、任命文件徐州市传染病医院生物安全组织管理1. 徐州市传染病医院实验室生物安安全组织管理图院长(法定责任人)分管院长检验科主任院感科实验室生物安全委员会临检司红伟生化闫家微免疫朱春玲基因钱秀梅细菌侯远沛血库司红伟AIDS实验室负压实验室门诊检验科三级管理体制各部门工作人员2. 实验室生物安全负责人不在时,指定临时代理人 检验科 侯远沛3. 监督检查实验室技术规范和操作规程的落实情7、况 检验科 刘成永4. 专门人员承担实验室感染控制工作 检验科 侯远沛5. 徐州市传染病医院生物安全委员会名单及联系方式主任:李瑞(69978)副主任:分管院长 王海舰(60880)王为民(60700)成 员:王春颖69109张朝文68370韦青云63728刘成永梅存金66069张瑞梅69716张凤池61517实验室生物安全责任人:刘成永(63889) 院感安全责任人:张朝文(683702徐州市传染病医院检验科生物安全管理小组名单及联系方式组 员:钱秀梅()闫家微() 朱春玲() 司红伟()实验室生物安全管理制度组织领导、职责与权限1单位法人代表主要职责1.负责建立健全本单位生物安全管理体系,8、确立生物安全委员会或其责任人。2.定期召开生物安全管理会议,对实验室生物安全相关的重大事项作出决定。3.批准和发布实验室生物安全手册,生物危害评估报告等重要文件。4.单位的法人代表为生物安全的法定责任人。2单位生物安全委员会或其责任人主要职责 1.负责组织制定和实施实验室生物安全手册,生物安全规章制度,操作规范和标准操作程序。 2.对实验室所操作生物因子的生物危险程度进行评估,审查和批准实验室开展的实验项目。 3.负责对本单位实验室的生物安全防护,微生物菌(毒)种和生物样本保存和使用,实验室安全操作,实验室废气,废水,废弃物处置和消毒灭菌等规章制度实施情况进行监督,检查,并定期评估实施效果。 9、4.负责组织跟踪国际国内实验室生物安全管理最新动态。 5.审查突发事故应急预案,对本实验室事故进行评估,提出处理和改进意见。 6.组织生物安全知识培训并评估培训效果。 7.审核和批准实验室上岗人员资格。 8.负责制定新的安全政策以及仲裁安全事件纠纷。3实验室负责人主要职责 1.全面负责实验室生物安全工作。 2.决定并授权进入实验室的工作人员。 3.监督有关法规和标准操作规程的执行,纠正违规行为,监督是否有超范围实验活动。 4.任命实验室生物安全管理员,具体落实实验室生物安全管理工作。 5.负责制定和实施实验室应急处置预案,负责实验室安全事故的现场处置和调查,并将调查结果以及处理意见向设立单位生10、物安全管理责任部门或责任人报告。 6.负责对涉及感染性物质的研究计划,方案以及操作程序等,实施前的生物安全审查。 7.落实实验室设施,设备,个体防护装备,材料等符合国家有关的生物安全要求,并定期检查,维护,更新,确保不降低其设计性能。实验室人员准入制度1 目的 明确实验室人员的资格要求,避免不符合要求的人员进出实验室或承担相关工作造成生物安全事故。2、范围适用于进入检验科实验室所有工作人员。3、职责3.1检验科生物安全负责人负责实验室人员准入工作的监督和实施。3.2进入检验科实验室所有人员所有必须以本规定规范自己的工作。4、制度要求4.1 所有实验室工作人员必须在接受相关生物安全知识、法规制度11、培训并考试合格。4.2从事实验室工作人员必须进行上岗前体检,由单位生物安全领导小组组织实施。体检指标除常规项目外还应包括与准备从事工作有关的特异性抗原、抗体检测。4.3从事实验室技术人员必须具备相关专业教育经历,相应的专业技术知识及工作经验,熟练掌握自己工作范围的技术标准、方法和设备技术性能。4.4从事实验室技术人员应熟练掌握与岗位工作有关的检验方法和标准操作规程,能独立进行检验和结果处理,分析和解决检验工作中的一般技术问题,有效保证所承担环节的工作质量。4.5从事实验室技术人员应熟练掌握常规消毒原则和技术,掌握意外事件和生物安全事故的应急处置原则和上报程序。4.6实验室人员在下列情况进入实验12、室特殊工作区需经实验室负责人同意: 身体出现开放性损伤; 患发热性疾病; 呼吸道感染或其它导致抵抗力下降的情况; 正在使用免疫抑制剂或免疫耐受; 妊娠;4.7实验活动辅助人员;(废气物管理人员、洗刷人员等)应掌握责任区内生物安全基本情况,了解所从事工作的生物安全风险,接受与所承担职责有关的生物安全知识和技术,个体防护方法等内容的培训,熟悉岗位所需消毒知识和技术,了解意外事件和生物安全事故的应急处置原则和上报程序。4.8外单位来检验科参观、学习、工作人员进入实验室控制区域应有相关领导批准并遵守实验室的生物安全相关规章制度。进入实验室的一般申请由实验室负责人的批准,一个月及以上的准入需到医务处备案13、。设施/设备监测,检测和维护制度1、目的为保证实验室工作人员对各类检验仪器的安全使用,维护检验工作的正常运转,确保检验工作的顺利进行。2、范围适用于检验科内的各种检验仪器。3、职责3.1 本中心检验科人员必须以本制度规范自己的工作。3.2 检验科负责人负责检查和监督。4、制度要求4.1检验科内各种设施要符合相关规定,所使用的所有仪器应经过安全使用认证。检验科供电线路中必须安装断路器和漏电保护器。4.2科内大型仪器、设备、精密仪器由专人负责保管、登记、建档,仪器设备的使用者,需经专业技术培训4.3科内仪器设备应在检定和校准的有效期内使用,并按照检定周期的要求进行自检或强检,对使用频率高的仪器按规14、定在检定周期内进行期间核查。4.4主要仪器设备应建立使用记录,有操作规程,注意事项,相关技术参数和维护记录,并置于显见易读的位置。仪器使用者必须认真遵守操作规程,并做好仪器设备使用记录,定期维护仪器设备。4.5仪器设备所用的电源,必须满足仪器设备的供电要求。用电仪器设备必须安全接地。电源插座不得超栽使用。仪器设备在使用过程中出现断路保护时,必须在查明断电原因后,再接通电源。不准使用有用电安全隐患的设备(如漏电、电源插座破损、接地不良、绝缘不好等)。4.6仪器设备在使用过程中发生异常,随时记录在仪器随机档案上,维修必须由专业人员进行,并做维修记录。4.7仪器设备使用结束后,必须按日常保养进行检查15、清理,保持良好状态。4.8所有仪器设备应加贴唯一性标识及准用、限用、禁用标志。4.9长期用电设备(如冰箱、培养箱)应定期检查,并记录运行情况。4.10因故障或操作失误可能产生某种危害的仪器设备,必须配备相应的安全防护装置。4.11使用直接接触污染物的仪器设备前,必须确认相应的安全防护装置能正常启用。实验工作完成后,必须对接触污染物的仪器设备进行相应的清洗、消毒。4.12科内应指定专人对安全设备和实验设施/设备维护管理,保证其处于完好工作状态。仪器设备较长时间不使用时,应定期通电、除湿。有记录,保持设备清洁干燥。(例如每年应对生物安全柜进行一次常规检测,须特别关注高效过滤器。定期对离心机的离心桶16、和转子进行检查)。4.13高压灭菌器使用时,定期进行生物学指示剂检测。4.14冰箱应定期化冰、清洗,发现问题及时维修。实验区冰箱内禁止放个人物品及与实验无关的的物品。4.15所有仪器设备在维修和维护保养前运出实验室前必须进行消毒处理。感染性材料的管理制度为有效防止生物实验室感染性材料在收集、运输等过程中发生泄露或扩散,引起相关人员的感染或环境的污染,特制订管理制度如下: 1、收集标本的容器最好为塑料制品,质地坚固,正确地用盖子或塞子盖好后无泄露,在容器外部不应有残留物。 2、设有接受标本的房间或空间。 3、接受标本的工作人员应了解标本对身体健康的潜在危害,做好标准隔离。标本的内层要在生物安全柜17、内打开,并准备好消毒剂。 4、废弃的标本或培养物经高压灭菌后放入双层黄色垃圾袋内,扎紧后由专职垃圾收集人员收集后集中处置。 5、损伤性垃圾(如针头)放入锐气盒内。健康医疗监护制度1 目的 规范实验室人员的健康监护工作,预防、控制实验室感染。2、范围适用于检验科实验室所有工作人员。3、职责检验科负责人负责实验室人员健康监护工作的组织实施。4、制度要求4.1实验室人员体检制度对新从事实验室技术人员必须进行的上岗前体检,体检指标除常规项目外还应包括与准备从事工作有关的特异性抗原、抗体检测。不符合岗位健康要求不得从事相关工作。 实验室技术人员要在身体状况良好的情况下从事相关工作,发生发热、呼吸道感染、18、开放性损伤、怀孕等或因工作造成疲劳状态免疫耐受及使用免疫抑制剂等情况时,需由实验室负责人同意从事相关工作,但不宜再从事高致病性病原微生物的相关工作。 检验科负责人在批准外来学习、工作人员进入实验室前应了解其健康状况,必要是可先行安排进行临时性体检,档案保留。4.2 实验室人员免疫预防制度实验室人员应根据岗位需要进行免疫接种和预防性服药,免疫接种时,应考虑适应症、禁忌症、过敏反映等情况并记入健康监护档案。 检验科应制定年度免疫接种计划,报主管领导批准后由检验科组织实施。免疫接种情况应记入健康监护档案。 检验科实验室可根据工作开展情况对各类人员进行必要的临时性免疫接种和预防性服药,并记入健康监护档19、案。 对体检结果异常的人员应随时进行必要的免疫接种或采取其他预防手段,并记入健康监护档案。发生实验室意外事件或生物安全事故后应根据需要进行必要的应急免疫接种或预防性服药,并记入健康监护档案。4.3 发生事故后的人员管理 发生实验室意外事件或一般生物安全事故后由医务科/检验科确定相关人员救治、免疫接种和医学观察方案,发现异常,由医务科/人事科/检验科决定人员临时性或永久性调离岗位。临时调离岗位的人员在重新上岗前必须进行体检,体检结果达到岗位健康要求后由医务科/检验科批准其上岗。 发生重大生物安全事故后由医务科/检验科制定并上报相关人员救治、免疫接种和医学观察方案,同时采取有效措施尽量控制人员感染20、范围,主管领导对方案进行审批。医学观察发现异常,由医务科/人事科/检验科决定人员临时性或永久性调离岗位,临时调离岗位的人员在重新上岗前必须进行体检,体检结果达到岗位健康要求后由医务科/检验科批准其上岗。 生物安全实验室安全自查制度为确保实验室生物安全制度、措施落实到位,避免生物安全事故,特制订本制度。1、主任每年至少组织一次生物安全全面检查,检查内容包括:生物安全管理体系运行情况、生物安全管理制度是否完善、是否落实、实验室设施、设备和人员的状态、应急装备、报警体系和撤离程序功能及状态是否正常、可燃易燃性、传染性、放射性以及有毒物质的防护、控制情况、废物处置情况等。2、科室负责人负责实验室生物安21、全的全面管理,检查、督促生物安全监督员工作,每季度进行科室生物安全工作检查,检查内容包括:生物安全监督员工作记录、菌(毒)株、样本的运输、保存、使用、销毁情况、生物安全实验室的消毒和灭菌情况以及感染性废物的处理情况、生物安全设备的运行、维护情况、防护物资的储备情况。3、生物安全监督员负责实验室日常工作的生物安全监督、检查,内容包括生物安全管理制度执行情况、个人防护要求执行情况、实验室人员的生物安全操作是否规范等,及时发现、纠正违规行为,避免生物安全事故发生。4、对于检查中发现的问题及时纠正,必要时制定纠正措施或实施整改,并进行跟踪验证。5、按照资料、档案管理制度保存所有检查记录,及时归档。6、22、将自查发现的问题作为实验室生物安全培训计划解决。生物安全实验室资料档案管理制度为确保生物安全实验室各类活动记录、资料按要求归档、保存,特制订本制度。1、与生物安全相关的各类活动的记录均应按照本制度执行。2、生物安全实验室的记录、资料保存不得少于20年。3、生物安全实验室记录、资料应至少包括:生物安全手册、生物安全管理制度、人员培训考核记录、生物安全检查记录、健康监护档案、事故报告、分析处理记录、废物处置记录、实验记录、菌(毒)种和样本收集、运输、保存、领用、销毁等记录、生物危害评估记录、生物安全柜现场检测记录、消毒、灭菌效果监测记录等。4、生物安全实验室资料档案原则上不外借。5、因工作需要复制23、档案资料者需经批准。6、超过保存期限的档案资料、记录,应通过生物安全领导小组的讨论、鉴定,批准是否实施销毁,销毁应至少两人实施,做好销毁记录。生物安全实验室人员培训、考核制度为确保实验室全体员工熟悉生物安全法律、法规,建立生物安全意识,保证相关工作人员掌握开展工作必需的生物安全知识和技术,避免实验室感染,防止实验室事故,特制订本制度。1、制定年度生物安全培训、考核计划,报生物安全领导小组批准后实施。2、培训内容:生物安全相关法律、法规、办法、标准、本实验室生物安全手册、生物安全管理制度、应急预案、紧急事件的上报和处置程序、生物安全风险评估、生物安全操作规范、仪器设备的使用、保养、维护、个人防护24、用品的正确使用、菌(毒)株及样本的收集、运输、保藏、使用、销毁、实验室的消毒与灭菌、感染性废物的处置、急救等。3、每年组织全员(包括实验室管理人员、技术人员、样本运送人员、保洁员等)的生物安全培训、考核。4、针对不同的工作岗位,在全员培训的基础上,组织开展专项生物安全培训。5、培训应该由取得北京地区实验室生物安全师资培训合格证的人员进行。 6、培训后应对参加培训的人员进行考核,考核形式可采取多样化,如笔试、口试、实操等。7、对考核合格的工作人员颁发相关岗位的上岗证。8、建立并保存生物安全工作人员的培训、考核档案。9、做好生物安全培训需求和效果的评估工作,为制定年度培训、考核计划提供依据。10、25、对新上岗、转岗的员工进行生物安全相关知识、生物安全手册等的培训,明确所从事工作的生物安全风险。11、进入实验室的外单位人员(包括进修、实习等工作人员)的由所在科室,根据所从事工作的生物安全风险进行必要的生物安全培训,所有工作均在带教教师指导下进行,学习期间不得从事危险性较高的工作。12、当有关部门新颁发、修订生物安全相关法律、法规、规范、标准等,实验室生物安全手册进行修改后应组织开展相关内容的培训和考核。13、按照档案资料管理制度保存与人员培训、考核相关的记录意外事件处理及报告制度1目的:规定实验室职业暴露处理程序,规范发生职业暴露时处理原则、报告和登记流程。2范围:实验室工作人员和涉及处理职26、业暴露的有关人员。3职责:31 实验室操作人员在工作中发生职业暴露须按照本规定进行处理和报告程序;32 实验室负责人按照规定进行组织和控制职业暴露发生后的控制实施;33 实验室负责人负责组织试验人员职业暴露处理的培训和考核,并保存有关记录;34 实验室生物安全检查人员负责督察日常工作中生物安全工作的执行和医学应急样品的检查。4步骤:41 实验室发生职业暴露后按照既往进行的该种污染物的生物安全危害度评估结果,快速有效的对意外暴露人员进行紧急医学处置;对污染区域进行有效的控制,最大限度的清除和控制污染物对周围环境的污染和扩散;进行流行病学调查和暴露人员的医学观察等原则和步骤进行处理;411 根据既27、往进行的生物安全危害度的评估和暴露的程度即时进行现场紧急医学处置,消除或最大程度降低病原微生物对暴露人员的伤害;同时,有效的污染区域进行防控,最大限度的防止污染物对周围人员和环境的污染。412 一般性的小型事故可在紧急医学处置后,要立即向实验室负责人和实验室生物安全领导小组报告事故情况和处理方法,以及时发现处理中的疏漏之处,使处理尽量完善妥当。413 当重大事故发生时,在进行紧急医学处置的同时,要立即向实验室负责人和实验室生物安全领导小组报告情况;实验室负责人和实验室生物安全领导理小组要立即协调现场紧急处理和周围环境污染防控;协调医学专家评估职业暴露的危害性和对暴露人员的伤害程度;对药物可以治28、疗和预防该污染物感染的,力争在暴露后最短时间内开始预防性用药;留取暴露人员相应的标本备检,并同时进行医学观察。414评估暴露级别(见下表) 414 建立意外事故登记,详细记录事故发生的时间、地点及经过;暴露方式;损伤的具体部位、程度;接触物种类(培养液、血液或其他体液)和含有HIV的情况;处理方法及处理经过(包括赴现场实验室负责人和实验室生物安全领导小组成员以及专家);是否采用药物预防疗法,若是,则详细记录治疗用药情况、首次用药时间(暴露后几小时或几天)、药物毒副作用情况(包括肝、肾功能化验结果);定期检测的日期、检测项目和结果。415 根据评估结果建议育龄妇女发生职业暴露和职业暴露后和进行预29、防性用药期间,是否需要避免或终止妊娠。416 记录对暴露现场和周围环境防控污染的方法,实施形式,人员、范围,评估防控处理的效果;总结和评估病原微生物实验室工作程序中是否存在不当,发生暴露人员试验操作等过程是否存在失误,整改措施和实行。 42 意外事故现场处理方法:工作人员发生意外事故时,如针刺损伤、感染性标本溅及体表或口鼻眼内,或污染实验台面等均视为安全事故,应立即进行紧急医学处置 (根据事故情况采用相应的处理方法)。根据生物安全危害度和暴露程度,现场初步评估职业暴露危害程度和选择处理方式一、化学污染1. 立即用流动清水冲洗被污染部位。2. 立即到急诊室就诊,根据造成污染的化学物质的不同性质用30、药。3. 在发生事件后的48小时内向有关部门汇报(医生报告医务处,护士报告护理部),并报告感染管理科。二、 针刺伤1.被血液、体液污染的针头或其他锐器刺伤后,应立即用力捏住受伤部位,向离心方向挤出伤口的血液,不可来回挤压,同时用流动水冲洗伤口;2.用75%酒精或安尔碘消毒伤口,并用防水敷料覆盖;3.意外受伤后必须在48小时内报告有关部门(医生报告医务处,护士报告护理部),并报告感染管理科、领取并填写医疗锐器伤登记表,必须在72小时内作 HIV、HBV等的基础水平检查;4.可疑被HBV感染的锐器刺伤时,应尽快注射抗乙肝病毒高效价抗体和乙肝疫苗;5.可疑被HCV感染的锐器刺伤时,应尽快于被刺伤后做31、HCV抗体检查,并于46周后检测HCV的RNA;6.可疑被HIV感染的锐器刺伤时,应及时找相关专家就诊,根据专家意见预防性用药,并尽快检测HIV抗体,然后根据专科医生建议行周期性复查(如 6周、12周、6个月等)。在跟踪期间,特别是在最初的612周,绝大部分感染者会出现症状,因此在此期间必须注意不要献血、捐赠器官及母乳喂养,过性生活时要用避孕套。三、皮肤、粘膜、角膜被污染1.皮肤若意外接触到血液或体液或其他化学物质时,应立即用肥皂和流动水冲洗;2.若患者的血液、体液意外进入眼睛、口腔,立即用大量清水或生理盐水冲洗;3.及时到急诊室就诊,请专科医生诊治;48小时内向有关部门报告(医生报告医务处,32、护士报告护理部),并报告感染管理科领取并填写相关登记表。四、标本污染1.棉质工作服、衣物有明显污染时,可随时用有效氯500mg/l的消毒液,浸泡30-60分钟,然后冲洗干净。2.各种表面若被明显污染,用1000-2000mg/l有效氯溶液撒于污染表面,并使消毒液浸过污染表面,保持30-60分钟,再擦除,拖把或抹布用后浸于上述消毒液内1小时。3.仪器污染应考虑消毒方法对仪器的损伤,和对检测项目的影响,选用适当的方法。 5支持性文件:51 病原微生物实验室职业暴露登记表52 消毒技术规范53 职业暴露危害评估表55 实验室生物安全手册(第三版)生物安全实验室安全保卫制度为了做好生物安全实验室的管理33、,做到预防为主,防患于未然,特制定本制度。1、生物安全实验室安全保卫工作实行责任制,并制定应急预案。2生物安全实验室的实验活动应与其生物安全防护等级相适应。3、非工作人员进入实验室须经实验室工作人员批准。4、菌(毒)株、样本等感染性物质、剧毒物质等实行专人负责,并建立保存清单和领用、销毁记录。当发生上述物质的遗失、被抢等意外情况时,应启动应急预案。5、定期对生物安全实验室高压蒸汽灭菌器进行校验,确保消毒效果、计量检定符合国家压力容器管理的有关规定。6、保证生物安全实验室自动烟雾和热量探测及报警系统的正常运行,确保消防器材位于固定位置并能正常使用。7、生物安全实验室工作人员应定期对重点防火部位、34、易燃易爆化学品使用情况进行检查,及时消除隐患,并定期进行火灾紧急事件处置的培训和演练。8、实验室内禁止乱拉临时电源线。9、定期对实验室电气安全、仪器设备等进行检查,及时发现、排除安全隐患。10、生物安全实验室应配备常用工具。实验室安全保卫1、实验室的安全工作由实验室主任全面负责,另设一名安全员协助搞好安全工作。 2、非工作人员进入实验室须经实验室工作人员批准。3、菌(毒)株、样本等感染性物质、剧毒物质等实行专人负责,并建立保存记录。当发生上述物质的遗失、被抢等意外情况时,应启动应急预案。4、定期对生物安全实验室高压蒸汽灭菌器进行校验,确保消毒效果、计量检定符合国家压力容器管理的有关规定。5、生35、物安全实验室工作人员应定期对重点防火部位、易燃易爆化学品使用情况进行检查,及时消除隐患。凡是有毒,有害,易燃,易爆等物品要设立专人保管。6、发现特殊情况立即报警:火警119,盗警110菌毒种管理菌、毒种系指直接用于制造和检定生物制品的细菌、立克次体或病毒等,菌、毒种按中国医学微生物菌种保藏管理办法第二条分类。 双人双锁 严格登记制度:1. 统一进行菌(毒)种的编号。2. 详细记录菌(毒)种的学名、株名、来源、特性、用途、批号、传代冻干日期、数量。3. 在保管过程中,凡传代、冻干及分发,均应及时登记,并定期核对库存数量。4. 销毁:按规定记录。5. 外借:审批和登记。实验室微生物安全准则在临床实36、验室,工作人员在接触标本和操作过程中,可能被感染。临床实验室可能接触的微生物可分为三类:1 病毒,如:病毒性肝炎(特别是乙型及丙型肝炎)和获得性免疫缺陷综合症(AIDS);2 细菌,包括:细菌、分枝杆菌、真菌;3 其他具有高毒力的病原体,如出血热病毒和立克次体。因为从病史和体检不能可靠地鉴定所有病人的病原体,所以当接触和处理所有的体液时,均应执行“常规预防措施”。1.感染途径(1)空气传播:在取下装有标本试管的塞子时、溶液洒落在坚硬的表面上、用未加塞子的试管进行离心或溶液(包括接种环内的溶液)加热太急时,具有传染性的溶液在上述各种情况下,可能形成气烟雾散布在空气中。(2)经口传播:用口吸移液可37、能导致微生物入人体引起传染。传染也可通过间接途径,如饮食或吸烟前没有彻底洗手引起“手口”传染。(3)直接接种:偶然的针刺、碎玻璃划伤和动物咬伤均可通过直接接种引起传染。临床标本中的感染原也可通过被纸张轻微划伤的手指、很轻的擦伤或损伤的表皮进入人体造成感染。(4)粘膜接触:一些病原体,包括肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒(HIV),能够通过与粘膜(如眼结膜)的直接接触进入人体,所以在擦拭眼睛、更换隐形眼镜或使用化妆品前应彻底洗手。(5)节肢动物媒介:蚊、蜱、蚤和其它体外寄生虫都是潜在的传染源,特别是当室内喂养有动物时。2.常规预防措施(1)来自所有病人的血液和体液都被认为是具有传染性的。所有血液和体液38、的标本都应放置于具有安全盖的结构优良的容器里,以防在运输过程中发生泄漏。采集标本时应防止污染容器的外表或随标本的检验单。如果存在潜在的或实际的污染,则应再加一层包装(例如:包装袋)。(2)所有处理血液和体液(例如:取下真空试管的塞子)的工作人员都应戴上手套。如果有可能发生血液或体液的喷溅,则应使用面部防护装备。(3)对于组织学和病理学检查、微生物培养之类的常规操作,并不需要在生物安全柜内进行。但是,如果操作过程中会产生气烟雾或飞沫,则应使用生物安全柜,这些操作包括混匀、超声雾化和剧烈搅拌。(4)实验室应使用机械移液装置。绝对禁止用口吸移液。(5)使用注射器和针具时应防止受伤。禁止用手将针套重新39、套在针头上、禁止故意将针头弯曲或折断、将针头从一次性注射器上取下、或对针头进行其它操作。所有锐利物品在使用后都应放入专用锐器盒内,然后运至处理场所。废弃锐利物品的容器应就近放在便于操作的地方。应在未完全装满前或48小时之内及时更换。(6)血液或其他体液发生泄漏或工作结束后,均应使用合适的化学杀菌剂对实验室工作区进行表面消毒。可使用2%的84消毒液消毒。(7)实验中用过的污染物品在重复使用前或装入容器中按传染性废弃物进行处理前,应先进行去污处理。(8)被血液或其他体液污染的设备在实验室内或外送商家进行维修之前,应先进行清洁和消毒。无法彻底消毒的设备必须贴上生物危害的标签。(9)手或其他部位的皮肤40、在接触血液或其他体液后必须立即彻底清洗。在实验工作结束后或取下手套后应立即洗手。在离开实验室之前应脱下所有的个人防护装备。(10)如果实验人员工作时有可能接触到血液、其它可能具传染性的物质、病人的粘膜或要损伤的皮肤、或在处理污染的物品或表面时,都应戴上手套。在进行血管穿刺时,包括静脉采血、手指或脚背穿刺,也应戴上手套。如果手套破损、刺破、或失去其屏障功能,则应尽快更换。清洗或消毒会损害一次性手套的质量,故不得重复使用一次性手套,在接触病员后应更换手套。(11)工作区应使用吸收性强的纸张覆盖。在移液、混合、振荡、搅拌或离心时,必须防止发生气烟雾。(12)患有渗出性病变或湿疹的医务人员在痊愈前不得41、直接接触病人,也不得接触医疗设备。(1)生物安全柜 生物安全柜是微生物实验室里控制生物危害的最好的方式之一。实验室可根据需要选择合适的型号,并应根据产品说明书进行安装、使用和维修。 实验室应制定安全柜的维护规程,以确保安全橱内合适的气流流速,并适时更换滤器。安全柜的放置应远离气流不稳定的地方,通风口的设置应根据产品说明书。 在维护、移动和或处理安全柜之前必须对生物安全橱进行消毒检验科消毒及废弃物处理制度1.医务人员要求(1)工作人员应穿戴整洁,工作服一般每周更换2次;(2)试验室接触标本均为可疑污染物,操作前均应戴好乳胶手套,手套破损要及时更换,工作后脱手套用手消毒液消毒双手,用流动水洗净;(42、3)做血常规检查的操作者必须做到一人一消毒,消毒液为0.5%醋酸洗必泰酒精;(4)离开实验室的工作人员必须脱掉手套;不能穿工作服到院外活动。2.病人手指消毒(1)做血常规检查应选取病人无红肿,破损,伤痕的手指部位;(2)用75%酒精消毒针刺部位,干后针刺取血,做到一人一针一消毒一吸管;(3)推片不得直接接触创口皮肤取血。3.废弃物的消毒及处理(1)医用垃圾与生活垃圾严格分开,黑色垃圾袋装生活垃圾,黄色垃圾袋装医用垃圾;(2)装盛垃圾的垃圾桶应用脚踏式,或加盖儿。(3)固体医疗垃圾套双层垃圾袋,防止泄露,定时或在装满3/4时及时清理,运送到指定地点,集中焚烧,转运时应有防止锋利物刺破垃圾袋遗洒的43、防护措施。(4)液体垃圾如病人尿液、胸腹水、呕吐物 按8片/L健之素消毒片投放,有效氯浓度为2000mg/l,作用30分钟,到入医用下水道;(5)锐利物应及时投入专用锐器盒,在装满前或48小时之内及时更换。(6)一般的化学废弃物可直接排入下水道;血球分析仪废液含氰化物,应放入健之素消毒片,30分钟后到入下水道。4.重复使用检验器材处理(1) 重复使用的器材用后应浸入含有效氯2000mg/l消毒液4小时,再清洗干净;(2)浸入重络酸钾(50克溶于100毫升水)浓硫酸(1000毫升)溶液,24小时;(3)取出,蒸馏水冲洗10遍以上;(4)烘干,备用。5.各种物面及地面消毒(1)各种物表及台面每日用44、300-500mg/l含氯消毒剂擦拭;用紫外线消毒时,灯管离台面不宜超过1米,消毒有效区域为灯管周围1.5-2.0米,每次时间不少于30分钟;(2)地面用浸有500-1000mg/l有效氯消毒液或0.1-0.2过氧乙酸的拖把拖地6.空气消毒(1)实验室应开窗通风,保证持空气流通、清新;(2) 空气消毒用紫外线灯照射,每次时间均应大于30分钟,每天不少于1小时;(3)有条件的实验室可采用静电吸附式空气净化器持续消毒。7.化验单消毒(1)要保持化验单干净,避免被检验材料污染;(2)不等取的化验报告单,在每日工作结束时,用微波炉中火消毒2分钟后发出;(3)门急诊未被污染的化验单,可随时发出。凡有可能45、被污染的化验单,均须经消毒后方可发出。8.消毒液配制及监测(1)正在使用的消毒液应有标识(2)四环牌清洗消毒剂含有效氯5%,配比:1:19有效氯2000mg/l;1:99有效氯500mg/l; 1:199有效氯250mg/l;(3)健之素消毒片含有效氯250mg/片(4)消毒液浓度监测用G-1型试纸9.紫外线强度监测(1)开启紫外线灯管5分钟后,将指示卡置于紫外线灯下垂直距离1米处,有图案的一面朝上,照射1分钟,图案中光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色,将其与标准色块比较,读出照射强度,使用中紫外线灯辐照强度70W/cm2为合格;每季度检测一次;(2)做好紫外线消毒记录,每季度检测一次紫外线46、强度,检测结果贴于记录本上,灯照强度70W/cm2应及时更换灯管。废弃物处理的相关要求废弃物处理1实验室内有废弃物处理程序并符合国家和地方的相关要求有废弃物处理程序文件2生物废弃物在从实验室取走之前,应使其达到生物学安全要求:微生物检验应高压灭菌、血液等检验样品提倡高压、废液应无害化排放3未高压的生物废弃物应置于专用的硬盒外包装容器内并有记录有专用容器交接有记录 4利器(包括针头、小刀、金属和玻璃等)应直接弃置于锐器盒中有锐器盒 5地面上没有丢弃的感染性废弃物(如污染棉球、棉签、输液贴等)6不允许积存垃圾和实验室废弃物7正确配制、使用和监测消毒剂正确配制、使用 监测消毒剂效果 实验室危险品管理47、规定易燃易爆及有毒物品等危险品必须储存在专用仓库或储存室内,设专人保管;容器或外包装上有明显标识。易燃易爆及有毒物品等危险品专用仓库,应符合有关安全防火规定,并根据物品种类、性质,设置相应的通风、防爆、防火、防晒、灭火等安全措施。易燃易爆及有毒物品等危险品入库前必须进行检查登记,入库后必须定期检查。储存易燃易爆及有毒物品等危险品的仓库,严禁吸烟及使用明火,应配有灭火设施。使用危险物品者必须严格遵守各项安全制度和操作规程,有安全防护措施和用具。剧毒试剂称量及使用,应有两人以上在场,严格做好出入库登记工作。菌种、毒株由微生物室专人保管和使用。仪器设备要远离易燃易爆及腐蚀性物品。使用尖锐器具必须遵守48、作业指导书规程,注意安全。实验室内务管理规定1. 本实验室上岗人员上岗前必需学习内务管理规定。2. 禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负人批准后方可进入。3. 在实验室内工作必需穿工作服。人员到非实验室区域时,工作服必需留在实验室,放在指定区域。4. 可能接触潜在传染源、被污染的实验台表面或设备时,需戴手套。戴手套不能接触“洁净”设施表面(如键盘、电话等),也不宜到实验室外。脱掉手套和离开实验室前要洗手。5. 实验室内的仪器设备、家具等布局合理,便于操作;材料、资料等物品摆放整齐,利于使用。保证走廊和过道通畅。6. 保持实验室清洁卫生。7. 禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐49、形眼镜、化妆及储存食物。8. 与本实验室无关的物品不得进入实验室。9. 工作期间不得闲聊、看报、阅读无关书籍及从事与工作无关的活动;不得无故离岗。10. 每天下班前对水、电、燃气阀门、门窗等进行安全检查,确认无隐患后方可离去。实验室安全管理规定禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入。禁止非工作人员使用实验室仪器、设备及其它物品;未经允许,非工作人员禁止翻阅实验室任何资料。实验室各类测试数据、病人资料、记录和文件等均按保密规定进行保管和使用,任何人不得擅自对外提供。如发现泄密事故,应立即采取补救办法,并对泄密人员进行严肃处理。实验室的电、水、气设施必须按规定50、安装,禁止超负荷用电,不得乱拉、乱接临时线路。有接地要求的仪器必须按规定接地。各类在用仪器设备和防护装置必须保持完好状态,不准随意改动安全装置。精密贵重仪器和大型设备专人操作和管理,未经批准不得擅自操作和拆卸。稀缺贵重材料和剧毒、易燃、易爆放射性等危险物品必须分类分柜存放,专人管理。注意防水、防高温、防电火花、防晒,通风良好。每天下班前,工作人员应关好水电、空调、电脑、仪器、火种、门窗等确认无隐患后方可离去。节假日前各室负责人应统一检查,落实值班人员和责任,消除不安全隐患。电炉、煤气炉使用时,工作人员不得离开现场。实验室内配有灭火器材,消防器材要放置在明显、便于取拿的位置。工作人员都要熟悉消防51、器材的使用方法。消防器材要妥善保管,不得随意挪动。贵重物品妥善保管,做好安全防盗措施。作好消毒隔离工作,注意自身防护,防止传染病发生。实验室要把安全知识、安全制度、操作规程等列为实验教学的内容之一,对新进实验室的人员(包括外协人员)必须先经过安全教育,在掌握了安全操作技能和具有自我保护能力后,才能动手操作。实习和进修人员必须在带教人员的指导下按操作规程进行实验,危险性的实验必须有安全防护措施,需要有人监护。实验室发生事故时,工作人员应积极采取应急措施,及时报告实验室负责人和科主任。造成轻伤以上的事故或被盗、水灾、火灾、爆炸、中毒等严重的安全事故要立即抢救,保护事故现场,并立即逐级报告科主任、保52、卫等有关部门和医院主管领导,不得隐瞒不报或拖延上报。对于一贯遵纪守法,保证设备安全运行及文明操作实验中有显著成绩者;发现重大事故隐患,积极采取措施补救,排除险情,转危为安者;发生事故时,不顾个人安危,奋力抢救生命和国家财产等情况者,给予表彰和奖励。检验科医院感染管理制度一、 工作人员须穿工作服,戴工作帽,必要时穿隔离衣、胶鞋、戴口罩、手套。二、 使用合格的一次性检验用品,用后进行无害化处理。三、 严格执行无菌技术操作规程,静脉采血必须一人一针一管一巾一带;微量采血应作到一人一针一管一片;对每位病人操作前洗手或手消毒。四、 无菌物品及其容器应在有效期内使用,开启后使用时间不得超过24小时。使用后53、的废弃物品,应及时进行无害化处理,不得随意丢弃。五、 各种器具应及时消毒、清洗;各种废弃标本应分类处理(焚烧、消毒剂浸泡或灭菌)。六、 检验报告单消毒后发放(电脑打印的除外)。七、 检验人员结束操作后应及时洗手,毛巾专用,每天消毒。八、 保持室内清洁卫生。每天空气、各种物体表面及地面常规消毒,有记录。在进行各种检验时应避免污染;在进行特殊传染病检验后,应及时进行消毒,遇有场地、工作服或体表污染时,应立即处理,防止扩散,并视污染情况向上级报告。九、 各种卫生学监测达到要求。菌种、毒种按传染病防治法进行管理。烈性传染病实验室人员防护制度A. 工作人员进入诊室操作要进行三级防护,N95口罩,着装整齐54、,严格双层橡胶手套,戴防护镜。非隔离区实行二级防护。B. 检验人员不直接进入病区采样,必须是按隔离区个人防护要求执行。C. 工作后用肥皂和流水洗手,后用0.5%碘伏察拭,离开实验室时应脱去装备,进入休息室时 应脱去工作衣。D.禁止任何食品饮料进入实验室实验室生物安全评估为保证实验室工作人员在工作中不被危害性生物及物品所侵害,保证危害性物品不外泄,对实验室工作环境进行评估,以鉴定生物安全防护等级,保证生物安全。根据实验室生物安全通用要求,因我检验科只进行空气菌落数检测,评估仅有一般危险性,能引起实验室感染的机会比较少,一般微生物实验室采用一般技术就能控制感染,或者存在对其有效免疫方法的菌种。评估55、我检验科为生物安全防护水平为二级实验室生物安全要求工作人员和实验室安全的一般要求1 .吸烟(1)实验室工作区内绝对禁止吸烟;(2)点燃的香烟是易燃液体的潜在火种;(3)香烟、雪茄或烟斗都是传染细菌和接触毒物的途径。2 .食物、饮料及其它(1)实验工作区内不得有食物、饮料及存在“手口”接触可能的其它物质(2)实验室工作区内的冰箱禁止存放食物。专用存放食物的冰箱应放置在允许进食、喝水的休息区内。3 .化妆品实验工作区内禁止使用化妆品进行化妆,但允许并建议经常洗手的实验人员使用护手霜。4 .眼睛和面部的防护(1)处理腐蚀性或毒性物质时,须使用安全镜、面罩或其它保护眼睛和面部的防护用品。(2)工作人员56、在实验室的危险区内不要佩戴隐形眼镜,除非同时使用护目镜或面罩。(3)使用、处理能够通过粘膜和皮肤感染的试剂,或有可能发生试剂溅溢的情况时,必须佩带护目镜、面罩或面具式呼吸器。5 .服装和个人防护装备(1)应穿着符合实验室工作需要的服装,工作服应干净、整洁。当工作中有危险物喷溅到身上的可能时,应使用一次性塑料围裙或防渗外罩。有时还需要佩戴其它防护装备如:手套、护目镜、披肩或面罩等。(2)采血员和其他需要接触病员的工作人员,在接触病员时需穿实验服或工作服。(3)个人防护服装应定期更换以保持清洁,遇被危险物品严重污染,则应立即更换。(4)不得在实验室内设值班床,严禁在实验室内住宿。6 .鞋在工作区内57、,应穿舒适、防滑、并能保护整个脚面的鞋。在有可能发生液体溅溢的工作岗位,可加套一次性防渗漏鞋套。帆布鞋可吸收化学物品和有传染性的液体,所以最好穿皮革或其它防渗漏的合成材料的鞋。7 .头发和饰物留长发的工作人员应将头发盘在脑后,以防止头发接触到被污染物和避免人体脱屑落入工作区。头发不得垂肩,应与离心机、切片机等正在运转的器械保持一定距离8 .胡须蓄有胡须的男性工作人员必须遵守上项(7)的规定。9 .洗手实验室工作人员在脱下手套后、离开实验室前、接触患者前后、以及在进食或吸烟前都应该洗手。接触血液、体液或其它污染物时,应立即洗手。10 .用口移液所有实验室操作禁止用口液移,应使用助吸器具。11 .58、锐利物品谨慎处理针头、解剖刀、和碎玻璃等锐利物品。使用后的针具不要折断、弯曲、破损、重复使用或用手重装在针管上。一次性注射器上的针头用后不要取下。锐利物品应立即放置在专用锐器盒内,在完全装满之前或48小时之内更换。12 .隔离措施接触患者时,实验室工作人员应遵守医院的隔离措施。13 .工作环境(1) “清洁”区和“非清洁”区 根据实验室的具体工作情况由主任选择并确定 “清洁”和“非清洁”工作区,在清洁区和非清洁区之间设“缓冲室”。被指定为“清洁”的区域,则应努力保持清洁,如采取预防措施,防止电话、视频显示器终端、键盘、门柄及其它经常被手或手上的手套触摸的物品的污染,要求工作人员在触摸设备(如计59、算机键盘及电话的保护罩等)前取下手套,制定仪器设备和工作面的常规消毒和清洁制度和对严重污染的紧急处理措施办法。 被指定为“非清洁”的区域,允许戴手套接触所有物品(如电话、门柄、计算机终端和其它物品),所有这些物品的表面都认为是不清洁的。未戴手套的人员如果使用该区域内的电话、计算机终端或其它设备,应该戴上手套,或在使用后立即彻底洗手。 “清洁”和“非清洁”区都应保持整洁。实验台至少应每天清洁、消毒一次,如有必要可以多次清洗、消毒。在处理溅溢的样品或严重污染的工作面时,应戴上手套和其它个人防护装备、使用相应合适的清洁剂清除所有的溅溢物。(2冰箱、冷冻柜、水浴和离心机应该定期清洗和消毒(时间由实验室60、主任来决定),在发生严重污染后应立即进行清洗和消毒。进行清洗、消毒时要戴上手套,穿上工作服或其它合适的防护服。(3)外衣:外衣(实验服、工作服、和围裙)应悬挂在远离散热器、蒸汽管道、供暖装置、以及有明火的地方,不要挂在压缩气瓶或灭火器上,也不要挂在门的玻璃隔板上,妨碍视线。“清洁”的和“非清洁”的个人防护服要分开存放。(4)垃圾处理:每天至少清理垃圾一次。(5)装饰:不得在电灯、灯座或仪器上进行装饰,更不要使用电子装饰物、蜡烛、圣诞树等有引起火灾危险的装饰品。(6)为便于清洁消毒,实验室内不应有织物装饰的用具或椅子。(7)个人物品:实验工作区不得存放个人物品,如钱包、外套、皮靴、咖啡杯、运动服61、预包装的食品和药品等。(8)实验室内应配备应急设备,如应急洗眼装置,酒精等消毒用品。(9)实验室应安装非手触式洗手装置。(10)实验室内应安装防蚊蝇装置,应定期投撒灭蟑螂、老鼠的药物。(11)用后的废弃物品:实验工作区内的用后废弃物品存量不要太大。具危险性的液体如酸或碱性液体应放在视平线以下。较大的废弃物容器应靠近地面存放。(12)出口通路:实验室的出口和通道必须保持畅通无阻,不准堆放物品、垃圾、装置、或设备。安全门必须保持畅通,不得堵塞。注意:无论任何时间、何种原因都不得阻塞通往灭火器、火警箱、防火毯、安全淋浴或出口的道路。14 .玻璃器具操作玻璃器具时应遵循下述安全规则:(1)不使用破裂62、或有缺口的玻璃器具。(2)不要用猛力取下玻璃试管上的塞子,粘紧的试管可用刀切开分离。(3)接触过传染性物的玻璃器具,清洗之前,应先行消毒。(4)破裂的玻璃器具和玻璃碎片应丢弃在有专门标记的、单独的、不易刺破的容器里。(5)高热操作玻璃器具时应戴隔热手套。(6)在不影响实验质量的前提下,应尽量减少使用玻璃器具15 .离心机(1)气溶胶:离心过程中应控制气溶胶的产生在最低水平。(2)操作:离心机只有在盖好盖板后,才能启动。(3)传染性物品:所有能够产生气溶胶进行播散的生物制品或标本,都应使用密封的离心管,并在盖紧的离心头或转头中进行。(4)为防止气溶胶飞溢,应在离心停止30分钟后打开离心物。(5)63、清洗:按照消毒隔离制度要求清洗离心机。(6)平衡:离心时应保持合适的平衡,以保证离心的顺利进行。检验科防火安全制度1.防火(1)隐患的估计和研究在开始临床实验工作之前就应对火灾的隐患进行研究,在实验工作运行的过程中,要经常研究火警的隐患。研究的内容包括: 使用化学物品的数量和性质,可能发生的化学反应,以及电器设备的隐患等。 哪些操作方法已经改变了,新使用了哪些化学物品,以及在上届消防培训之后增加了哪些新的工作人员。 无人值班看守的自动化实验操作。(2)火源隐患 常见的火源是明火、加热器件和电火花(电灯开关、电动机、摩擦和静电)。 存放易燃气体的场所,应安装防爆灯具和开关,使用专门防爆设计的电器64、设备。 应对电气设备的接地、漏电和墙上插座的接地、极性进行年度检查。 易燃性液体的供给量应控制在有效并安全进行实验的最小量。待处理的用过的可燃性液体也应计算在内。 安全使用酒精灯,不能在燃烧状态下添加酒精,酒精量不能超过总容量的2/3。 禁止用冰箱储存易燃液体。如果确实需要,应存放在专门的防爆冰箱内。冰箱应远离火源。 从储藏罐里倒出易燃液体,应在专门的储藏室或通风橱内进行。运送易燃液体时,其金属容器应有接地装置。 加热易燃易爆液体(燃点低于94)必需在通风橱进行,不能用明火加热。装易燃易爆物的容器应经当地有关消防部门审核批准。 严禁用明火直接加热有机溶剂,在大量使用有机溶剂时,室内禁止使用明火65、。存放乙醚的温度不得超过25,禁止在冰箱中放乙醚。 工作结束随手关闭水源、电源。离开实验室时要检查水、电、门窗,确认安全后方可离开。 严禁私用电炉。走廊、楼梯禁止堆放易燃、易爆物品,试验室内禁止吸烟。使用蚊香时要远离衣服、被褥或其他易燃品。2.灭火实验室应配备足够扑灭各种火情并协助全体人员从失火现场及其附近撤离的相应消防设备。(1)灭火器根据上级消防部门的规定配备、摆放灭火器,并根据要求对灭火器进行定期检查维修。*A类灭火器适用于固体可燃物(如纸、木材、塑料)引起的火灾。A类灭火器多数为消防水栓。*B类灭火器适用于汽油和溶剂引起的火灾。B类灭火器多数为二氧化碳或化学干粉,如碳酸氢钠。*C类灭火66、器适用于电气引起的火灾。所有工作人员都应知道电开关的位置以及切断失火电器电源的方法。(2)动灭火系统应建立年度安全检查,及随时检修、维护的制度。(3)如火灾波及供气管道系统应立即关闭远端阀门以切断燃气来源。如果无法做到这点或燃气是来自储气瓶时,则应立即从房间内撤离。(4)遇衣服着火时可选用防火毯,但防火毯并非必备的灭火工具。使用人员应受过训练,懂得站立时不能使用防火毯,在衣服着火后使用防火毯时立即采取“停、倒、滚”动作。从严重火情区撤离时,防火毯可用作个人防护装备。备有防火毯的实验室,防火毯应放在远离出口通道的地方。3.消防训练(1)应对实验室工作人员进行防火安全训练。(2)所有工作人员必须学67、会如何发布火警警报,学会遇有失火时应做到: 拨打报警电话“119”。 发出火警警报以求得帮助,并开始从失火区或建筑物撤离。 如果可能,立即使用便携式灭火器进行灭火。 如果不能扑灭火情,应把所有通向火场的门关紧,并用湿毛巾或床单堵住下面的门缝,以阻止火情的蔓延。 应将房间里的所有人员撤出。(如果火情并非十分危险,可安排留下一人,向前来灭火的消防队员介绍具体情况。)(3)由受过训练的人员讲解使用便携式灭火器进行灭火的技能。训练应为“手把手”的方式,还应包括不同火情采用不同灭火器的知识。(4)对工作人员撤离火场的训练应经常举行,每年进行几次。所有人员每年至少参加一次训练(包括夜班和周末加班的人员)。68、练习应包括帮助病人和其他人员的撤离。隔离区,如暗室和其它不能听见警报声的实验室应包括在撤离路线内。撤离时,应关闭所有门窗。实验室用电安全制度1.仪器用电作为仪器维护措施的一部分,应进行年度的安全用电检查并建立档案记录。每年至少对所有电插座的接地和极性、电缆的完整性进行检查一次,并将结果记录在案。可移动的设备应接地或采用更先进的方法防止触电,但全部塑封无法接地的仪器例外。新设备在使用前也应进行同样的检查。实验室应装有足够的插座,分布要合理,以减少在插座上接上其它多用插座和避免拖拉过多的电线。在空气中存在达到一定数量的易燃气体或蒸汽有可能形成可爆性混合物的危险环境下,应使用指定专门为此设计的防爆电69、器设备。2.维修与维护所有电器设备的维修与维护只能由取得正式资格的维修人员进行。(1)仪器的维修:除校准仪器外,仪器不得接电维修。维修时要确保手干燥,取下所有的饰物(如手表和戒指),然后谨慎操作。(2)线路检修:实验室技术人员不得维修建筑物的电力系统。任何涉及开关、插座、配电箱、保险丝、断路器的维修工作应由该建筑物的维修人员或其他有资格的人员进行。(3)高压设备:为保证高压设备(如高压电泳仪等)的安全,要制定具体的详细操作规程。(4)接地:电器设备必须接地或用双层绝缘。电线、电源插座、插头必须完整无损。在潮湿环境的电器设备,要安装接地故障断流器。化学危险物品使用准则临床化学实验室存有许多腐蚀性70、毒性、易燃和不稳定试剂,属化学危险物品。所有化学危险物品的容器都应有清晰标记。目前,广泛应用配制好的试剂和试剂盒,致使有些化学危险物品不易被识别,对这些试剂和试剂盒的成份应予复审并给予适当标记。实验室管理人员有责任向工作人员介绍化学危险物品。实验室技术人员有责任熟悉并向同事介绍化学危险物品和遵照安全操作。1.化学危险物品分类(1)腐蚀品:腐蚀品是接触人体后给人造成可见损伤或不可逆改变的物质。腐蚀性化学废弃物是指pH小于2.1或pH大于12.5或对钢(SAE1020)的腐蚀力超过0.635cm年(55)的物质。例如:盐酸。(2)毒害品:毒害品是吸入、食入或少量接触即可引起严重生物效应的物质。(71、3)致癌物:由于检测化学物品能否诱发恶性肿瘤的测试系统很不相同,定义致癌物比较困难。例如:苯。(4)可燃烧物:可燃烧物指任何可燃烧的化学物品,包括可燃物和易燃物。 易燃液体(燃点低于38)可分为以下几个级别:1A级:燃点低于22;沸点低于181B级:燃点低于22;沸点高于181C级:燃点高于21低于38 可燃液体(燃点高于38低于60)可分为以下几个级别:A级:燃点高于60低于94B级:燃点高于94(5)易爆化学物品:易爆化学物品是指能迅速发生剧烈化学变化的不稳定物质。爆炸性分解可在正常温度和压力下发生。例如:肼。2.材料安全数据表及标签购进可能有危害的化学物品都必须附有材料安全数据表。所有危72、险化学品都需要以易于识别的形式进行标记,使专业和非专业人员很容易警觉其潜在的危险性。标记可以是文字、图标、标准化代码或多种形式并存。3.化学危险物的管理与使用(1)腐蚀品应在近离地面处储存以减小掉下的危险。(2)搬运体积超过500ml的浓酸试剂时,必须用运载托车。(3)严禁氧化剂与易燃剂存放在一起。腐蚀性化学品要单独存放。例如:乙酸或乙酸酐等有机酸应与硫酸、硝酸或高氯酸等强氧化剂分开储存。(4)个人防护装备:在使用腐蚀性物品场所的工作人员,应该穿戴围裙、手套和其它个人防护装备。(5)急救设备:使用腐蚀性物品的场所,应设有合适的急救沐浴设施和洗眼装置。(6)化学通风橱:所有挥发性腐蚀物品的操作,73、都必须在化学通风橱中进行。(7)易燃易爆液体应在合格的容器里储存。分装时应有明确的易燃和可燃性标记,工作储备量控制在最低限度。(8)易燃或可燃性液体的储量超过1000升,至少应有1间专用储藏室。(9)储存可燃性液体的仓库应远离明火和其它热源。(10)可燃性液体如需要在冰箱内存放,该冰箱的设计必须符合避免产生蒸汽燃烧的要求。实验室所有的冰箱门都应标明可否用于存放易燃、可燃性液体。4.污染物的清除和处理(1)每个实验室都应负责日常的清污工作。在结束常规工作时、工作交班、发生紧急事件如清除溅溢物后,都需要进行清污工作。需外送维修的设备,只有在实验室管理人员确认没有化学危险物品污染时,才能外送维修。(74、2)废弃化学物品:所有废弃化学物品都应按危险物品处理,除非能够确定它们的性质。清洁溅溢有害物质的所用材料,包括吸附物和中和物,都被认为是有害废弃物。(3)专职人员:实验室应指定专人协调和负责处理实验室有害化学废弃物,并将其放置在指定的废弃物堆放场所。(4)容器:化学废弃物应放置在密闭、有盖的容器中。(5)标签:化学废弃物的包装应有标签,标签应包含以下内容:* 日期* 来源* 实验室来源* 成份* 物理性质(气体、液体等)* 体积* 危险性(易燃或易爆) 传染病医院实验室风险评估方法1基本概念风险是某一时间发生的可能性及其事故后果的总和,是随时存在的。风险评估是指通过识别和分析风险发生的概率和可75、能的后果,确定风险级别、风险控制内容,以及如何控制的过程,是风险管理的重要环节和依据。2风险分级2.1风险等级I (低个体风险,低群体风险)不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。2.2风险等级 (中等个体风险,有限群体风险)能引起人或动物发病,但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病,具备有效治疗和预防措施,并且传播风险有限。2.3风险等级III (高个体风险,低群体风险)能引起人类或动物严重疾病,或造成严重经济损失,但通常不能因偶然接触而在个体间传播,或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗的病原体。2.4风险等级 (高个76、体风险,高群体风险)能引起人类或动物非常严重的疾病,一般不能治愈,容易直接或间接或因偶然接触在人与人,或动物与人,或人与动物,或动物与动物间传播的病原体。3实验室岗位安全风险3.1标本接收岗位主要是运送标本泄露、泼洒及容器外表面污染造成的工作人员接触污染,一般情况下工作人员须穿工作服、戴手套上岗,在疑为高致病性病原体感染时,要特别注意呼吸道传播,尤其是泄露或泼洒后的气溶胶污染造成的播撒。3.2标本离心岗位离心时可能喷射出气溶胶粒子,特别是在离心结束前的制动过程中以及在打开试管盖帽等时均可产生大量具有潜在感染性的气溶胶颗粒,玻璃离心管可因为破碎造成标本泄漏;离心管内标本盛装过满可造成泄漏。3.377、细菌学标本接种、鉴定岗位泄漏和泼洒污染:容器破裂可造成标本泄漏;容器倾倒可造成标本泼洒;临床采集标本时可发生容器外表面污染;接种时可造成标本滴落污染台面等;在手工开盖时可发生标本污染手指或环境;制备涂片时可污染手指或环境。气溶胶污染:取菌环接种可产生气溶胶粒子污染,制备涂片和悬液可产生气溶胶粒子污染;标本处理过程中的离心、重悬浮等可产生气溶胶粒子污染。3.4仪器维修、维护岗位表面的污染:仪器外表面可附着有各种生物因子;临床标本对流经的管道可造成污染;标本对实验台面造成的污染。气溶胶污染:实验过程中产生的气溶胶可在环境中长时间存在,其传染性既与粒子的物理性质有关,又与粒子中所携带的致病微生物的特78、性有关;打开标本流经的管道时可产生传染性气溶胶粒子污染。3.5清洁、消毒岗位气溶胶污染:任何布物等的抖动可产生气溶胶粒子;任何带盖的容器在开启盖子时可产生气溶胶;任何污染材料的直接运送过程中可产生气溶胶。直接接触污染:任何实验室污染的废弃物在收集、归类等时均可经直接接触造成操作人员的接触污染。泄漏和泼洒污染:容器破裂可造成生物材料的泄漏;容器倾倒可造成生物材料的泼洒。刺伤接种:破碎的玻璃以及针头等尖锐物品可能造成工作人员的刺伤,当其污染有生物因子时可能造成相应的直接接种。4实验室可能碰到的病原微生物病毒:艾滋病毒(I型和II型)、肠道病毒、乙型肝炎病毒、甲型肝炎病毒等。细菌:结核分枝杆菌、鲍氏79、不动杆菌、金黄色葡萄球菌、致病性大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、炭疽杆菌等。真菌:白假丝酵母菌、新生隐球菌等。5风险评估机构和依据5.1评估机构:实验室安全管理小组5.2评估依据:依据实验室安全风险评估和风险控制程序(ClinLab-PF-030)对常规和特殊条件下实验室所开展检验活动进行风险评估、制定预防措施并对采取预防措施后的残余风险进行评估。生物因子危害度评估依据卫生部颁发人间传染的病原微生物名录。6风险评估内容6.1生物、化学、物理、电气、水灾、火灾、自然灾害等6.2生物因子已知或未知的特性,如生物因子的种类、来源、传染性、传播途径、易感性、潜伏期、剂量-效应(反应)关系、致病性(包括急性与80、远期效应)、变异性、在环境中的稳定性、与其他生物和环境的交互作用、相关实验数据、流行病学资料、预防和治疗方案等;6.3实验室常规活动和非常规活动过程中的风险(不限于生物因素),包括所有进入工作场所的人员和可能涉及的人员(如合同方人员)的活动;6.4设施、设备等相关的风险;6.5人员相关的风险,如身体状况、能力、可能影响工作的压力等;6.6意外事件、事故带来的风险;6.7危险发生的概率评估;6.可能产生的危害及后果分析;6.9确定可接受的风险;7具体评估内容7.1生物因子危害度评估:细菌、真菌、病毒7.2工作内容危害度评估列出实验活动内容,按日常岗位分类7.4分析每个岗位的哪些工作可能造成不良后81、果,预测风险等级,提出预防措施,评估预防措施实施后的残余风险。实验室设备和技术实验室伤害以及与工作有关的感染主要是由于人为失误。不良实验技术以及仪器使用不当造成的。本章概要介绍了避免或尽量减少这类常见问题的技术和方法。1冰箱与冰柜的维护和使用 1.冰箱、低温冰箱和干冰柜应当定期除霜和清洁,应清理出所有在储存过程中破碎的安瓶和试管等物品。清理时应戴厚橡胶手套并进行面部防护,清理后要对内表面进行消毒。 2.储存在冰箱内的所有容器应当清楚地标明内装物品的科学名称、储存日期和储存者的姓名。未标明的或废旧物品应当高压灭菌并丢弃。3.应当保存一份冻存物品的清单。4.除非有防爆措施,否则冰箱内不能放置易燃溶82、液。冰箱门上应注明这一点2离心机的使用1.在使用实验室离心机时,仪器良好的机械性能是保障微生物安全的前提条件。2.应按照操作手册来操作离心机。3.离心机放置的高度应当使小个子工作人员也能够看到离心机内部,以正确放置+字轴和离心桶。4.离心管和盛放离心标本的容器应当由厚壁玻璃制成,或最好为塑料制品,并且在使用前应检查是否破损。5.用于离心的试管和标本容器应当始终牢固盖紧(最好使用螺旋盖)。6.离心桶的装载、平衡、密封和打开必须在生物安全柜内进行。7.离心桶和+字轴应按重量配对,并在装载离心管后正确平衡。8.操作指南中应给出液面距离心管管口需要留出的空间大小。9.空离心桶应当用蒸馏水或乙醇(异丙醇83、,70%)来平衡。盐溶液或次氯酸盐溶液对金属具有腐蚀作用,因此不能使用。10.对于危险度3级和4级的微生物,必须使用可封口的离心桶(安全杯)。11.当使用固定角离心转子时,必须小心不能将离心管装得过满,否则会导致漏液。12.应当每天检查离心机内转子部位的腔壁是否被污染或弄脏。如污染明显,应重新评估离心操作规范。13.应当每天检查离心转子和离心桶是否有腐蚀或细微裂痕。14.每次使用后,要清除离心桶、转子和离心机腔的污染。15.使用后应当将离心桶倒置存放使平衡液流干。16.当使用离心机时,可能喷射出可在空气中传播的感染性颗粒。如果将离心机放置在传统的前开式的I级或II级生物安全柜内,这些粒子由于运84、动过快而不能被安全柜内的气流截留。而在III级生物安全柜内封闭离心时,可以防止生成的气溶胶广泛扩散。但是,良好的离心操作技术和牢固加盖的离心管可以提供足够的保护,以防止感染性气溶胶和可扩散粒子的产生。3生物安全柜I I级生物安全柜在应用细胞和组织培养物来进行病毒繁殖或其他培养时,未经灭菌的房间空气通过工作台面是不符合要求的。I I级生物安全柜在设计上不但能提供个体防护,而且能保护工作台面的物品不受房间空气的污染。I I级生物安全柜有四种不同的类型(分别为A1, A2, B1和B2型),它们不同于I级生物安全柜之处为,只让经HEPA过滤的(无菌的)空气流过工作台面。I I级生物安全柜可用于操作危85、险度2级和3级的感染性物质。在使用正压防护服的条件下,I I级生物安全柜也可用于操作危险度4级的感染性物质。生物安全柜的使用 1.应参考国家标准和相关文献,对所有可能的使用者都介绍生物安全柜的使用方法和局限性。应当发给工作人员书面的规章、安全手册或操作手册。特别需要明确的是,当出现溢出破损或不良操作时,安全柜就不再能保护操作者。2.生物安全柜运行正常时才能使用。3.生物安全柜在使用中不能打开玻璃观察挡板。4.安全柜内应尽量少放置器材或标本,不能影响后部压力排风系统的气流循环。5.安全柜内不能使用本生灯,否则燃烧产生的热量会干扰气流并可能损坏过滤器。允许使用微型电加热器,但最好使用一次性无菌接种86、环。6.所有工作必须在工作台面的中后部进行,并能够通过玻璃观察挡板看到。7.尽量减少操作者身后的人员活动。8.操作者不应反复移出和伸进手臂以免干扰气流。9.不要使实验记录本、移液管以及其他物品阻挡空气格栅,因为这将干扰气体流动,引起物品的潜在污染和操作者的暴露。10.工作完成后以及每天下班前,应使用适当的消毒剂对生物安全柜的表面进行擦拭。11.在安全柜内的工作开始前和结束后,安全柜的风机应至少运行5 minx12.在生物安全柜内操作时,不能进行文字工作。4一次性接种环一次性接种环的优点是无需灭菌,因此可以在生物安全柜中使用。否则,使用本生灯和微型加热器会扰乱气流。一次性接种环使用后应置于消毒剂87、中,并按污染性废弃物处理。5锐器皮下注射针头用过后不应再重复使用,包括不能从注射器上取下、回套针头护套、截断等,应将其完整地置于盛放锐器的一次性容器中。单独使用或带针头使用的一次性注射器应放在盛放锐器的一次性容器内焚烧,如需要可先高压灭菌。盛放锐器的一次性容器必须是不易刺破的,而且不能将容器装得过满。当达到容量的四分之三时,应将其放入“感染性废弃物”的容器中进行焚烧,如果实验室规程需要,可以先进行高压灭菌处理。盛放锐器的一次性容器绝对不能丢弃于垃圾场。6移液管和移液辅助器1.应使用移液辅助器,严禁用口吸取。2.所有移液管应带有棉塞以减少移液器具的污染。3.不能向含有感染性物质的溶液中吹入气体。88、4.感染性物质不能使用移液管反复吹吸混合。5.不能将液体从移液管内用力吹出。6.刻度对应(mark-to-mark)移液管不需要排出最后一滴液体,因此最好使用这种移液管。7.污染的移液管应该完全浸泡在盛有适当消毒液的防碎容器中。移液管应当在消毒剂中浸泡适当时间后再进行处理。8.盛放废弃移液管的容器不能放在外面,应当放在生物安全柜内。9.有固定皮下注射针头的注射器不能够用于移液。10.在打开隔膜封口的瓶子时,应使用可以使用移液管的工具,而避免使用皮下注射针头和注射器。11.为了避免感染性物质从移液管中滴出而扩散,在工作台面应当放置一块浸有消毒液的布或吸有消毒液的纸,使用后将其按感染性废弃物处理。89、7培养箱和水浴箱 1.每天检查温度,并做好记录。 2.确保定期清洁和消毒。3.水浴箱不用叠氮化钠作抑菌剂。4.发现故障应立即停止使用,将标本迅速转移至其他替代培养箱或水浴箱内,通知维修科维并报告科主任。8尖锐器具安全使用8.1不要重新给针头戴护套或截断针头。使用针头锁定型注射器以避免针头和注射器的分离,或使用针头和注射器为一体的一次性注射器。8.2注射器抽液时要小心,尽可能减少形成 气泡和接种物泡沫。8.3避免用注射器来混合感染性液体;否则,要确保针头的尖端伸入到容器中液面之下,并避免用力过大。8.4从有橡皮塞的瓶子中取下针头之前,应用经适当消毒剂浸湿的脱脂棉来包裹针头和塞子。8.5竖直向上将90、注射器中过量的液体和气泡排到经适当消毒剂浸湿的脱脂棉或装有棉花的小瓶中。8.6操作感染性物质时均应在生物安全柜中进行。8.7使用后要进行高压灭菌并确保进行了妥善处 理。如果使用的是一次性针头和注射器,只有在高压灭菌后才能拆卸。9实验室中标本的安全操作实验室标本的收集、运输和处理不当,会带来使相关人员感染的危险。9.1标本容器标本容器可以是玻璃的,但最好使用塑料制品。标本容器应当坚固,正确地用盖子或塞子盖好后应无泄漏。在容器外部不能有残留物。容器上应当正确地粘贴标签以便于识别。标本的要求或说明书不能够卷在容器外面,而是要分开放置,最好放置在防水的袋子里。9.2标本在设施内的传递为了避免意外泄漏或91、溢出,应当使用盒子等二级容器,并将其固定在架子上使装有标本的容器保持直立。二级容器可以是金属或塑料制品,应该可以耐高压灭菌或耐受化学消毒剂的作用。密封口最好有一个垫圈,要定期清除污染。9.3标本接收需要接收大量标本的实验室应当安排专门的房间或空间。9.4打开包装接收和打开标本的人员应当了解标本对身体健康的潜在危害,并接受过如何采用标准防护方法的培训,尤其是处理破碎或泄漏的容器时更应如此。标本的内层容器要在生物安全柜内打开,并准备好消毒剂。9.5避免感染性物质的扩散 1.为了避免被接种物洒落,微生物接种环的直径应为2-3 m m并完全封闭,柄的长度应小于6 cm以减小抖动。 2.使用封闭式微型电92、加热器消毒接种环,能够避免在本生灯的明火上加热所引起的感染性物质爆溅。最好使用不需要再进行消毒的一次性接种环。 3.干燥痰液标本时要注意避免生成气溶胶。4.准备高压灭菌和/或将被处理的废弃标本和培养物应当放置在防漏的容器内(如实验室废弃物袋)。在丢弃到废弃物盛器中以前,顶部要固定好(如采用高压灭菌胶带)。 5.在每一阶段工作结束后,必须采用适当的消毒剂清除工作区的污染。9.6避免感染性物质的食入以及与皮肤和眼睛的接触 1.微生物操作中释放的较大粒子和液滴(直径大于5 m)会迅速沉降到工作台面和操作者的手上。实验室人员在操作时应戴一次性手套,并避免触摸口、眼及面部。 2.不能在实验室内饮食和储存93、食品。 3.在实验室里时,嘴里不应有东西一钢笔、铅笔、口香糖。4.不应在实验室化妆。 5.在所有可能产生潜在感染性物质喷溅的操作过程中,操作人员应将面部、口和眼遮住或采取其他防护措施。9.7避免感染性物质的注入 1.通过认真练习和仔细操作,可以避免破损玻璃器皿的刺伤所引起的接种感染。应尽可能用塑料制品代替玻璃制品。2.锐器损伤(如通过皮下注射针头、巴斯德玻璃吸管以及破碎的玻璃)可能引起意外注入感染性物质。 3.以下两点可以减少针刺损伤:(a)减少使用注射器和针头(可用一些简单的工具来打开瓶塞,然后使用吸管取样而不用注射器和针头);(b)在必须使用注射器和针头时,采用锐器安全装置。4.不要重新给94、用过的注射器针头戴护套。一次性物品应丢弃在防/耐穿透的带盖容器中。5.应当用巴斯德塑料吸管代替玻璃吸管。9.8血清的分离 1.只有经过严格培训的人员才能进行这项工作。2.操作时应戴手套以及眼睛和勃膜的保护装置。3.规范的实验操作技术可以避免或尽量减少喷溅和气溶胶的产生。血液和血清应当小心吸取,而不能倾倒。严禁用口吸液。4.移液管使用后应完全浸入适当的消毒液中。移液管应在消毒液中浸泡适当的时间,然后再丢弃或灭菌清洗后重复使用。5.带有血凝块等的废弃标本管,在加盖后应当放在适当的防漏容器内高压灭菌和/或焚烧。6.应备有适当的消毒剂来清洗喷溅和溢出标本。9.9装有冻干感染性物质安颤的开启应该小心打开95、装有冻干物的安瓶,因为其内部可能处于负压,突然冲入的空气可能使一些物质扩散进入空气。安瓶应该在生物安全柜内打开,建议按下列步骤打开安瓶: 1.首先清除安瓶外表面的污染。 2.如果管内有棉花或纤维塞,可以在管上靠近棉花或纤维塞的中部锉一痕迹。 3.用一团酒精浸泡的棉花将安瓶包起来以保护双手,然后手持安瓶从标记的锉痕处打开。 4.将顶部小心移去并按污染材料处理。 5.如果塞子仍然在安瓶上,用消毒镊子除去。 6.缓慢向安瓶中加入液体来重悬冻干物,避免出现泡沫。9.10装有感染性物质安颤的储存装有感染性物质的安瓶不能浸入液氮中,因为这样会造成有裂痕或密封不严的安瓶在取出时破碎或爆炸。如果需要低温保存,96、安瓶应当储存在液氮上面的气相中。此外,感染性物质应储存在低温冰箱或干冰中。当从冷藏处取出安瓶时,实验室工作人员应当进行眼睛和手的防护。 以这种方式储存的安瓶在取出时应对外表面进行消毒。9.11对血液和其他体液、组织及排泄物的标准防护方法设计标准防护方法以降低从已知或未知感染源的微生物传播危险。9.12标本的收集,标记和运输1.始终遵循标准防护方法;所有操作均要戴手套。2.应当由受过培训的人员来采集病人或动物的血样。3.在静脉抽血时,应当使用一次性的安全真空采血管取代传统的针头和注射器,因为这样可以使血液直接采集到带塞的运输管和/或培养管中。用完后自动废弃针头。4.装有标本的试管应置于适当容器中97、运至实验室,在实验室内部转运也应这样。检验申请单应当分开放置在防水袋或信封内。5.接收人员不应打开这些袋子。9.13打开标本管和取样1.应当在生物安全柜内打开标本管。2.必须戴手套,并建议对眼睛和粘膜进行保护(护目镜或面罩)。3.在防护衣外面要再穿上塑料围裙。4.打开标本管时,应用纸或纱布抓住塞子以防止喷溅。9.14玻璃器皿和锐器1.尽可能用塑料制品代替玻璃制品。只能用实验室级别(硼硅酸盐)的玻璃,任何破碎或有裂痕的玻璃制品均应丢弃。2.不能将皮下注射针作为移液管使用。9.15用于显微镜观察的盖玻片和涂片用于显微镜观察的血液、唾液和粪便标本在固定和染色时,不必杀死涂片上的所有微生物和病毒。应当98、用镊子拿取这些东西,妥善储存,并经清除污染和/或高压灭菌后再丢弃。9.16清除污染使用次氯酸盐和高级别的消毒剂来清除污染。一般情况可使用新鲜配制的含有效氯1 g/1的次氯酸盐溶液,处理溢出的血液时,有效氯浓度应达到5 g/1。戊二醛可以用于清除表面污染。检验科个人防护装备规定个人防护装备是减少操作人员暴露于气溶胶、喷溅物以及意外接种等危险的一个屏障。可根据所进行工作的性质来选择着装和装备。所有装备必须符合国家规定的标准。在实验室中工作时,必须穿着防护服。在离开实验室前,要脱下防护服并洗手。1手套、口罩、帽子当进行实验室操作时,手、面部、头发可能被污染,特别是手容易受到“锐器”伤害。在进行实验室99、一般性工作,以及在处理感染性物质、血液和体液时,应广泛地使用一次性乳胶、乙烯树脂或聚睛类材料的手术用手套及一次性口罩、帽子。可重复使用的手套虽然也可以用,但必须注意一定要正确冲洗、摘除、清洁并消毒。 在操作完感染性物质、结束生物安全柜中工作以及离开实验室之前,均应该摘除手套脱掉口罩、帽子并彻底洗手。用过的一次性手套、口罩、帽子应该与实验室的感染性废弃物一起丢弃。 手套、口罩、帽子不得戴离实验室区域。2护目镜,安全眼睛和面罩要根据所进行的操作来选择相应的装备,从而避免因实验物品飞溅对眼睛和面部造成的危害。制备屈光眼镜(prescription glasses)或平光眼镜配以专门镜框,将镜片从镜框100、前面装上,这种镜框用可弯曲的或侧面有护罩的防碎材料制成(安全眼镜)。安全眼镜即使侧面带有护罩也不能对喷溅提供充分的保护。护目镜应该戴在常规视力矫正眼镜或隐形眼镜(它们对生物学危害没有保护作用)的外面来对飞溅和撞击提供保护。面罩(面具)采用防碎塑料制成,形状与脸型相配,通过头带或帽子佩戴。意外事故应对方案和应急程序每一个从事感染性微生物工作的实验室都应当制订针对所操作微生物和动物危害的安全防护措施。在任何涉及处理或储存危险度3级和4级微生物的实验室(三级生物安全水平的防护实验室和四级生物安全水平的最高防护实验室),都必须有一份关于处理实验室和动物设施意外事故的书面方案。国家和/或当地的卫生部门要101、参与制订应急预案。1意外事故应对方案1.1意外事故应对方案应当提供以下操作规范: 1.防备自然灾害,如火灾、洪水、地震和爆炸 2.生物危害的危险度评估 3.意外暴露的处理和清除污染4.人员和动物从现场的紧急撤离 5.人员暴露和受伤的紧急医疗处理 6.暴露人员的医疗监护 7.暴露人员的临床处理 8.流行病学调查 9.事故后的继续操作。1.2在制定意外事故应对方案时应考虑以下几方面问题: 1.高危险度等级微生物的鉴定 2.高危险区域的地点,如实验室、储藏室和动物房 3.明确处于危险的个体和人群 4.明确责任人员及其责任,如生物安全官员、安全人员、地方卫生部门、临床医生、微生物学家、兽医学家、流行病102、学家以及消防和警务部门。5.列出能接受暴露或感染人员进行治疗和隔离的单位6.暴露或感染人员的转移7.列出免疫血清、疫苗、药品、特殊仪器和物资的来源8.应急装备的供应,如防护服、消毒剂、化学和生物学的溢出处理盒、清除污染的器材物品。2微生物实验室应急程序2.1刺伤,切割伤或擦伤受伤人员应当脱下防护服,清洗双手和受伤部位,使用适当的皮肤消毒剂,必要时进行医学处理。要记录受伤原因和相关的微生物,并应保留完整适当的医疗记录。2.2潜在感染性物质的食入应脱下受害人的防护服并进行医学处理。要报告食入材料的鉴定和事故发生的细节,并保留完整适当的医疗记录。2.3潜在危害性气溶胶的释放所有人员必须立即撤离相关区103、域,任何暴露人员都应接受医学咨询。应当立即通知实验室负责人和生物安全官员。为了使气溶胶排出和使较大的粒子沉降,在一定时间内(例如1h内)严禁人员入内。如果实验室没有中央通风系统,则应推迟进入实验室(例如24 h)。 应张贴“禁止进入”的标志。过了相应时间后,在生物安全官员的指导下来清除污染。应穿戴适当的防护服和呼吸保护装备。2.4容器破碎及感染性物质的溢出应当立即用布或纸巾覆盖受感染性物质污染或受感染性物质溢洒的破碎物品。然后在上面倒上消毒剂,并使其作用适当时间。然后将布、纸巾以及破碎物品清理掉;玻璃碎片应用镊子清理。然后再用消毒剂擦拭污染区域。如果用簸箕清理破碎物,应当对他们进行高压灭菌或放104、在有效的消毒液内浸泡。用于清理的布、纸巾和抹布等应当放在盛放污染性废弃物的容器内。在所有这些操作过程中都应戴手套。 如果实验表格或其他打印或手写材料被污染,应将这些信息复制,并将原件置于盛放污染性废弃物的容器内。3离心机内装有潜在感染性物质的离心管发生破裂如果机器正在运行时发生破裂或怀疑发生破裂,应关闭机器电源,让机器密闭(例如30 min)使气溶胶沉积。如果机器停止后发现破裂,应立即将盖子盖上,并密闭(例如30 min)。发生这两种情况时都应通知生物安全官员。 随后的所有操作都应戴结实的手套(如厚橡胶手套),必要时可在外面戴适当的一次性手套。当清理玻璃碎片时应当使用镊子,或用镊子夹着的棉花来105、进行。 所有破碎的离心管、玻璃碎片、离心桶、+字轴和转子都应放在无腐蚀性的、已知对相关微生物具有杀灭活性的消毒剂内。未破损的带盖离心管应放在另一个有消毒剂的容器中,然后回收。 离心机内腔应用适当浓度的同种消毒剂擦拭,并再次擦拭,然后用水冲洗并干燥。清理时所使用的全部材料都应按感染性废弃物处理。4火灾和自然灾害在制定的应急预案中应包括消防人员和其他服务人员。应事先告知他们哪些房间有潜在的感染性物质。要安排这些人员参观实验室,让他们熟悉实验室的布局和设备,这都是+分有益的。 发生自然灾害时,应就实验室建筑内和/或附近建筑物的潜在危险向当地或国家紧急救助人员提出警告。只有在受过训练的实验室工作人员的106、陪同下,他们才能进入这些地区。感染性物质应收集在防漏的盒子内或结实的一次性袋子中。 由生物安全人员依据当地的规定决定继续利用或是最终丢弃。5紧急救助和联系对象在设施内应显著张贴以下电话号码及地址: 1.研究所和实验室本身的电话及地址(打电话者或呼叫的服务人员可能不知道详细地址或位置)2.研究所所长或实验室主任3.实验室主管4.生物安全官员5.消防队6.医院/急救机构/医务人员(如果可能,提供各个诊所、科室和/或医务人员的名称)7.警察8.医学官员9.负责的技术员10.水、气和电的维修部门6急救装备必须配备以下紧急装备:1.急救箱,包括常用的和特殊的解毒剂2.合适的灭火器和灭火毯建议配备以下设备107、,但可根据具体情况有所不同: 1.全套防护服(连体防护服、手套和头套一用于涉及危险度3级和4级微生物的事故)2.带有能有效防护化学物质和颗粒的滤毒罐的全面罩式防毒面具(full-face respirator)3.房间消毒设备,如喷雾器和甲醛熏蒸器4.担架5.工具,如锤子、斧子、扳手、螺丝刀、梯子和绳子6.划分危险区域界限的器材和警告标示。消毒和灭菌处理消毒和灭菌的基本常识对于实验室生物安全是至关重要的。由于严重污染的物品不能迅速地消毒或灭菌,因此了解预清洁的基本原理也同样重要。关于消毒和灭菌,以下基本原则适用于所有已知不同级别的微生物病原体。 关于清除污染的特殊要求,要根据实验工作的类型以及108、所操作的感染性物质的特性来决定。这里所提供的一般性资料,可用于建立标准的和更专门的程序,以处理特定实验室中所涉及的生物危害。消毒剂的作用时间因具体的品种和生产商而不同。因此,所有消毒剂使用的推荐意见均必须遵守生产商的说明。1实验室材料的清洁清洁是指去除污垢、有机物和污溃。清洁方法包括刷、吸、干擦、洗涤或用浸泡肥皂水或清洁剂的湿墩布拖擦。尘土、污物以及有机物是微生物的栖身之所,并可能影响除污染剂(抗菌剂、化学杀菌剂以及消毒剂)的杀菌作用。必须通过预清洁才能实现消毒和灭菌的目的。许多杀菌剂只对经过预清洁的物品才具有杀菌活性。预清洁时必须小心,以避免暴露于感染性物质。预清洁时必须使用与以后使用的杀菌109、剂化学上相容的物质。非常普遍的是采用相同的化学杀菌剂进行预清洁和消毒。2化学杀菌剂多种化学品可以用作消毒剂和/或防腐剂。由于其数量与种类还在不断增加,因此,要根据具体的用途认真选择。 许多化学品在较高温度时其杀菌效果更快也更好。但同时,较高的温度能够加速其挥发和降解。因此在热带地区,由于室温较高,可能缩短化学杀菌剂的有效期,在使用和储存这些化学品时要特别注意。许多杀菌剂对人或环境有害,应当按生产商的说明小心地进行选择、贮存、操作、使用和废弃。为了个人的安全,建议在稀释化学杀菌剂时应戴手套、围裙和保护眼睛的器具。化学杀菌剂一般不用于地面、墙壁、设备和家具的常规清洁。但是,在控制疾病暴发时可以使用110、。正确使用化学杀菌剂可以确保实验场所的安全,减少来自感染性物质的危险。只要可能,出于经济原因、控制库存以及限制环境污染等的考虑,应尽可能控制所使用化学杀菌剂的量。3清除局部环境的污染需要联合应用液体和气体消毒剂来清除实验室空间、用具和设备的污染。清除表面污染时可以使用次氯酸钠(NaOCI)溶液;含有1%有效氯的溶液适于普通的环境卫生设备,但是当处理高危环境时,建议使用高浓度(5 g/1)溶液。用于清除环境污染时,含有3%过氧化氢的溶液也可以作为漂白剂的代用品。可以通过加热多聚甲醛或煮沸福尔马林所产生的甲醛蒸气熏蒸来清除房间和仪器的污染。这是一项需要由专门培训的专业人员来进行的、非常危险的操作。111、产生甲醛蒸气前,房间的所有开口(如门窗等)都应用密封带或类似物加以密封。熏蒸应当在室温不低于21 0C且相对湿度70%的条件下进行。清除污染时气体需要与物体表面至少接触8h。熏蒸后,该区域必须彻底通风后才能允许人员进入。在通风之前需要进入房间时,必须戴适当的防毒面具。可以采用气态的碳酸氢按来中和甲醛。采用过氧化氢溶液对小空间进行气雾熏蒸同样有效,但需要专门的蒸气发生设备。4清除生物安全柜的污染清除级和级生物安全柜的污染时,要使用能让甲醛气体独立发生、循环和中和的设备。应当将适量的多聚甲醛放在电热板上面的长柄平锅中(在生物安全柜外进行控制)。然后将含有比多聚甲醛多10%的碳酸氢按置于另一个长柄平112、锅中(在生物安全柜外进行控制)。在柜外将该平锅放置到第二个加热板上,在安全柜外将电热板接上插头通电,以便需要时在柜外通过开关电源插头控制盘子的操作。如果相对湿度低于70%,在使用强力胶带(如管道胶带(duct tape)密封前部封闭板前,还要在安全柜内部放置一个开口的盛有热水的容器。如果前部没有封闭板,则可以用大块塑料布粘贴覆盖在前部开口和排气口以保证气体不会泄漏进入房间。同时供电线穿过前封闭板的穿透孔须用管道胶带密封。 将放有多聚甲醛平锅的加热板插上插头接通电源。在多聚甲醛完全蒸发时拔掉插头以断电。使生物安全柜静置至少6h。然后给放有第二个平锅的加热板插上插头通电,使碳酸氢按蒸发。然后拔掉电113、插头,接通生物安全柜电源两次,每次启动约2秒钟来让碳酸氢按气体循环。在移去前封闭板(或塑料布)和排气口罩单前,应使生物安全柜静置30 min。使用前应擦掉生物安全柜表面上的残渣。5洗手/清除手部污染处理生物危害性材料时,只要可能均必须戴合适的手套。但是这并不能代替实验室人员需要经常地、彻底地洗手。处理完生物危害性材料和动物后以及离开实验室前均必须洗手。大多数情况下,用普通的肥皂和水彻底冲洗对于清除手部污染就足够了。但在高度危险的情况下,建议使用杀菌肥皂。手要完全抹上肥皂,搓洗至少10秒钟,用干净水冲洗后再用干净的纸巾或毛巾擦干(如果有条件,可以使用暖风干手器)。推荐使用脚控或肘控的水龙头。如果114、没有安装,应使用纸巾或毛巾来关上水龙头,以防止再度污染洗净的手。如上所述,如果没有条件彻底洗手或洗手不方便,应该用酒精擦手来清除双手的轻度污染。6热力消毒和灭菌加热是最常用的清除病原体污染的物理手段。“干”热没有腐蚀性,可用来处理实验器材中许多可耐受160 0C或更高温度2-4 h的物品。燃烧或焚化也是一种干热方式。高压灭菌的湿热法则最为有效。煮沸并不一定能杀死所有的微生物或病原体,但如果其他方法(化学杀菌、清除污染、高压灭菌)不可行或没有条件时,也可以作为一种最起码的消毒措施。灭菌后的物品必须小心操作并保存,以保证在使用之前不再被污染。7高压灭菌程序压力饱和蒸汽灭菌(高压灭菌)是对实验材料进115、行灭菌的最有效和最可靠的方法。对于大多数目的,下列组合可以确保正确装载的高压灭菌器的灭菌效果: 1. 134 0C, 3 min 2. 126 0C, 10 min 3. 121 0C, 15 min 4. 115 0C. 25 min.8焚烧在处理那些经过或事先未经清除污染的动物尸体以及解剖组织或其他实验室废弃物时,焚烧是一种有效的方法。只有在实验室可以控制焚烧炉的条件下,才能用焚烧代替高压灭菌来处理感染性物质。需要有效控制温度,并配备二级焚烧室时才能实现彻底焚烧。许多焚烧炉,尤其是那些只有单个焚烧室的,不能满足处理感染性物质、动物尸体和塑料制品的要求。这些材料可能不能完全销毁,微生物、有毒116、化学品和烟尘还可能通过烟囱排放而污染大气。但也有许多结构令人满意的焚烧室。理想的是一级焚烧室的温度至少应达到800 0C,二级焚烧室的温度至少应达到1000 0Co需要焚烧的材料(即使事先已清除污染)应当用袋子运送到焚烧室,最好使用塑料袋。负责焚烧的工作人员应当接受关于如何装载和控制温度等的正确指导。还需要注明的是,焚烧炉的操作是否有效主要取决于对需要处理的废弃物中物品的正确混合。人们已经关注到现有的或计划制造中的焚烧炉可能对环境造成的负面影响,并正努力使焚烧炉对环境的影响更小,也更节约能源。9废弃物处理实验室和医学废弃物的处理要遵守各个地区、国家和国际的规定,在设计和执行关于生物危害性废弃物117、处理、运输和废弃的规划之前,必须参考最新版的相关文件。一般情况下,焚烧炉内的灰烬可以作为普通家庭废弃物处理并由地方有关部门运走。高压灭菌过的废弃物可以在其他地方焚烧后处理,或在指定垃圾场掩埋处理。高致病菌种的保存与销毁菌种的分类菌种的分类根据其危险性决定(包括实验室感染的可能性,感染后发病的可能性,症状轻重及愈后情况,有无致命危险及有效的防止实验室感染方法,用一般的微生物操作方法能否防止实验室感染、我国有否此种菌种及曾否引起流行、人群免疫力等情况)。依其危险程度的大小,我国的菌种分为四类。 一类:实验室感染的机会多,感染后发病的可能性大,症状重并能危及生命,缺乏有效的预防方法,以及传染性强,对118、人群危害性大的烈性传染病,包括国内未发现或虽已发现,但无有效防治方法的烈性传染病菌种。如: 鼠疫耶尔森氏菌、霍乱弧菌(包括EL-tor弧菌); 天花病毒、黄热病毒(野毒株)、新疆出血热(克里米亚刚果出血热)病毒、东、西方马脑炎病毒、委内瑞拉马脑炎病毒、拉沙热(Lassa)病毒、马堡(Marburg)病毒、埃波拉(Ebola)病毒、猴疱疹病毒(猴病毒); 粗球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、杜波氏组织胞浆菌。 二类:实验室感染机会较多、感染后的症状较重及危及生命,发病后不易治疗及对人群危害较大的传染病菌种。如: 土拉弗郎西丝氏菌、布氏菌、炭疽芽胞菌、肉毒梭菌、鼻疽假单胞菌、类鼻疽假单胞菌、麻风分枝杆菌、119、结核分枝杆菌; 狂犬病病毒(街毒)、森林脑炎病毒、流行性出血热病毒、国内尚未发现病人在国外引起脑脊髓炎及出血热的其它虫媒病毒、登革热病毒、甲、乙型肝炎病毒; 各种立克次体(包括斑疹伤寒、Q热); 鹦鹉热、鸟疫衣原体、淋巴肉芽肿衣原体; 马纳青霉、北美芽生菌、副球孢子菌、新型隐球菌、巴西芽生菌、烟曲霉、着色霉菌。 三类:仅具有一般危险性,能引起实验室感染的机会较少,一般的微生物学实验室采用一般实验技术能控制感染或有对之有效的免疫预防方法的菌种。如: 脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎双球菌、葡萄状球菌、链球菌、淋病奈瑟氏菌及其它致病性奈瑟氏菌、百日咳博德特氏菌、白喉棒杆菌及其它致病性棒杆菌、流感嗜血杆菌、沙门120、氏菌、志贺氏菌、致病性大肠埃希氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、空肠弯曲菌、酵米面黄杆菌、副溶血性弧菌、变形杆菌、李斯特氏菌、铜绿色假单孢菌、气肿疽梭菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌及其它致病梭菌; 钩端螺旋体、梅毒螺旋体、雅司螺旋体; 乙型脑炎病毒、脑心肌炎病毒、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒以及未列入一、二类的其它虫媒病毒、新必斯(Sindbis)病毒、滤泡性口炎病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、脊髓灰质炎病毒、腺病毒、柯萨奇(A及B组)病毒,艾柯(ECHO)病毒及其它肠道病毒、疱疹类病毒(包括单纯疱疹、巨细胞、EB病毒水痘病毒)、狂犬病固定毒、风疹病毒; 致病性支原体;121、 黄曲霉、杂色曲霉、梨孢镰刀菌、蛙类霉菌、放线菌属、奴卡氏菌属、石膏样毛癣菌(粉型)、孢子丝菌。 四类:生物制品、菌苗、疫苗生产用各种减毒、弱毒菌种及不属于上述一、二、三类的各种低致病性的微生物菌种。 对通过分子生物学方法产生的新菌株,应按其原始亲本中的最高类别对待。 不允许进行两个菌株完整基因组的重组试验。菌种的收集任何单位或个人分离、筛选得到具有一定价值的菌种,应及时将该菌种及详细资料送交有关中心及专业实验室鉴定、复核、保藏。菌种的保藏 (一)各保藏管理机构保藏的菌种,必须具有该菌种的详细历史及有关实验资料。 (二)各保藏管理机构,对负责保藏国家编号的菌种应采取妥善可靠的方法保存,避免菌种122、死亡或变异。凡取消某些无继续保藏价值的国家编号菌种应报保藏管理中心批准。 (三)各保藏管理机构,应制订严密的安全保管制度,建财、建卡,并指定专人负责,一、二类及专利菌种应设有专库或专柜单独保藏。 包藏应由经过培训的人员处理危险废物,并应穿戴适当的个人防护装备 双人双锁 严格的登记制度: 1. 统一进行菌(毒)种的编号 2. 详细记录菌(毒)种的学名、株名、来源、特性、用途、批号、传代冻干日期、数量。 3. 在保管过程中,凡传代、冻干及分发,均应及时登记,并定期核对库存数量 4. 销毁、外借的审批和登记 医疗机构的实验室(包括检验科及其他科研实验室)不能从事高致病性活动,不能保存高致病性菌(毒)123、种 医疗活动的不可预判,一旦检出高致病性菌(毒)种: 1. 要有相应的处理程序 2. 报告制度 3. 菌(毒)种转运和销毁 4. 记录感染性物质的运送感染性及潜在感染性物质的运输要严格遵守国家和国际规定。这些规定描述了如何正确使用包装材料,以及其他的运输要求。 实验室人员必须按照可适用的运输规定来运送感染性物质。按照规定执行可以实现: 1.减少包装受损和泄漏的可能性,因此 2.减少可能造成传染的暴露; 3.提高运输效率。1基本的三层包装系统在感染性及潜在感染性物质运输中选择使用的三层包装系统,内层容器,第二层包装以及外层包装。装载标本的内层容器必须防水、防漏并贴上指示内容物的适当标签。内层容器124、外面要包裹足量的吸收性材料,以便内层容器打破或泄漏时,能吸收溢出的所有液体。防水、防漏的第二层包装用来包裹并保护内层容器。有些包装好的内层容器可以放在独立的第二层包装中。有些规定中包括了感染性物质包装的体积及重量限度。第三层包装用于保护第二层包装在运输过程中免受物理性损坏。按照最新规定的要求,还应提供能够识别或描述标本的特性,以及能够识别发货人和收货人的标本资料单、信件和其他各种资料,以及其他任何所需要的文件。2溢出清除程序当发生感染性或潜在感染性物质溢出时,应采用下列溢出清除规程: 1.戴手套,穿防护服,必要时需进行脸和眼睛防护。2.用布或纸巾覆盖并吸收溢出物。 3.向纸巾上倾倒适当的消毒剂125、,并立即覆盖周围区域(通常可以使用5%漂白剂溶液;但在飞机上发生溢出时,则应该使用季按类消毒剂)。4.使用消毒剂时,从溢出区域的外围开始,朝向中心进行处理。5.作用适当时间后(例如30 min),将所处理物质清理掉。如果含有碎玻璃或其他锐器,则要使用簸箕或硬的厚纸板来收集处理过的物品,并将它们置于可防刺透的容器中以待处理。6.对溢出区域再次清洁并消毒(如有必要,重复第2-5步)。7.将污染材料置于防漏、防穿透的废弃物处理容器中。8.在成功消毒后,通知主管部门目前溢出区域的清除污染工作已经完成。危害性化学品,火和电的安全1危害性化学品在微生物学实验室中的工作人员不仅会接触致病微生物,也会接触化学126、品,因此让他们充分了解这些化学品的毒性作用、暴露途径以及可能与操作和储存这些化学品有关的危害是至关重要的。可以从化学品生产商和/或供应商那里得到有关的物质安全资料卡(material safety data sheets, MSDS)或其他有关化学危害的资料。在使用这些化学品的实验室中,应可方便查阅上述资料,例如可以将其作为安全手册或操作手册的一部分。暴露途径人们可能通过下列方式暴露于危险性化学品: 1.吸入 2.接触 3.食入 4.针刺 5.通过破损皮肤。化学品的储存实验室应该只保存满足日常使用量的化学品。大量的化学品应储存在专门指定的房间或建筑物内。化学品溢出实验室化学品的大多数生产商都会127、发行描述化学品溢出处理的示意图,溢出处理的示意图和工具盒都能买到。应该将适当的示意图张贴在实验室中显著的位置,并应配备下列物品: 1.化学品溢出处理工具盒 2.防护服,例如耐用橡胶手套、套鞋或橡胶靴、防毒面具 3.铲子和簸箕 4.用于夹取碎玻璃的镊子5.拖把、擦拭用的布和纸6.桶7.用于中和酸及腐蚀性化学品的苏打(碳酸钠,NaZC03)或碳酸氢钠(NaHC03)8.沙子(用于覆盖碱性溢出物)9.不可燃的清洁剂。当发生大量化学品溢出时,应该采取下列措施:1.通知有关的安全官员2.疏散现场的闲杂人员3.密切关注可能受到污染的人员4.如果溢出物是易燃性的,则应熄灭所有明火,关闭该房间中以及相邻区 域128、的煤气,打开窗户(可能时),并关闭那些可能产生电火花的电器5.避免吸入溢出物品所产生的蒸气6.如果安全允许,启动排风设备7.提供清理溢出物的必要物品(参见上面)。2火的危害实验室安全官员与地方消防官员之间的紧密合作是极为必要的。除了化学危害以外,也必须考虑火对感染性物质播散的可能影响。这将可能决定灭火或控制火灾何为最佳。 最好由地方消防官员协助对实验室成员进行火灾发生时的应急行动和如何使用消防器材等方面的消防培训。 在每个房间、走廊以及过道中应设置显著的火警标志、说明以及紧急通道标志。 在实验室中引起火灾的通常原因包括: 1.超负荷用电 2.电器保养不良,例如电缆的绝缘层破旧或损坏 3.供气管129、或电线过长 4.仪器设备在不使用时未关闭电源 5.使用不是专为实验室环境设计的仪器设备 6.明火 7.供气管老化锈蚀 8.易燃、易爆品处理、保存不当 9.不相容化学品没有正确隔离 10.在易燃物品和蒸气附近有能产生火花的设备 11.通风系统不当或不充分。 消防器材应放置在靠近实验室的门边,以及走廊和过道的适当位置。这些器材应包括软管、桶(用于装水和沙子)以及灭火器。灭火器要定期进行检查和维护,使其维持在有效期内。3电的危害对所有电器设备都必须定期进行检查和测试,包括接地系统。 在实验室电路中要配置断路器和漏电保护器。断路器不能保护人,只是用来保护线路不发生电流超负荷从而避免火灾。漏电保护器用于130、保护人员避免触电。 实验室的所有电器均应接地,最好采用三相插头。 实验室的所有电器设备和线路均必须符合国家电气安全标准和规范。检验科应对突发事件应急预案依据我院突发事件紧急预案的要求,结合检验医学的特点,为保证临床抢救工作的顺利进行,特制定检验科应急预案。第一条:凡符合我院突发事件紧急预案要求的事件,均按照本预案要求执行。第二条:遇有突发事件,在医院突发事件应急指挥部的统一指导,统一指挥下,成立本科应急突发事件领导小组,由科主任、副主任、各专业组长组成,负责全科人员参与突发事件医学检验工作的领导和指挥。第三条:应急小组分工负责:科主任、副主任、负责全科工作安排及与其它科室、部门及院领导的沟通、131、协调;各专业组长负责保障涉及本组检验工作的顺利完成。第四条:人员召集科里记录每一位职工的联系电话,以便应急时取得联系,职工应保证登记电话有效,如有更改,需及时告知;各专业组应记录本组人员、科主任、副主任、有效联系电话,存放于资料文件夹,以便及时相互联系,如有更改,及时告知。各专业组长负责应急事件具体工作人员的召集,无特殊原因,都必须积极配合。急诊值班室要公示检验科所有人员电话。第五条:试剂、仪器、物资的准备要做到忙而不乱,有条不紊的应对突发事件,就要保持仪器良好的工作状态,在日常工作中要严格按照质量手册的要求保养、维护、清洁仪器,专业组长要掌握试剂、消耗物资的使用情况,及时筹备。储备必要的生物132、安全防护物品,如隔离衣、防护口罩眼罩等,必要时应用。徐州市传染病医院生物安全实验室意外事件应急预案 为了预防实验室污染,有效应对实验室突发事件,保障实验人员安全,防止污染环境。一旦发生污染能及时处理,制订本预案。一、组织机构及职责领导小组: 刘成永成 员:钱秀梅司宏伟闫家微朱春玲侯远沛二、职责:领导小组负责组织协调工作,应急预防及应急处理。三、意外事故的处理应严格按照有关操作原则进行病原微生物的操作,但操作者在实验过程中的忽或错误,有时会造成严重后果,对操作者本人、共同进行操作的工作人员和实验室环境造成威胁。因此,妥善、果断地处理这些以外事故对于保证实验室安全至关重要。(一)菌(毒)外溢在台面133、地面和其他表面1、戴手套,穿防护服,必要时需进行脸和眼睛防护。2、用布或纸巾覆盖并吸收溢出物。3、向纸巾上倾倒适当的消毒剂,并立即覆盖周围区域。通常可以用5%漂白剂溶液(次氯酸钠溶液)。4、使用消毒剂时,从溢出区域的外周开始,向中心进行处理。5、作用适当时间后(例如30min),将所处理物质清理掉。如果含有碎玻璃或其他锐器,则要使用簸箕或硬的厚纸板来收集处理过的物品,并将它们置于可防刺透的容器中以待处理。6、对溢出区域再次进行清洁并消毒(如有必要,重复第2-5步)。7、将污染材料置于防漏、防穿透的弃物处理容器中。8、在成力消毒后,通过主管部门目前溢出区域的清除污染工作已经完成。(二)菌(毒)134、外溢在防护服上应立即进行局部消毒,更换。污染的防护服用消毒液浸泡后进行高压灭菌处理。(三)菌(毒)外溢到皮肤粘膜这种情况被视为有很大危险,应立即停止工作,能用消毒的部位可进行消毒,然后用水冲洗1520min。处理后安全撤离,其间根据条件进行适当的预防治疗。(四)皮肤刺伤若皮肤被刺伤应被视为有极大危险,应立即停止工作,对伤口进行挤血,用水冲洗消毒。视情况隔离观察,其间根据条件进行适当的预防治疗。(五)离心管发生破裂1、非封闭离心桶的离心机内盛有潜在感染性物质的离心管发生破裂。这种情况被视为发生气溶胶暴露事故,应立即加强个人防护力度,其处理原则如下:(1)如果机器正在运行时发生破裂或怀疑发生破裂,135、应关闭机器电源,停止后密封离心桶至少30min,使气溶胶沉积。(2)如果机器停止后发生破裂,应立即将盖子盖上,并密封至少30min。发生这两种情况时都应报告实验室负责人。随后的所有操作都应加强个人呼吸保护并戴结实的手套(如厚橡胶手套),必要时可在外面带适当的一次性手套。当清理玻璃碎片时应当使用镊子,或用镊子夹着棉花来进行所有破碎的离心管、玻璃碎片、离心桶、十字轴和转子都应放在无腐蚀性的、已知对相关微生物具有杀灭活性消毒剂内。未破损的带盖离心管应放在另一个消毒剂的容器中,然后回收。离心机内仓应用适当浓度的同种消毒剂反复擦拭,然后用水冲洗并干燥。清理时所使用的全部材料都应按感染性废弃物处理。2、在136、可封闭的离心桶(安全杯)内离心管发生破裂所有密封离心桶都应在所谓安全柜内装卸。如果怀疑在安全杯内发生破裂,应该松开安全杯盖子并将离心桶高压灭菌。还可以采用化学方法消毒安全杯。四、发生感染后的应急措施(一)一旦发生实验室污染事件,立即告知同事及实验室负责人。(二)发生感染后及时采取必要的应对措施。1、立即用肥皂水清洗暴露表面,用洗眼液洗眼,用生理盐水漱口。2、起动应急治疗及免疫。3、如果HBV易感者意外受到HBV感染,立即使用HBV免疫球蛋白治疗,然后再接种乙肝疫苗。如果HIV易感者意外受到HIV感染,HIV目前没有疫苗,意外感染者及时和市疾控中心联系尽,尽快使用AZT预防。受染者还应立即检测H137、IV抗体,然后在第6周、12周和第6个月再次检测HIV抗体,观察是否有抗体的阳转。(三)接触高危传染病样品的人员,应及时做好消毒隔离工作,一旦有可疑症状出现应及时报告。并及时隔离治疗。五、防止实验室工作人员意外感染的措施(一)加强实验室工作人员个人防护装备:如口罩、帽子、防护面罩或防护眼罩及乳胶手套等。乳胶手套应及时更换;如果进行可能的溅洒操作时,应穿防水隔离衣。勤洗手,尤其是在更换手套前后洗手非常重要。(二)强化实验室安全管理1、在实验室区域禁止以下与实验室无关的活动:抽烟、吃东西、喝水、涂抹口红及涂抹化妆品、漱洗打扮。2、实验室工作人员应将所有病人血液标本视为含有潜在感染性的病原体,如乙肝138、丙肝和HIV。3、从事任何实验室操作时必须穿着实验室白大衣,且在离开实验室必须脱去,被微生物、血液、化学物品或其它可疑感染物质污染的白大衣应及时更换。4、在接触任何标本及从事任何实验室操作时必须戴手套。被血液或其它可疑感染物质污染的手套应及时更换。5、禁止口吸吸管和滴管,必须使用吸管球操作吸管和滴管,或使用加样器或一次性滴管。6、所有标本管必须是有盖的密封容器,如负压静脉采血管。收集标本完毕盖紧盖子。标本在运输过程中应使用专门运输容器内如有盖的塑料盒。运送过程中防止遗撒。7、标本管和可能存在潜在病原体内容物的试管在离心时必须加盖。8、所有利器,如使用后的针头、破碎玻璃器皿应妥善保管在防剌、扎139、的硬质塑料盒(桶)内。9、标本保存容器、冰箱也必须帖上生物危险标签。10、实验室所有污染物和废弃物均应置于套有黄色塑料袋的桶内。污染物和废弃物桶应贴上生物危险标签。针对危害因子的应急预案和演练1建立意外事件应急处置系统和预案有文件2意外事件应急预案每年培训或演练有培训有演练记录3实验室内有紧急撤离路线图且合理有紧急撤离路线图紧急撤离路线合理附录1 急救急救是指在事故发生的时间和地点熟练运用医学处理原则。在被急救者得到医生的最终治疗以前,急救是处理意外事件的一种公认的方法。 急救装备至少应包括一个急救箱,急救人员所需要的防护服和安全设施以及洗眼设备。急救箱急救箱从结构上应能防尘防湿。急救箱应置于140、显著位置并易于识别。根据国际惯例,急救箱用绿色背景下的白+字来加以标识。 急救箱内应装有下列物品: 1.一般性指南的说明书 2.单独包装的不同尺寸无菌包扎敷料 3.带有绷带的无菌眼垫 4.三角绷带 5.无菌创伤敷料 6.安全别针 7.可选择的无菌的非医用的创伤敷料 8.权威性的急救手册,如国际红+字会出版的急救手册。参与急救人员的防护装备包括: 1.用于口对口复苏术的接口管 2.用于防止接触血液的手套和其他屏障性防护物品,以及血液溢出处理的清洁盒3.应常备眼部清洗设备且训练工作人员能够正确使用。附录2实验室设置1.实验室设置设计图附录3实验室生物安全设施及用品使用说明生物安全设施序号设备适用存141、放保管1实验室高压灭菌器符合实验室工作量需求高致病性标本及污染物的高压灭菌负压实验室 侯远沛高压灭菌器操作人员持证上岗科室培训:王双、侯远沛高压灭菌器合格及性能检测报告设备科高压灭菌器定期检查灭菌效果制度和检测记录附表2生物安全柜微生物标本接种和产生气溶胶操作需在生物安全柜微生物接种等操作处侯远沛3生物安全柜产生气溶胶操作PCR工作处钱秀梅生物安全柜每年进行认证附表4电子灭菌器灭菌微生物接种等操作处侯远沛5实验室移动紫外灯台面、空气消毒各部门各部门6微波炉检验单消毒细菌室侯远沛7紫外消毒柜检验单消毒生化室闫家微8洗眼装置洗眼Aids,pcr,负压室,分拣室各部门内9空气消毒机空气消毒Pcr,细142、菌室各部门内10超净工作台标本处理室标本处理室司红伟11感应水龙头洗涤各部门各部门内12急救包紧急损伤各部门各部门内个体防护装备1乳胶手套、口罩、帽子、隔离衣、护目镜个体防护各部门内各部门2专用工作服实验室防护Pcr,负压,细菌,分拣各部门3门诊采血防护套装病人防护标本采集室司红伟附4废弃物处理流程图各部门医疗废弃物由操作人员按性质分类存放普通废弃物感染性废弃物尖锐器物黑色垃圾袋黄色垃圾袋尖锐器物桶交由收集人员运送,并按量记录签字废弃物处理登记本普通处理送焚烧炉处理,交接签字签字本附5菌毒株及高致病标本培养物处理流程图各部门菌毒株和高致病标本、培养物由操作人员按性质分类存放收集普通菌毒、污染耗143、材高致病物污染器材高致病菌及培养物、耗材投入消毒液桶浸泡高压灭菌后保存高压灭菌运出实验室交由收集人员运送,并按量记录签字高致病处理登记本普通处理送焚烧炉处理,交接签字签字本收集人员附6生物安全实验室/BSL2负压状态基本结构平面图人员流进出路线图污染区缓冲间更衣室公共清洁区进入退出清洁区机械联动传递窗污染区物品进出路线图附7紧急撤离路线图附8实验操作自查方式实验操作1食品或与实验无关的个人物品储存在实验室外无个人物品储存2实验用微波炉不得用于处理食品,仅供实验使用微波炉仅供实验使用3实验室冰箱不得存放食物和个人物品冰箱无食品4实验室内不能进食、饮水、吸烟和/或化妆无进食、饮水、吸烟和/或化妆 144、5禁止用嘴吸液无用嘴吸液现象6生物样本采集符合国家有关规定和技术标准样本采集手册样本采集操作7样本采集有完整的记录(来源、时间、采集人等)有样本申请单8样本运送符合生物安全防护要求样本运送工具符合要求运送方式正确9临床实验室不得从事高致病性病原微生物相关实验活动10高致病的血液等标本(如艾滋、梅毒)按规定保管和销毁有记录11二级以上致病因子标本等不得运离实验室,如特殊需要应按照核准的运输规定采用核准的容器将感染性标本运出实验室需要许可证12实验室保存菌(毒)种和生物样本符合国家相关规定有保藏菌(毒)种和生物样本的文件 13实验室指定专人负责菌(毒)种的保存,双人双锁,并建立名录清单双人双锁 有145、名录清单 14实验室建立菌(毒)种和生物样本的销毁制度,并有记录有销毁制度有销毁记录15明确规定实验范围,不从事超范围实验活动实验活动符合生物安全等级附9记录表格表格名称存放地点保管责任人记录人紫外灯检测维护记录84检测记录高致病标本(如艾滋、梅毒)保管和销毁记录相关部门相关操作者高致病标本(如艾滋、梅毒)运送记录相关部门相关操作者菌(毒)种和生物样本的贮存和销毁记录相关部门相关操作者应急预案培训或演练记录档案室成松成松实验室废弃物处理记录门诊司红伟操作者实验室废弃物交接记录门诊司红伟操作者实验室消毒记录本相关部门相关操作者实验室防护用品领取使用记录相关部门相关操作者生物安全设施使用维护记录相146、关部门相关操作者紫外消毒灯检测记录日期检测结果评价检测人审核人维护情况记录消毒剂检测记录日期结果签名日期结果签名日期结果签名日期结果签名检验科生物安全实验室准入登记进入时间姓名身份简述有无培训进入理由离开时间接待人批准人备案检验科一次性防护用品领取发放记录领取发放领取日期领取品种规格数量领取人保存发放日期发放部门领取人备注检验科生物安全柜使用维护记录部门 型号时间使用状况签字时间使用状况签字时间使用状况签字循环空气消毒机使用维护登记表部门 型号时间使用状况签字时间使用状况签字时间使用状况签字高压消毒锅使用维护记录部门 型号时间使用状况维护责任人签名高致病标本保管和销毁记录保存记录时间编号学名株147、名来源特性用途批号数量保存处传代冻干分发其它保管1保管2部门负责科主任销毁记录时间编号学名株名来源特性用途批号数量保存处销毁原因时间地点方式后果保管1保管2部门负责科主任保存记录时间编号学名株名来源特性用途批号数量保存处传代冻干分发其它保管1保管2部门负责科主任销毁记录时间编号学名株名来源特性用途批号数量保存处销毁原因时间地点方式后果保管1保管2部门负责科主任标本外送审批登记时间编号学名株名来源特性用途批号数量保存处外送原因时间外送方式外送资质接收方式接收资质法人审批生物安全负责人部门主管保管1保管2送达情况反馈标本外送审批登记时间编号学名株名来源特性用途批号数量保存处外送原因时间外送方式外送资质接收方式接收资质法人审批生物安全负责人部门主管保管1保管2送达情况反馈标本外送审批登记时间编号学名株名来源特性用途批号数量保存处外送原因时间外送方式外送资质接收方式接收资质法人审批生物安全负责人部门主管保管1保管2送达情况反馈