1、血清或血浆样本雌二醇浓度化学发光微粒子免疫检测作业指导书编 制： 审 核： 批 准： 版 本 号: ESZAQDGF001 编 制： 审 核: 批 准： 发 布： 二XX年X月雌二醇检测作业指导书1.目的检测人血清或血浆样本中雌二醇（E2)的浓度，作临床辅助诊断用。2.检测原理采用Chemiflex的化学发光微粒子免疫检测（CMIA）技术，对人血清，血浆中雌二醇进行定量测定。第一步，将样本、样本稀释液和雌二醇抗体（兔，单克隆）包被的顺磁微粒子混合。样本中的雌二醇与雌二醇抗体包被的微粒子结合，孵育后，将吖啶酯标记的雌二醇结合物添加至反应混合物中。进一步孵育和冲洗后，向反应混合物中添加预激发液和激2、发液。对产生的化学发光反应物进行测量，以相对光单位（RLUs）表示。样品中的雌二醇含量与ARCHITECT i光学系统检测到的RLUs值成反比。3.样本的采集和贮存3.1 ARCHITECT雌二醇项目可以使用人血清（包括采集于血清分离管中的血清）或采集于肝素锂（包括血浆分离管）或EDTA钾抗凝管中的血浆。3.2标本溶血超过+以上的情况下退单。3.3稳定性： 2-8可稳定7天3.4样本贮存：2-8保存10天4.试剂和仪器4.1试剂成分：4.1.1检测试剂盒 ARCHITECT孕酮测定试剂盒（7K72）微粒子：1瓶或4瓶（9.9ml）雌二醇抗体（兔，单克隆）包被的微粒子,储存于含有蛋白（兔）稳定剂3、 的TRIS/BIS TRIS缓冲液中。最低浓度：0.0657%固体。防腐剂：ProClin。结合物：1瓶（5.9ml）吖啶酯标记的雌二醇结合物,储存于含有表面活性剂稳定剂的柠檬酸盐缓冲液中。最低浓度：63.36ng/mL。防腐剂：ProClin4.1.2项目稀释液 1瓶或4瓶（5.9ML）雌二醇项目稀释液，含有表面活性剂，储存于柠檬酸盐缓冲液中。防腐剂：ProClin。4.1.3样本稀释液 1瓶或4瓶（10.0ML）雌二醇样本稀释液，储存于含有蛋白（牛）稳定剂的TRIS缓冲液中。防腐剂：叠氮钠。 注意：仅供体外诊断使用；避免皮肤直接接触液体试剂；废弃物按生物危害垃圾处理。4.2试剂准备 ：液4、体，即开即用，无需特殊准备。4.3试剂贮藏要求 ： 未打开的试剂盒：2-8储存有效期内稳定。 分析仪上冷藏稳定性: 30天4.4仪器使用xxI2000SR化学发光仪5.安全防范操作时必须穿戴手套和工作服；工作后的台面应消毒擦洗；用过的加样枪头等耗材应作为医用垃圾处理；为了避免形成气溶胶，所有样品尽可能不要在空气当中暴露太长时间；遇到样本洒出，被污染的区域应立即用次氯酸钠溶液清洗，擦拭用的物品应丢弃在标有生物污染的垃圾筒中。6.项目校准61校准品：雌二醇校准品。按照指导储存和操作时，ARCHITECT雌二醇校准品在效期内保持稳定。不能使用过期产品。校准品必须密封避光保存。有效期：2-8，10个月5、。使用说明：校准品从2-8取出后即可使用。每次使用前，轻轻颠倒混匀。每次使用后，盖紧瓶盖将试剂瓶放于盒中避光保存并将校准品放回2-8储存。 62 当下列任何一种情况存在时，请重新校准： 试剂批号改变进行六点定标； 根据质控需要进行六点定标。6.3 校准步骤6.3.1校准品的准备：从2-8冰箱中取出雌二醇校准品，颠倒混匀后将校准品滴入日立杯中（500微升）放置五分钟到室温。6.3.2在仪器界面点击申请，选择校准申请，输入架子号，选择雌二醇项目，点击添加申请，按照指定位置放置校准品。6.3.3放入样品架，仪器开始定标。6.3.4查看定标结果：在仪器界面点击质控-校准，选择校准历史，查看定标结果。66、.3.5校准原始结果的记录：每天校准过的项目打印出来，保存在定标记录文件夹中。6.3.6测定定值质控品或常规使用质控品，看结果是否在允许范围内。7.质量控制具体操作步骤及要求详见生化/发光室内质控作业指导书。在报告试验结果之前，应评估质控结果是否失控。只有在质控结果验证在可接受范围时才可报告临床试验结果。 8.溯源性本检测方法已按照Abbott Internal Reference Standard推荐的方法校准标准化。9.操作步骤 具体操作步骤内容详见xxi2000SR自动分析仪操作、维护程序10.单位换算浓度（pg/mL)（3.67）=pmol/L浓度（pg/mL)（0.00367）=nm7、ol/L11.性能指标科室验证性能指标见方法学验证文件夹12.生物参考区间女黄体期：77.1-1145pmol/L女绝经期：0-102.8pmol/L 接受激素替代疗法的绝经期女性,0-528.5pmol/L 13.干扰物质 胆红素,干扰物质浓度:20,干扰物质单位:mg/dL,影响程度:10% 甘油三酯,干扰物质浓度:1000,干扰物质单位:mg/dL,影响程度:10% 血红蛋白,干扰物质浓度:500,干扰物质单位:mg/dL,影响程度:10% 胆固醇，干扰物质浓度:240,干扰物质单位:mg/dL,影响程度:10% 14.最大允许误差及最小检测差异雌二醇（E2)的最大允许误差为：25%；最8、小检测差异为：15.0pg/ml；最低检测临界值为：60.0pg/ml。【25%(60.0pg/ml）；15.0pg/ml(60.0pg/ml）】15.临床意义测定雌二醇对青春前女性内分泌疾病的诊断，对闭经、月经紊乱、卵巢功能评估有重要意义，是研究生殖生理与诊断不孕的重要的手段。 1雌二醇增高常见于女性性早熟、男性乳房发育、妊娠（尤其双胎或多胎）、雌激素分泌瘤、促排卵药物（如氯来芬）、男性女性化、卵巢肿瘤、无排卵性子宫功能出血和肝硬化等。2雌二醇减低常见于卵巢肿瘤、葡萄胎、宫内死胎、妊娠高血压综合征、下丘脑肿瘤、腺垂体功能减低、卵巢功能不全、卵巢切除、青春期延迟、原发性和继发性闭经、绝经、口服9、避孕药等。3、雌二醇值增高的病理原因 1）卵巢疾患：卵巢颗粒层细胞瘤、卵巢胚瘤、卵巢脂肪样细胞瘤、性激素生成瘤等，均表现卵巢功能亢进，雌二醇分泌量增加。2）心脏病：心肌梗塞、心绞痛、冠状动脉狭窄。3）其它：系统性红斑狼疮、肝硬化、男性肥胖症。4、雌二醇降低的病理原因 1）卵巢疾病：卵巢缺如或发育低下，原发性卵巢衰竭、卵巢囊肿。2）垂体性闭经或不孕。3 ）其它：甲低或甲亢、柯兴氏综合征、阿狄森氏病、恶性肿瘤、较大范围的感染、肾功能不全、脑及垂体的局灶性病变等，均可使血浆雌二醇降低。 16.文档历史17.参考文献1、雌二醇测定试剂盒（化学发光微粒子免疫检测法）说明书2、雌二醇校准品说明书3. xxi2000SR自动分析仪操作、维护程序