1、乙肝病毒载体平台及基因治疗根治乙肝坚持在生物制药行业差异化发展。坚持在生物制药行业差异化发展。从从企企业业发发展展的的角角度度出出发发，聚聚焦焦常常见见重重大大疾疾病病领域，满足未满足患者需求。领域，满足未满足患者需求。目标：大量患者和其家庭、社会受益、企业目标：大量患者和其家庭、社会受益、企业 获得发展。获得发展。1.原创新药研发要满足患者需求2.庄辉院士：我国肝病领域未被满足的患者需求20192019年，乙肝表面抗原年，乙肝表面抗原(HBsAg)(HBsAg)流行率为流行率为7.8%7.8%，慢性乙，慢性乙肝病毒感染者约肝病毒感染者约1 1亿例亿例;丙肝患者约丙肝患者约849849万例，估2、计丁肝万例，估计丁肝患者约患者约10001000万例、戊肝患者为万例、戊肝患者为380.34/10380.34/10万。万。我国我国NAFLDNAFLD的流行率为的流行率为17.2%17.2%，到，到20302030年将增至年将增至3.1463.146亿亿例例;酒精性肝病的流行率为酒精性肝病的流行率为5%5%7.5%;7.5%;药物性肝损伤发病药物性肝损伤发病率为率为23.8/1023.8/10万。万。我国每年新发肝癌我国每年新发肝癌4141万例，占全球万例，占全球45%;45%;每年肝癌死亡每年肝癌死亡3939万例，占全球万例，占全球47%47%。3.慢性乙肝只能功能性治愈20152015至3、至20302030年间，估计共约一千万人会因与慢性肝年间，估计共约一千万人会因与慢性肝炎相关的肝硬化、肝癌死亡，炎相关的肝硬化、肝癌死亡，80%80%的肝癌均由乙肝感的肝癌均由乙肝感染导致。染导致。控制了乙肝病情也就控制了很大一部分导致肝癌的控制了乙肝病情也就控制了很大一部分导致肝癌的可能。可能。健康中国健康中国20302030规划纲要规划纲要提出肝癌患者提出肝癌患者5 5年生存率年生存率从从12.1%12.1%提升至提升至15%15%：1010年只提高年只提高3%3%。行业痛点：慢性乙肝只能功能性治愈，不能根治。：慢性乙肝只能功能性治愈，不能根治。乙肝病毒乙肝病毒颗粒颗粒HBVHBV4.基因4、治疗治愈乙肝的时代来临乙肝病毒的复制和人基因组复制有很大的不同乙肝病毒的复制和人基因组复制有很大的不同20202020年年Crispr/Cas9Crispr/Cas9获诺奖技术，为靶向清除获诺奖技术，为靶向清除cccDNAcccDNA，治愈乙肝提供了技术准备，指明了前进的方向。治愈乙肝提供了技术准备，指明了前进的方向。Michael Nassal Gut 2015;64:1972-1984Copyright BMJ Publishing Group Ltd&British Society of Gastroenterology.All rights reserved.5.传统乙肝药物设计不以c5、ccDNA为靶点A:A:靶向靶向DNADNA修饰因子；修饰因子；B1B1：阻止病毒颗粒进入细胞：阻止病毒颗粒进入细胞B2:B2:阻止阻止RC-DNARC-DNA进入细胞核；进入细胞核；C:C:抗抗HBxHBx作用作用D:D:免疫介导的免疫介导的DNADNA降解；降解；E E：基因修饰：基因修饰:核酸酶降解核酸酶降解cccDNAcccDNA细胞质细胞质细胞外细胞外DNA/RNADNA/RNA水平抑制水平抑制基因治疗直接基因治疗直接清除清除cccDNAcccDNA?6.治愈乙肝的基因治疗尝试 基因载体侵染效率低：广谱性基因基因载体侵染效率低：广谱性基因载体：裸载体：裸DNADNA、纳米颗粒、纳米颗6、粒、AAVAAV病毒病毒等，嗜肝性有限。等，嗜肝性有限。缺乏安全有效缺乏安全有效DNADNA编辑工具：人类编辑工具：人类基因组有基因组有3232亿碱基对，需识别亿碱基对，需识别1717个个碱基对（碱基对（4 416 16=4343亿）才能保证不脱亿）才能保证不脱靶，不切割人基因组序列。靶，不切割人基因组序列。锌指核酸酶（锌指核酸酶（ZFNs)ZFNs)、类转录激活、类转录激活因子效应核酸酶因子效应核酸酶(TALENs)(TALENs)等模块等模块化化+核酸酶核酸酶FokFok靶向靶向DNADNA技术，体积技术，体积超过了载体包装能力。超过了载体包装能力。核酸酶+DNA靶序列识别模块化Beam 7、Therapeutics Presents First In Vivo Data Demonstrating Potential of Multiplex Base Editing Approach to Target Disease Drivers of Chronic Hepatitis B Infection.Retrieved 09/19/2022 from https:/ Therapeutics 于于2018年年5月成立，月成立，创始人为创始人为 、XXXX 三位基因编辑领域大三位基因编辑领域大牛牛Beam TherapeuticsBeam Therapeutics开发的开发的Cr8、isprCrispr靶靶向乙肝病毒多重碱基编辑平台向乙肝病毒多重碱基编辑平台,可显可显著减少乙肝病毒（著减少乙肝病毒（HBVHBV）表面抗原）表面抗原（HBsAgHBsAg）等病毒生物标志物水平，）等病毒生物标志物水平，具潜力成为治愈乙肝的新疗法。具潜力成为治愈乙肝的新疗法。研究数据发表在研究数据发表在20222022年年9 9月的国际乙月的国际乙型肝炎病毒会议上。型肝炎病毒会议上。乙肝病乙肝病毒基因毒基因和转录和转录 8.乙肝病毒基因治疗载体 Crispr系统靶向切除乙肝病毒A.A.乙肝病毒基因治疗载体优势乙肝病毒基因治疗载体优势 嗜肝性，天然的基因治疗肝病载体。嗜肝性，天然的基因治疗肝病载9、体。可以重复感染肝细胞可以重复感染肝细胞 Crispr/CasCrispr/Cas识别识别和切割双链和切割双链DNADNA4 41616=43=43亿亿4 41717=171=171亿亿B.B.Crispr/CasCrispr/Cas基因编辑基因编辑编码编码Cas9Cas9的基因可包装在乙肝病毒的基因可包装在乙肝病毒颗粒内颗粒内2020个碱基的向导个碱基的向导gRNAgRNA、PAMPAM引导切引导切割病毒割病毒cccDNA,cccDNA,特异性强。特异性强。A.A.对急性乙肝的效果对急性乙肝的效果a)a)减少减少cccDNAcccDNA直接降低病毒直接降低病毒mRNAmRNA和蛋白质的产量，10、减轻对和蛋白质的产量，减轻对肝的急性伤害；肝的急性伤害；b)b)降低病毒颗粒释放数量、降低传染能力。降低病毒颗粒释放数量、降低传染能力。9.基因治疗机制:对急、慢性乙肝有效B.B.对慢性乙肝的效果对慢性乙肝的效果a)a)乙肝乙肝cccDNAcccDNA无法无法De NoveDe Nove补充，在细胞核中逐步消失。补充，在细胞核中逐步消失。b)b)结合现有功能性治疗乙肝药物，彻底治愈乙肝。结合现有功能性治疗乙肝药物，彻底治愈乙肝。内切环状乙肝内切环状乙肝cccDNAcccDNA成成2 2个线性片段，不再转录产生病毒个线性片段，不再转录产生病毒mRNAmRNA；无端粒不能稳定存在，在肝细胞核中降解11、，消失。；无端粒不能稳定存在，在肝细胞核中降解，消失。cas cut double stranded DNADoench 2014,最大800aa常识：病毒感染后会产生体液（抗体）和细胞免疫常识：病毒感染后会产生体液（抗体）和细胞免疫 =不会发生再次感染，免疫力不够，病毒依然会在不会发生再次感染，免疫力不够，病毒依然会在体液内存在，再次感染也会发生，如现有的新肺冠体液内存在，再次感染也会发生，如现有的新肺冠病毒疫苗。病毒疫苗。已受感染肝细胞，表面病毒受体依然存在，病毒和已受感染肝细胞，表面病毒受体依然存在，病毒和细胞受体结合服从物理化学规律，再次进入细胞自细胞受体结合服从物理化学规律，再次进入12、细胞自然发生。然发生。可用不同亚型的乙肝病毒，其抗体并没有交叉免疫可用不同亚型的乙肝病毒，其抗体并没有交叉免疫力。力。10.病毒不能再进入已感染细胞的常识a)a)许多肝脏遗传性和获得性疾病的分许多肝脏遗传性和获得性疾病的分子机理得到阐明，必将进入基因治子机理得到阐明，必将进入基因治疗的时代。疗的时代。b)b)急需嗜肝性基因治疗载体平台。急需嗜肝性基因治疗载体平台。c)c)乙肝病毒基因载体：天然的肝脏基乙肝病毒基因载体：天然的肝脏基因治疗载体，对肝脏基因传递特异因治疗载体，对肝脏基因传递特异性强、效率高。性强、效率高。d)d)没有致病性、免疫原性的问题：存没有致病性、免疫原性的问题：存在有效的急13、性乙肝治疗技术和药物在有效的急性乙肝治疗技术和药物 11.肝病基因治疗载体-平台技术肝炎的分类有甲乙丙丁五种有甲乙丙丁五种肝病毒，可以重肝病毒，可以重叠感染。叠感染。药物性肝炎药物性肝炎酒精肝酒精肝脂肪肝，国内有脂肪肝，国内有1 1亿两千万患者。亿两千万患者。12.创业创新团队，1994年获得康斯坦茨大学硕士学位，1998年获得科隆大学分子遗传学博士学位，1999年至2004年3月在海德堡大学和哥廷根大学医学院进行博士后研究。2004年回国。XX，国家千人计划专家，以色列特拉维夫大学医学院生理学博士，在美国斯坦福大学等著名机构工作12年，于2011年创立了浙江赛尚医药科技有限公司。XX，武汉大14、学博士，2007年至2013年期间在美国进行访问学者和博士后研究，中国医学科学院输血研究所副教授，公司股东，监事。XX，2010 至 2014在巴黎第七大学留学,获心血管病理博士，中国医学科学院输血研究所助理研究员。XX，中国科学院管理学博士，拟担任苏州公司运营副总；将负责苏州公司战略 规划、财会等方面工作。XX，德国哈勒-维腾贝格大学药剂学博士，清华大学医学院博士后，江苏师范大学副教授。I.融资 乙肝基因治疗管线拟融资乙肝基因治疗管线拟融资30003000万人民币，出让万人民币，出让10%10%的股份。的股份。II.融资用途设立公司研发基地，建设研发团队，两年完成设立公司研发基地，建设研发团15、队，两年完成动物实验，开始临床。动物实验，开始临床。13.融资需求国内市场Global prevalence of HBV infection世界卫生组织2019年公布慢性乙肝区域流行区域 热点区域热点区域占人口的比例（占人口的比例（%）慢性乙肝人数慢性乙肝人数西太平洋区域西太平洋区域6.21.15亿亿非洲区域非洲区域6.16000万万东地中海区域东地中海区域3.32100万万东南亚区域东南亚区域2 3900万万欧洲区域欧洲区域 1.61500万万美洲区域美洲区域0.7700万万据不完全统计据不完全统计,我国现有的乙肝病毒携带者我国现有的乙肝病毒携带者,大大约在八千万到一亿左右，每年新增慢性乙16、肝患约在八千万到一亿左右，每年新增慢性乙肝患者人数不详。者人数不详。若以若以1 1亿患者计，亿患者计，50%50%的乙肝病毒携带者进行基的乙肝病毒携带者进行基因治疗，每例费用因治疗，每例费用5 5万元￥，盈利万元￥，盈利1 1万元￥，总万元￥，总的市场价值的市场价值2.52.5万亿￥，总盈利约万亿￥，总盈利约5 5千亿￥。千亿￥。14.治愈乙肝的市场价值国际市场WHOWHO估计，估计，20192019年有年有2.962.96亿人患有慢性亿人患有慢性乙肝感染（乙肝感染（HBsAgHBsAg阳性），导致约阳性），导致约8282万万人死亡；人死亡；20192019年约年约150150万人新感染乙型肝17、炎万人新感染乙型肝炎。假如假如50%50%的慢性乙肝患者进行基因治疗的慢性乙肝患者进行基因治疗治愈，每例费用治愈，每例费用5 5万元￥，盈利万元￥，盈利1 1万元万元￥，则总的市场价值约￥，则总的市场价值约7.47.4万亿￥，总万亿￥，总盈利约盈利约1.481.48万亿￥。万亿￥。a)a)原创新药原创新药 基因治疗用于治疗传染病，基因治疗用于治疗传染病，Crispr/Cas9Crispr/Cas9靶靶向精准切割乙肝病毒向精准切割乙肝病毒DNADNA，安全性高。安全性高。乙肝病毒作为载体嗜肝性强，副作用低。乙肝病毒作为载体嗜肝性强，副作用低。线性线性DNADNA从核内逐步降解消失的机制从核内逐步降解消失的机制b)b)属于非个体化药物，患者负担费用低。属于非个体化药物，患者负担费用低。c)c)可作为企业肝基因治疗平台，相比其它通用型可作为企业肝基因治疗平台，相比其它通用型载体，肝特异性是差异化基因治疗发展路径。载体，肝特异性是差异化基因治疗发展路径。总结谢谢！谢谢！希望本原创基因治疗技术和生物药为千万乙肝病毒携带者带来治愈的希望，开始美好的新生活。