1、微生物实验室、废弃物处理细菌室质量管理制度编 制： 审 核： 批 准： 版 本 号: ESZAQDGF001 编 制： 审 核： 批 准： 版 本 号: 细菌室内务管理制度1）实验人员要有强烈的时间观念，按时上下班，不迟到、早退。2）进入实验室的工作人员必须遵守实验室的单一流向的规定，禁止逆向走动。3）非本室工作人员未经允许不得进入实验室。4）实验人员必须熟悉仪器性能方允许操作，严格遵守操作程序。5）注意保持仪器卫生整洁，严禁在室内抽烟，吃零食，非仪器操作人应尽量少入。6）每天了解仪器运转情况及化学试剂使用情况，负责仪器的整洁和安全，检查电源、水龙头等。 7）节假日应指定人员负责实验室的仪器、2、设备的维护和保养。标本采集运输制度 向实验室提交样品的所有场所都应接受实验人员的指导和指令。运送时严防对人员、环境的污染。无论在室内或室外运输，均应按照有关传染性物品安全运输的规定，将样品放在可靠、安全、防漏的容器中运输。微生物实验室安全防护制度1. 必须严格执行中华人民共和国传染病防治法及实施办法和相关法律中对传染病菌、毒种的使用、保藏、运输等具体规定.2. 实验室用各种菌种及其培养基等必须妥善地放在规定的容器内,放置菌种的专门菌库指派专人保管.保管人须按不同菌种分类存放,容器上标明细菌种类、编号、并做好使用记录.3. 菌种管理人员和实验操作人员作业时必须穿戴好工作服、手套、口罩等防护用品等3、,避免皮肤直接接触细菌及其培养基、液体等.操作完毕应立即用肥皂或消毒液洗手.4. 操作必须十分谨慎,减少细菌等病原体向容器繁衍.用过的器皿、隔离衣及无菌服等防护用品应及时消毒、清洗.5. 携带病原材料出入实验室时,要将病原材放在密闭不漏水的容器内,用冰壶或塑料桶携带.6. 细菌室废弃物和实验室中已被细菌污染的物品应按医院及科室的相关规定及时消毒处理,不得随意丢弃.污水排放应符合国家有关规定.7. 严格在实验室和有细菌繁殖的场所休息、饮食、吸烟,杜绝食物与细菌接触.8. 实验室内一定要采用湿式扫除.针对不同菌种,实验室定期消毒灭菌,保持洁净的工作、实验环境.废弃物处理制度1. 生物废物是指经实验4、分析后被丢弃的含有已知或未知的微生物材料。健康体检者的检验材料即使证明无污染也不应作为生活垃圾丢弃。2. 实验室中一次性使用的污染材料可高压灭菌后焚烧或直接焚烧；可反复利用的已被污染的材料应选择先消毒再高压灭菌或直接高压来菌。灭菌后的材料经洗涤、干燥、包扎、再灭菌后使用，不提倡用干热法处理生物废物，用微波、紫外线、离子辐射等方法处理也不合适。3. 每个实验室的工作台上或角落中应有盛放实验废弃材料的防漏容器。根据需要，有的容器中含规定浓度的新鲜配制的消毒液（如次氯酸钠、石碳酸复合物、表面活性剂等），将需要消毒的物品作用一段时间后再放入转送容器中，送去高压灭菌或焚烧。盛放生物废物的容器应加盖、防渗5、可消毒、可清洗。4. 禁止用手对任何利器进行折弯、剪断、折断、重新戴套或直接从注射器上取下针头。用过的针头和其他污染锐器如刀片、破碎的玻璃等物品应集中放在一个带盖的耐扎容器中，等容器装满三分之二时，应先高压再焚烧或直接焚烧。含利器的容器不该作为生活垃圾掩埋。注射器的针头不应从丢弃的注射器上取下后再次使用。废弃物处理的操作规程1.操作感染性或任何有潜在危害的废物时，必须穿戴手套和防护服。2.对有多种成份混和的医学废料，应按危害等级较高者处理。3.处理含有锐利物品的感染性废料时应使用防刺破手套。高压灭菌炉使用维护操作规程 一.高压灭菌炉使用1. 先排污水.2. 向槽内灌入约2800ml蒸馏水浸过6、电热管.3. 放入需灭菌物品,关炉门.4. 插电源,按开关,按温度显示1210C,调定30分钟,消毒开始.5. 结束,指示灯指示结束,温度隆至950C.6. 拔电源,开炉门排气.二. 高压灭菌炉维护1 每天清洁处密封圈，清洁机身外部，清洁机身内部。2 每星期清洁消毒内胆，清洁托盘和支架，清洁并消毒机身外部。3 每月用硅油或类似润滑剂润滑铰链，铰链销和关门处装置。4 每2个月保养安全阀。5 每3个月或每500次消毒后更换滤菌器。6 每年由售后服务专业人员进行全面保养。7 每2年更换密封圈。标本采集运输制度常见微生物标本采集方法一、 基本原则1、 发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查，二、三级7、医院微生物标本送检率不应低于70%。2、 尽量在抗菌药物使用前采集标本。3、 标本采集时应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。4、 标本采集后应立即送至实验室。床边接种可提高病原菌检出率。5、 以棉拭子采集的标本如咽拭、肛拭或伤口拭子，宜采用插入运送培养基送检。6、 混有正常菌群的标本如咳痰、尿液、伤口拭子，不可置肉汤培养基内送检。7、 盛标本容器须经灭菌处理，但不得使用消毒剂。8、 送检标本应注明来源和检验目的，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。二、 常见感染标本采集与送检方法（一）、血液及骨髓1、通常采血部位为肘静脉。疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉8、采血为宜，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。2、采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入血培养基前，应列换针头或过火消毒针头。3、每次采血量成人5-10ml，婴幼儿1-2ml，培养基与血液之比以101为宜，以稀释血液中的抗生素、抗体等杀菌物质。4、怀疑菌血症庆尽早采血，体温上升阶段采血可提高阳性率，但要防止因等待而延误时机。对已用抗菌药物而不能停药者，可在下次用药前采血。5、对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人，在病灶或者髂前（后）上棘处严格消毒后抽取骨髓1 ml作增菌培养。（二）、尿液1、中段尿：女性采样前应先用肥皂水或0.1%高锰酸钾溶液冲洗外阴部及阴部及尿道口；男性翻转包皮冲洗，用0.9、1%新洁尔灭消毒尿道口，灭菌纱布擦干后，收集标本。2、导尿管导尿采样可减少污染。对留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用联空针筒的细针斜穿管壁抽吸尿液；或拔去闭式引流的集尿袋，弃去导尿管前段尿液，留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。不可从集尿袋的下端管口留取标本。3、尿厌氧菌培养，或婴幼儿中段尿采集困难，或培养结果与病情不符时，可经耻骨上皮肤穿刺采集无污染的膀胱内尿液。4、送检标本以晨起第一次尿液为佳。5、室温下尿标本担搁稍久可致尿内细菌浓度明显增加而影响病原菌与污染菌的区分。不能立即送检者，可暂存4冰箱。（三）痰液1、咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽，从呼吸道深部咳出新鲜痰液于无菌容器送检。10、痰量极少者可用45 10%氯化钠溶液雾化吸入导痰。2、对咳嗽乏力或昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔或口腔抵达气管腔内吸引痰液。用纤维支气管镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌，但不能完全避免咽喉部正常菌群污染。3、双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插管患者，可用吸痰管经人工气道估插至叶支气管水平吸引痰液。4、对重症、难治，或伴免疫抑制，或疑似厌氧菌引起的医院内肺部感染，可采用环甲膜穿刺经气管吸引（TTA）、经胸壁穿刺肺吸引（LA）、经纤维支气管镜或人工气道作防污染双套管毛刷（PSB）或防污染支气管肺泡灌洗（PBAL）采集无口咽部菌群污染的痰液，进行精确的感染病原学诊断。5、痰标本不能及时送检11、者，可暂存4冰箱。室温下延搁数小时定植于口咽部的非致病菌呈过度生长而肺炎链球菌、葡萄球菌和流感嗜血杆菌检出率则明显下降。（四）脓汁或创面分泌物1、无菌生理盐水擦洗病灶表面后，用棉拭子采取病灶深部的脓液和分泌物，置运送培养基内送检。2、对未溃破的脓肿宜用碘酒、酒精消毒皮肤后，以无菌注射器抽取脓液送检；也可于切开排脓时用无菌棉拭采样。3、采样前病灶局部应避免用抗菌药物或消毒剂。（五）粪便1、排便后，挑取有脓血、粘液部分的粪便约2-3克（液状粪便则取絮状物），成盛于灭菌广口瓶或蜡纸盒送检。用棉拭挑取粪便插入Cary-Blair运送培养基或pH7.0的磷酸盐甘油中送检，可提高病原菌检出率。2、对为易获12、取粪便者或婴幼儿，可用直肠拭子（又称肛拭子）采集。将拭子前端用无菌甘油水湿润，然后插入肛门约4-5cm（幼儿约2-3cm）处，轻轻旋转擦取直肠表面粘液后退出，置运送培养基内送检。（六）咽拭、口腔拭子1、病人清水嗽口后，由检查者将其舌外拉使悬雍垂尽可能向外牵引，棉拭子越过舌根到咽后壁或悬雍垂的后侧，反复擦拭数次，插入运送培养基。棉拭子应避免触及舌、口腔粘膜和唾液。2、对化脓性扁桃体炎或口腔念珠菌病，用棉拭在病灶部位擦拭数次即可。（七）浆膜腔积液、脑积液1、浆膜腔积液包括胸水、腹水、心包液、关节液和鞘膜液等，以严格无菌操作抽取数亳升液体置无菌试管或小瓶送检。对易自凝的标本可添加抗凝剂。2、严格无菌13、操作下采取脑脊液数毫升于无菌试管。标本采集后应立即送检，以防细菌死亡。疑似有脑膜炎奈瑟菌时，应注意保暖，不可置冰箱保存。（八）生殖道标本1、根据不同感染种类和病变特征采集不同的标本。采集尿道标本时，先用生理盐水局部清洗，以无菌棉拭子插入尿道口1-2 cm停留十余秒钟，轻轻旋转拭子后退出。2、对外阴部糜烂、溃疡，生理盐水清洗后用棉拭擦取病灶边缘的分泌物。3、阴道和宫颈口分泌物须在窥阴器下用长棉拭采集。4、子宫内分泌物需用无菌导管抽取。导管外套一层保护膜，插入子宫后再刺穿该膜予负压吸引，可减少阴道菌群污染。5、女性盆腔脓肿，应在阴道局部消毒后，由直肠子宫陷凹处进针抽取。6、前列腺液需进行前列腺按摩14、获取。（九）组织标本1、表浅的感染组织和各种窦道标本可用棉签擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手术切除对窦道和瘘管应深部刮取，获得部分管壁组织。2、深部组织标本可经皮穿刺采集或手术切取。标本置无菌容器并加入少量生理盐水以保湿度，或置肉汤增菌液，或置血平皿内送检。3、尸检标本应于死后20h内采取，以防肠道等菌群侵入引起污染。4、作病原菌分离的组织标本，不可用福尔马林固定。疑有污染的较大组织块，可用烧红的烙铁烧灼其表面或置沸水中5-10秒钟使表面变白消除污染后，再用无菌器械切开组织，取中央部位组织送检。（十）静脉导管1、从病人体内拔出静脉插管，用无菌技术剪去导管体外部分。体内段导管立即置血琼脂平板上作滚动15、涂布接种。不能作床边接种者，将导管置含有少量生理盐水的无菌试管内送检。2、也可将剪下的导管体内段置肉汤增菌液或用于血培养的培养液内，但不能区分导管感染菌与少量的定植菌。三.标本运输向实验室提交样品的所有场所都应接受实验人员的指导和指令。运送时严防对人员、环境的污染。无论在室内或室外运输，均应按照有关传染性物品安全运输的规定，将样品放在可靠、安全、防漏的容器中运输。送检标本的前处理及检测中操作规程1.处理标本前必须消毒工作区.2.标本应封闭式运送到生物安全柜内或标本处理.3.任何标本操作均需在有合格证的生物安全柜内进行.暂无安全柜可指定在标本处理区内,但切不可开启排风装置,以减少细菌在空气中弥散16、.4.感染性材料的离心操作应使用安全的离心杯，或密封的离心机转子,使用完毕立即用1500mg/l有效氯表面消毒.5.所有的操作应降低气溶胶或泡沫的生成，这类操作应在生物安全柜内进行。6.禁止用嘴吸取液体，除了注射药物或从动物体内抽吸液体以外，尽量少使用注射器.7.工作结束后必须立即清洁消毒.8.发生液体溅出，溢出等事故时应立即向高年资人员报告，及时处理并对事故的发生与处理作记录。超净工作台操作与维护超净工作台1.目的规范净化工作台操作与维护工作，确保仪器正常运作。2.适用范围：本实验方法适用于微生物检验中净化工作台操作与维护管理。3.检验人员职责：负责此仪器操作和维护管理4.操作及维护规程4.17、1操作规程4.1.1使用工作台时，应提前50分钟开机，同时开启紫外杀菌灯，处理操作区内表面积累的微生物，30分钟后关闭杀菌灯（此时日光灯即开启），启动风机。4.1.2对新安装的或长期未使用的工作台，使用前必需对工作台和周围环镜先用超静真空吸尘器或用不产生纤维的工具进行清洁工作，再采用药物灭菌法或紫外线灭菌法进行灭菌处理。4.1.3操作区内不允许存放不必要的物品，保持工作区的洁净气流流型不受干扰。4.1.4操作区内尽量避免作用明显扰乱气流流型的动作。4.1.5操作区的使用温度不可以超过60。4.2维护规程及维护方法4.2.1根据环境的洁净程度，可定期（一般23个月）将粗滤布（涤纶无纺布）拆下清洗18、或给予更换。4.2.2定期（一般为一周）对环境周围进行灭菌工作，同时经常用纱布沾酒精或丙酮等有机溶剂将紫外线杀菌灯表面擦干净，保持表面清洁，否则会影响杀菌效果。4.2.3当加大风机电压已不能使风速达到0.32m/s时必须更换高效空气过滤器。4.2.4更换过滤器时，可打开顶盖，更换时应注意过滤器上的箭头标志，箭头指向即为层流气流向。4.2.5更换高效过滤器后，应用Y09-4型尘埃粒子计数器四周边框密封是否良好，调节风机电压，使操作区平均风速保持在0.32-0.48m/s范围内，再用Y09-4型尘埃粒子计数器检查洁净度。 ）温度失控处理措施温度失控处理措施1. 每天上班记录培养箱、冰箱的温度于温度19、记录本上，如发现普 通培养箱的温度超过37（不包括37）或低于34（不包括34）；冷藏冰箱的温度超过8（不包括8）或低于2（不包括2）；冷冻冰箱的温度不 超过-10（不包括-10）或低于-30（不包括-30），应立即追溯其失控的时间和原因。1.1如失控的原因可以马上纠正（如冰箱断电、冰箱门未关好、温控调节器未正确控制、冰箱严重结霜、温度计损坏等），则由本室人员马上纠正并填写失控报告。1.2如冰箱、培养箱本身出现机械故障，本室人员应马上通知维修部或维修商，同时根据排除故障时间的长短是否会对其中的物品质量造成影响而采取相应的措施（如把里面的物品转移到能满足需要条件的环境中），并填写失控报告单。2.20、培养箱中的培养物应全部拿到工作台，检查培养物的生长情况。2.1.如果培养基的菌落生长良好，则按常规程序进行检验。2.2如果培养基的菌落生长受抑制，则取标本重新接种，如标本确实无法再次接种，则应与临床医生联系、解释并请医生重新采集标本送检。2.3如有细菌生长，则应补做药敏试验，并填写迟发报告单记录表，并写明原因。3.故障处理过程中应及时贴上红色标识，并在温度记录本上用红笔记录失控的温度度数，故障处理后应利用培养箱、冰箱的温度调节器，把温度调回到规定范围的中值，并把专业人员的检查的结果记录在仪器档案袋中。另外还需填写内部质量控制失控报告单，当温度再次是失控时，再次记录温度的读数，并且上报负责人。细21、菌室操作技术规范1.细菌鉴定和药敏试验操作按全国临床检验操作规程。2.负责鉴定及签发报告的主管技术人员应通晓诊断细菌学的全面知识。3.从事细菌专业技术人员，应了解医院监测知识，掌握其检测方法，定期统计分析医院感染细菌分布，耐药变迁，并将其结果反馈临床。4.细菌室工作人员均应具备细菌传染、消毒、灭菌知识。5.细菌专业人员不断更新知识，了解细菌学检验新进展。6.定期或随时与临床联系，主动参与病例讨论了解病情及治疗情况，达到细菌检验与临床的密切联系。7.每天发出的微生物报告应认真复审，分析报告、评价报告。8.工作人员加强有无菌观念，无菌操作。 当工作环境被细菌污染，必须立即消毒处理，报告主管人员，采22、取必要措施。9.工作人员被细菌培养物污染应消毒处理，必要时给予药物治疗，并向主管负责人报告，采取特殊措施。 实验室安全管理制度及安全操作规程一 实验室安全管理制度1. 实验室安全管理小组负责实验室安全管理措施的宣传,并监督实施2. 小组组员负责随时检查制度执行情况3. 小组组员根据情况及时反应新问题,新要求4. 管理小组将每年进行一次巡回检查二.工作人员和实验室安全的要求1. 吸烟实验室工作区绝对禁止吸烟;点燃的香烟是易燃液体的潜在火种;香烟、雪茄或烟斗都是传染细菌和接触毒物的途径.2. 食物、饮料及其它实验工作区内不得有食物、饮料及存在“手口”接触可能的其它物质实验室工作区内的冰箱禁止存放食23、物.专用存放食物的冰箱应放置在允许进食、喝水的休息区内.3. 化妆品实验工作区内禁止使用化妆品进行化妆,但允许并建议经常洗手的实验人员使用护手霜.4. 眼睛和面部的防护处理腐蚀性或毒性物质时,须使用安全镜、面罩或其它保护眼睛和面部的防护用品工作人员在实验室的危险区不要佩戴隐形眼镜,除非同时使用目镜或面罩.使用、处理能够通过粘膜和皮肤感染的试剂,或有可能发生试剂溅溢的情况时,必须佩带护目镜、面罩或面具式呼吸器.5. 服装的个人防护装备应穿着符合实验室工作需要的服装,工作服应干净、整洁。当工作中有危险物喷溅到身上的可能时，应使用一次性塑料围裙或防渗外罩。有时还需要佩戴其它防护装备如：手套、护目镜、24、披肩或工作服。(2)采血员和其他需要接触病员的工作人员，在接触病员时需要穿实验服或工作服。(3)个人防护服装应定期更换以保持清洁，遇被危险物品严重污染，则应立即更换。(4)不得在实验室内设值班床，严禁在实验室内住宿。6. 鞋在工作区内，应穿舒适、防滑、并能保护整个脚面的鞋。在有可能发生液体溅溢的工作岗位、可加套一次性防渗漏鞋套。帆布鞋可吸收化学物品和有传染性的液体，所以最好穿好皮革或其它防渗漏的合成材料的鞋。7. 头发和饰物留长发的工作人员应将头发盘在脑后，以防止头发接触到被污染物和避免人体脱屑落入工作区。头发不得垂直，应与离心机、切片机等正在运转的器械保持一定距离。+8。胡须 蓄有胡须的男性25、工作人员必须遵守上项(7)的规定。9。洗手 实验室工作人员在脱下手套后、离开实验室前、接触患者前后、以及在进食或吸烟前都应该洗手.接触血液、休液或其它污染物时,应立即洗手.10.用口移液所有实验室操作禁止用口吸液,应使用助吸器.11.锐利物品 谨慎处理针头、解剖刀、和碎玻璃等锐利物品.使用后的针具不要折断、弯曲、破损、重复使用或用手重装在针管上.一次性注射器上的针头用后不要取下.锐利物品应立即放置在不易刺破的容器内,在完全装满之前就应及时丢弃.12.隔离措施接触患者时,实验室工作人员应遵守医院的隔离措施.13.工作环境清洁区和非清洁区 根据实验室的具体工作情况由主任选择并确定“清洁”和“非清洁26、”工作区,在清洁区和非清洁区之间设“缓冲室”. 被指定为“清洁”的区域,则应努力保持清洁,如采取预防措施,防止电话、视频显示器终端、键盘、门柄及其它经常被手或手上的手套触摸的物品的污染,要求工作人员在触摸设备(如计算机键盘及电话的保护罩等)前取下手套，制定仪器设备和工作面的常规消毒和清洁制度和对严重污染的紧急处理措施办法。被指定为“非清洁”的区域，允许戴手套接触所有物品(如电话、门柄、计算机终端和其它物品)，所有这些物品的表面都认为是不清洁的。未戴手套的人员如果使用该区域内的电话、计算机终端或其它设备，应该戴上手套，或在使用后立即彻底洗手。“清洁”和“非清洁”区都应保持整洁。实验台至少每天清洁27、消毒一次，如有必要可以多次清洁、消毒。在处理溅溢的样品或严重污染的工作时，应戴上手套和其它个人防护装备、使用相应合适的清洁剂清除所有的溅溢物。(2)冰箱、冷冻柜、水浴和离心机应该定期清洗和消毒(时间由实验主住来决定)，在发生严重污染后应立即进行清洗和消毒。进行清洗、消毒时要戴上手套,穿上工作服或其它合适的防护服。外衣:外衣(实验服、工作服和围裙)应悬挂在远离散热器、蒸汽管道、供暖装置、以及有明火的地方,不要持在压缩气瓶或灭火器上,也不要持在门的玻璃隔板上,妨碍视线.“清洁”的和“非清洁”的个人防护服要分开存放.垃圾处理:每天至少清理垃圾一次.装饰:不得在电灯、灯座或仪器上进行装饰,更不要使用28、电子装饰物、蜡烛、圣诞树等有引起火灾危险的装饰品.个人物品:实验工件区不得存放个人物品,如钱包、外套、皮靴、咖啡杯、运动服、预包装的食品的药品等.用后的废弃物品:实验工作区内的用后废弃物品存量不要太大.具危险性的液体如酸或碱性液体应放在视平线以下.较大的废弃物容器应靠近地面存放.出口通路:实验室的出口必须保持畅通无阻,不准堆放物品、垃圾、装置或设备.安全门必须保持畅通,不得堵塞.注意:无论任何时间、何种原因都不得阻塞通往灭火器、火警箱、防火毯、安全沐浴或出口的道路.14.玻璃器具 操作玻璃器具时应遵循下述安全规则:不使用破裂或有缺口的玻璃器具.不要用猛力取下玻璃管上的塞子,粘紧的试管可用刀切开29、分离.接触过传染性物的玻璃器具,清洗之前,应先行消毒.破裂的玻璃器具和玻璃碎片应丢弃在有专门标记的、单独的、不易刺破的容器里.高热操作玻璃器具时应戴隔热手套.15.离心机气溶胶:离心过程中应控制气溶胶的产生在最低水平.操作:离心机只有在盖好盖板后,才能启动.传染性物品:所有能够产生气溶胶进行播散的生物制品或标本,都应使用密封的离心管,并在盖紧的离心头或转头中进行.清洗:按照消毒隔离制度要求清洗离心机.平衡:离心时应保持合适的平衡,以保证离心的顺利进行.三.检验科防火安全制度1. 防火隐患的估计和研究 在开始临床实验工作之前就应对火灾的隐患进行研究,在实验工作运行的过程中,要经常研究火警的隐患.30、研究的内容包括:使用化学物品的数量和性质,可能发生的化学反应,以及电器设备的隐患等.哪些操作方法已经改变了,新使用了哪些化学物品,以及在上届消防培训之后增加了哪些新的工作人员.无人值班看守的自动控化实验操作. 源隐患 觉见的火源是明火、加热器件和电火花(电灯开关、电动机、磨擦和静电). 存放易燃气体的场所,应安装防爆灯具和开关,使用专门防爆设计的电器设备.应对电气设备的接地、漏电和墙上插座的接地、极性进行年度检查. 易燃性液体的供给量应控制在有效并安全进行实验的最小量.待处理的用过的可燃性液体也应计算在内.安全使用酒精灯,不能在燃烧状态下添加酒精,酒精量不能超过总容量的2/3.禁止用冰箱储存易31、燃液体.如果确实需要,应存放在专门的防爆冰箱内,冰箱应远离火源. 从储存罐里倒出易燃液体,应在专门的储存室或通风橱内进行.运送易燃液体时,其金属容器应有接地装置. 加热易燃液体(燃点低于940C)必需在通风橱进行,不能用明火加热.装易燃爆物的容器应经当地消防部门审核批准. 严禁用明火直接加热有机溶剂,在大量使用有机溶剂时,室内禁止使用明火.存放乙醚. 工作结束随手关闭水源、电源.离开实验室时要检查水、电、门窗,确认安全后方可离开. 严禁私用电炉.走廊、楼梯禁止堆放易燃、易爆物品,实验室内禁止吸烟.使用蚊香时要远离衣服、被褥或其他易燃品.2. 灭火实验室应配备足够扑灭各种火情并协助全体人员从失火32、现场及其附近撒离的相应消防设备.灭火器根据上级消防部门的规定配备、摆放灭火器,并根据要求对灭火器进行定期检查维修.A类灭火器适用于固体可燃物(如纸、木材、塑料)引起的火灾.A类灭火器多数为消防水栓.B类灭火器适用于汽油和溶剂引起的火灾.B类灭火器多数为二氧化碳或化学干粉,如碳酸氢钠.C类灭火器适用于电气引起的火灾.所有工作人员都应知道电开关的位置以及切断失火电器电源的方法.灭火系统应建立年度安全检查,及随时检修、维护的制度.火灾涉及供气管道系统应立即关闭远端阀门以及切断燃气来源,如果无法做到这点或燃气是来自储气瓶时,则应立即从房间内撒离.如遇衣服着火时可选用防火毯,但防火毯并非必备的灭火工具.33、使用人员应受过训练,懂得站立时不能使用防火毯,在衣服着火后使用防火毯时立即采取“停、倒、滚”动作.从严重火情区撒离时,防火毯可用作个人防护装备.备有防火毯的实验室,防火毯应放在远离出口通道的地方.3.消防训练应对实验室工作人员进行防火安全训练.所有工作人员必须学会如何发布火警警报,学会遇有失火时应做到: 拨打报警电话“119”. 发出火警警报以求得帮助,并开始从失火区或建筑撒离. 如果可能,立即使用便携式灭火器进行灭火. 如果不能扑灭火情,应把所有通向火场的门关紧,并用湿毛巾或床单堵住下面的门缝,以阻止火情的蔓延. 应将房间里的所有人员撒出.(如果火情并非十分危险,可安排留下一人,向前来灭火的34、消防队员介绍具体情况.)由受过训练的人员讲解使用便携式灭火器进行灭火的技能.训练应为“手把手”的方式,还应包括不同火情采用不同灭火器的知识.对工作人员撒离火场的训练应经常举行,每年进行几次.所有人员每年参加一次(包括夜班和周末加班的人员).练习应包括帮助病人和其他人员的撒离.隔离区,如撒离时应关闭所有门窗.四.实验室用电安全准则1. 仪器用电作为仪器维护措施的一部份,应进行年度的安全用电检查并建立档案记录.每年至少对所有电插座的接地和极性、电缆的完整性进行检查一次,并将结果记录在案.可移动的设备应接地或采用更先进的方法防止触电,但全部塑封无法接地的仪器例外.新设备在使用前也应进行同样的检查.实35、验室应装有足够的插座,分布要合理,以减少在插座上接上其它多用插座和避免拖拉过多的电线.在空气中存在达到一定数量的易燃气体或蒸汽有可能形成可爆性混合物的危险环境下,应使用指定专门为此设计的防爆是器设备.2. 维修与维护所有电器设备的维修与维护只能由取得正式资格的维修人员进行. 仪器的维修:除校准仪器外,仪器不得接电维修.维修时要确保手干燥,取下所有的饰物(如手表和戒指),然后谨慎操作. 线路检修:实验室技术人员不得维修建筑物的电力系统.任何涉及开关、插座、配电箱、保险丝、断路器的维修工作应由该建筑物的维修人员或其他有资格的售人员进行. 高压设备:为保证高压设备(如高压电泳仪等)的安全,要制定具体36、的详细操作规程. 接地:电器设备必须接地或用双层绝缘.电线、电源、电源插座、插头必须完整无损.在潮湿环境的电器设备,要安装接地故障断流器.五.化学危险物品使用准则临床化学实验室存在有许多腐蚀性、毒性、易燃和不稳定试剂,属化学危险物品.所有化学危险物品的容器都应有清晰标记.目前,广泛应用配制好的试剂和试剂盒,致使有些化学危险物品不易被识别,对这些试剂和试剂盒的成份应予复审并给予适当标记.实验室管理人员有责任向工作人员介绍化学危险物品.实验室技术人员有责任熟悉并向同事介绍化学危险物品和遵照安全操作.1. 化学危险物品分类腐蚀品:腐蚀品是接触人体后给人造成可见损伤或不可逆改变的物质.腐蚀性化学废物是37、指PH小于2.1或PH大于12.5或对钢(SAE1020)的腐蚀力超过0.635cm/年(550C)的物质.例如:盐酸.毒害品:毒害品是吸入、食入或少量接触即可引起严重生物效应的物质.致癌物:由于检测化学物品能否诱发恶性肿瘤的测试系统很不相同,定义致癌物比较困难.例如:苯. 可燃烧物:可燃烧物指任何可燃烧的化学物品,包括可燃物和易燃物.易燃液体(燃点低于380C)可分为以下几个级别:A级: 燃点低于220C;沸点低于180CB级: 燃点低于220C;沸点高于180CC级:燃点高于210C;沸点低于380C可燃液体(燃点高于380C低于600C)_可分为以下几级别: A级:燃点高于600C低于938、40C B级: 燃点高于940C易燃化学物品:易燃化学物品是指能迅速发生剧烈化学变化的不稳定物质.爆炸性分解可在正常温度和压力下发生.例如:肼.2材料安全数据表及标签购进可能有危险的化学物品都必须附有材料安全数据表。所有危险化学品都需要以易于识别的形式进行标记，使专业和非专业人员很容易警觉其潜在的危险性。标记可以是文字、图标、标准化代码或多种形式并存。3化学危险物的管理与使用腐蚀品应在近离地面处储存以减少掉下的危险。搬运体积超过500ml的浓酸试剂时，必须用运载托车。严禁氧化剂与易燃剂存放在一起。腐蚀性化学品要单独存放。例如：乙酸或乙酸酐等有机酸与硫酸、硝酸或高氯酸等强氧化剂分开储存。个人防护39、装备：在使用腐蚀性物品场所的工作人员，应该穿戴围裙、手套和其它个人防护装备。急救设备：使用腐蚀性物品的场所,应设有合适的急救沐浴设施和洗眼装置.化学通风橱:所有挥发性腐蚀物品的操作,都必须在化学通风橱中进行.易燃易爆液体应在合格的容器里储存.分装时应有明确的易燃和可燃性标记,工作储备量控制在最低限度.易燃或可燃性液体的储量超过1000升,至少应有1间专用储藏室.储存可燃性液体的仓库应远离明火和其它热源.(10)可燃性液体如需要在冰箱内存放,该冰箱的设计必须符合避免产生蒸汽燃烧的要求.实验室所有的冰箱门都应标明可否用于存放易燃、可燃性液体.4.污染物的清除和处理 每个实验室都应负责日常的清污工作40、.在结束常规工作时、工作交班、发生紧急事件如清除溅溢物后,都需要进行清污工作.需要外送维修的设备,只有在实验室管理人员确认没有化学危险物品污染时,才能外送维修. 废弃化学物品:所有废弃化学物品都应按危险物品处理,除非能够确定它们的性质.清洁溅溢有害物质的所有材料,包括吸附物和中和物,都被认为是有害废弃物. 专职人员:实验室应指定专人协调和负责处理实验室有害化学废弃物,并将其放置在指定的废弃物堆放场所.容器:化学废弃物应放置在密闭、有盖的容器中.标签:化学废弃物的包装应有标签,标签应包含以下内容: *日期 *来源 *实验室来源 *成份 *物理性质(气体、液体等) *体积 *危险性(易燃或易爆)六41、实验室微生物安全准则 在临床实验室,工作台人员在接触标本和操作过程中,可能被感染.临床实验室可能接触的微生物可分为三类:1.病毒,如:病毒性肝炎(特别是乙型及丙型肝炎)和获得性免疫缺陷综合症(AIDS).2.细菌,包括:细菌、分枝杆菌、真菌.3.其他具有高毒力的病原体,如出血热病毒和立克次体.因为从病史和体检不能可靠地鉴定所有病人的病原体,所以当接触和处理所有的体液时,均应执行“常规预防措施”.1. 感染途径空气传播:在取下装有标本试管的塞子时,溶液洒落在坚硬的表面上、用未加塞子的试管进行离心或溶液(包括接种环内的溶液)加热太急时,具有传染性的溶液在上述各种情况下,可能形成气烟雾散布在空气中42、.经口传播:用口吸移液可能导致微生物入人体引起传染.传染也可通过间接途径,如饮食或吸烟前没有彻底洗手引起“手口”传染.直接接种;偶然的针刺、碎玻璃划伤和动物咬伤均可通过直接接种引起传染.临床标本中的感染原也可通过被纸张轻微划伤的手指、很轻的擦伤或损伤的表皮进入人体造成感染. 粘膜接触:一些病原体,包括肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒(HIV),能够通过与粘膜(如眼结膜)的直接接触进入人体,所以在擦拭眼睛、更换隐形眼镜或使用化妆品前应彻底洗手. 节肢动物媒介:蚊、蜱、蚤和其实体外寄生虫都是潜在的传染源,特别是当室内喂养有动物时.2. 常规预防措施来自所有病人的血液和体液都被认为是具有传染性的.所以血液43、和体液的标本都应放置于具有安全盖的结构优良的容器里,以防在运输过程中发生泄漏.采集标本时应防止污染容器的外表或随标本的检验单.如果存在潜在的或实际的污染,则应再加一层包装(例如:包装袋).所有处理血液和体液(例如:取下真空试管的塞子)的工作人员都应戴上手套.如果有可能发生血液或体液的喷溅,则应使用面部防护装备.对于组织学和病理学检查、微生物培养之类的常规操作,并不需要在生物安全橱内进行.但是,如果操作过程中会产生气烟雾或飞沫,则应使用生物安全橱(类或类),这些操作包括混匀、超声雾化和剧烈搅拌.实验室应使用机械移液装置.绝对禁止用口吸移液.使用注射器和针具时应防止受伤.禁止用手将针套重新套在针头44、上、禁止故意将针头弯曲或折断、将针头从一次性注射器上取下、或对针头进行其它操作.所有锐利物品在使用后都应放入贴有清晰标签、不会被刺破的容器内,然后运至处理场所.废弃锐利物品的容器应就近放在便于操作的地方.为防止装得过而满意外伤人,应在装满后尽快运走.血液或其他体液发生泄漏或工作结束后,均应使用合适的化学杀菌剂对实验室工作区进行表面消毒.可使用新鲜配制的漂白粉溶液(次氯酸钠1:10稀释液)和2.5甲酚溶液或其它有效氯的溶液对所有的工作台进行消毒.漂白剂溶液应至少作用15分钟,使用其实的消毒剂可参考其产品说明书.实验中用过的污染物品在重复使用前或装入容器中按传染性废弃物进行处理前,应先进行去污处理45、.被血液或其它体液污染的设备在实验室内或外送商家进行维修之前,应先进行清洁和消毒.无法彻底消毒的设备必须贴上生物危害的标签.手或其他部位的皮肤在接触血液或其他体液后必须立即彻底清洗.在实验工作结束后或取下手套后应立即洗手.在离开实验室之前应脱下所有的个人防护装备.如果实验人员工作时有可能接触到血液、其它可能具传染性的物质、病人的粘膜或要损伤的皮肤、或在处理污染的物品或表面时,都应戴上手套.在进行血管穿刺时,包括静脉采血、手指或脚背穿刺,也应戴上手套.如果手套破损、或失去其屏障功能，则应尽快更换。清洗或消毒会损害一次性手套的质量，故不得重复使用一次性手套，在接触病员后应更换手套。(11)工作区应46、使用吸收性强的纸张覆盖。在移液、混合、振荡、搅拌或离心时，必须防止发生气烟雾。（12）为尽量减少在紧急情况下采用口对口的复苏述，应在那些可能需要进行复苏述 的地方，备有复苏包或其它通气装置。（13）患有渗出性病边或湿疹的医务人员在痊愈前不得直接接触病人，也不得接触医疗设备。3. 普通微生物实验室的传染性危险（1）操作手册：分离和鉴定微生物的每个操作步骤都有其特殊的危险。操作手册必须包括每个操作步骤的安全规范。（2）常规安全措施：所有关于血源性传染危险控制的常规安全措施都可应用于整个微生物实验室。（3）标本运输： 运输应将标本进行可靠包装。禁止使用皮氏细菌培养平皿邮寄标本。禁止将干冰防入密封的容47、器。 严格遵守运输部门国际空运协会的有关规定。 运输用于诊断的标本时应根据需要标记上“易腐坏”、“干冰保存”、“冷冻生物制品”或“易碎”等标志。（4）标本处理 被高毒力微生物（如土拉巴斯德菌或粗球孢子菌等）污染的物品，处理前必须经过高压灭菌，包括用于隔离的设备和材料。 培养分枝杆菌和两性真菌用的平皿和试管必须使用胶带密封，用压力蒸气灭菌后进行处理或焚化处理。 普通标本和使用过的培养基应弃入结实的塑料袋中。 可重复使用的物品和污染的器具应置于装有次氯酸钠1：10稀释液过其它合适的消毒剂的不锈钢容器内，然后进行高压灭菌、清洗和再次灭菌。 对医疗废弃物处理的管理应遵守有关法规。（5）生物安全橱 生物48、安全橱的微生物实验室里控制生物危害的最好的方式之一。实验室可根据需要选择合适的型号，并应根据产品说明书进行安装、使用和维修。 实验室应制定安全橱的维护规程，以确保安全橱内合适的气流流速，并适时更换滤器。安全橱的放置应远离气流不稳定的地方，在通风的设置应根据产品说明书。 在维护、移动和/或处理安全橱之前必须对生物安全橱进行消毒。七、检验科消毒隔离制度 1医务人员要求（1） 工作人员应穿戴整洁，工作服一般每周更换2次；（2） 试验室接触标本均为可疑污染物，操作前均应戴好乳胶手套，手套破损要及时更换，工作后脱手套用手消毒液消毒双手，用流动水洗净；（3） 做血常规检查的操作者必须做到一人一消毒，消毒液49、为含有效氯250500mg/L溶液;（4） 离开实验室的工作人员必须脱掉手套；不能穿工作服到院外活动。 2病人手指消毒 （1）做血常规检查应选取病人无红肿，破损，伤痕的手指部位； （2）用安尔碘消毒针刺部位2次，干后针刺取血，做到一人一针一消毒一吸管； （3）推片不得直接接触创口皮肤取血。3废弃物的消毒及处理（1） 医用垃圾与生活垃圾严格分开，黑色垃圾袋装生活垃圾，黄色垃圾袋装医用垃圾；（2） 固体医疗垃圾套双层垃圾袋，防止泄露，应有防止锋利物刺破垃圾袋的防护措施，定时或在装满3/4时及时清理，运送到指定地点，集中焚烧；（3） 液体垃圾如病人的尿液、胸腹水、呕吐物按8片/L健之素消毒片投放，有50、效氯浓度为2000mg/L，作用30分钟后到入下水道。 4 重复使用检验器材处理（1） 重复使用的器材用后应浸入含有氯2000mg/L消毒液4小时，再清洗干净；（2） 浸入重络酸钾（50溶于100毫升水）浓硫酸（1000毫升）溶液，24小时；（3） 取出，蒸馏水冲洗10遍以上；（4） 烘干，备用。5各种物面及地面消毒（1） 各种物表及台面用300500 mg/L含氯消毒剂擦拭；用紫外线消毒时，灯管离台面不宜超过1米，消毒有效区域为灯管周围1.52.0米，每次时间不少于30分钟；（2） 地面用浸有5001000 mg/L有效氯消毒液或0.10.2过氧乙酸的拖把拖地6空气消毒（1） 实验室应开窗通51、风，保持空气流通、清新；（2） 空气消毒用紫外线灯照射，每次时间均应大于30分钟，每天不少于1小时；（3） 有条件的实验室可采用静电吸附式空气净化器持续消毒。 7化验单消毒（1） 要保持化验单干净，避免被检验材料污染；（2） 不等取的化验报告单，在每日工作结束时，用微波炉中火消毒2分钟后发出；（3） 门急诊未被污染的化验单，可随时发出。凡有可能被污染的化验单，均须经消毒后方可发出。8消毒液配制及监测 （1） 四环牌清洗消毒剂含有效氯5%，配比：1：19有效氯大于或等于2000mg/L；1：99有效氯大于或等于500mg/L；1：99有效氯大于或等于250mg/L；（2） 健之素消毒片含有效氯252、50mg/片（3） 消毒液浓度监测用G-L型试纸 9紫外线强度监测（1） 开启紫外线灯管5分钟后，将指示卡置于紫外线下垂直距离1米处，有图案的一面朝上，照射1分钟，图案中光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色，将其与标准色块比较，读出照射强度，使用中紫外线灯辐照强度小于70uW/c为合格；每季度检测一次；（2） 做好紫外线消毒记录，每季度检测一次紫外线强度，检测结果贴于记录本上，灯照强度小于70 uW/c应及时更换灯管。 10应急措施（1） 棉质工作服、衣服有明显污染时，可随时用有效氯500 mg/L的消毒液，浸泡3060分钟，然后冲洗干净。（2） 各种表面若被明显污染，用10002000 mg53、/L有效氯溶液撒干污染表面，保持3060分钟，再擦除，拖把用后浸于上述消毒液内1小时。室内质控失控情况处理及原因分析1. 目的：保障日常标本检测结果的准确性和有效性。2适用范围：所开展的各个检测项目。3操作程序：3.1 失控情况处理 操作者在测定质控时，如发现质控数据违背了控制规则（出现失控），应报告专业室主管（组长），认真分析查找失控原因，采取相应的改进措施，由专业室主管（组长）做出是否发出与测定质控品相关的那批患者标本检验报告的决定，并报告科主任；把失控原因和采取的措施作好记录并签名。3.2 失控原因分析 失控信号的出现受多种因素的影响，这些因素包括操作上的失误、试剂、校准物、质控品的失效54、，仪器维护不良以及采用的质控规则、控制限范围、一次测定的质控标本数等等。失控信号一旦出现就意味着与测定质控品相关的那批病人标本报告可能作废。此时，首先要尽量查明导致失控的原因，然后再随机挑选出一定比例（例如5%或10%）的患者标本进行重新测定，最后根据既定标准判断先前测定结果是否可接受，对失控做出恰当的判断。对判断为真失控的情况，应该在重做质控结果在控以后，对相应的所有失控患者标本进行重新测定。如失控信号被判断为假失控时，常规测定报告可以按原先测定结果发出，不必重做。当得到失控信号时，可以采用如下步骤去寻找原因： 3.2.1 立即重测定同一质控品。此步是主要用以查明人为误差，每一步都认真仔细的55、操作，以查明失控的原因；另外，这一步还可以查出偶然误差，如是偶然误差，则重测的结果应在允许范围内（在控）。如果重测结果仍不在允许范围，则可以进行下一步操作。 3.2.2 新开一瓶质控品，重测失控项目。如果新开的质控品结果正常，那么原来那瓶质控品可能过期或在室温放置时间过长而变质，或者被污染。如果结果仍不在允许范围，则进行下一步。 3.2.3 新开另一批质控品，重测失控项目。如果结果在控，说明前一批血清可能都有问题，检查它们的有效期和贮存环境，以查明问题所在。如果结果仍不在允许范围，则进行下一步。 3.2.4 进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时56、可更换试剂以查明原因。如果结果仍不在允许范围，则进行下一步。 3.2.5 重新校准，重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。 3.2.6 请专家帮助。如果前五步都未能得到在控结果，那可能是仪器或试剂的原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援了。细菌室质量管理细菌室室内质控程序1. 目的:随时了解并控制实验室检测的准确性2. 适用范围:细菌室3. 制定人:黎新桂4. 内容:4.1日常工作液要求每日做质控,操作程序参阅染色程序,并做好相应记录.4.2日常工作用试剂每天要求做质控,操作程序参阅各试剂的操作程序,并做好相应记录.4.3微生物鉴定及药敏系统ATB Expressio57、n 每天开机各项均正常方可进行工作,每到一批鉴定及药敏均要用已知质控菌株做质控,并打印质控单保存.4.4培养基应按每到一批试剂均要用已知质控菌株估质控,并记录.4.5药敏试验(K-B法)质控按操作程序进行操作.4.6每天发送检验报告之前都要检查一遍当日室内质控是否全部合格,只有室内质控全部合格时才能发送当日报告.4.7上述各项一但有失控情况出现,即按失控处理程序处理.细菌室室内失控处理程序1. 目的:及时发现引起失控的原因并解决问题2. 适用范围:细菌室3. 制定人:黎新桂4. 内容4.1仪器状态如出现不能正常工作,参照仪器提示逐步进行处理.如不能自行解决,则电话通知仪器工程师,直到仪器恢复正58、常状态,方可用于标本的检测.4.2恒温箱门是否密闭,有问题及时处理,直到显示温度正常状态,方可用于标本的培养.4.3药敏质控如有“失控”出现,按操作手册“细菌对药敏的敏感试验”失控中影响结果的因素所述步骤逐一检查.培养基质控试剂质控染液质控上述三方面的质控如出现问题,需要检查是否过期使用,是否受到污染,存放其冰箱温度是否在规定范围.以上各点,凡有“失控”出现,必须及时查明原因,并马上予以解决才可进行标本的检测.标准菌株的使用及保存1.对每批购买的标准菌株做好登记,包括菌种的菌名编号购买时间保存地点记录人等2.每次使用标准品都应做好使用记录,包括标准品的名称编号使用时间.3.购买的标准品初次使用59、时应大量增殖,然后分装在胰蛋白胨肉汤中,-200C以下保存.4.新的标准菌株复苏最多不得超过三次,如超过三次将不再视为标准菌株.5.标准菌株保存管一经溶化使用后,不得再次冻存.ESBLs(超广谱-内酰酶)质控程序1.质控菌株 大肠埃希菌ATCC25922 肺炎雷伯菌ATCC700632.方法:纸片法药敏纸片: 头孢噻肟 头孢噻肟/棒酸 头孢他啶 头孢他啶/棒酸3.操作程序:严格按照K-B法操作程序4.结果判读:对于肺炎克雷伯菌ATCC70063,头孢他啶联合克拉维酸的复合剂抑菌圈与单独的头孢他啶相比,增大值应5mm,头孢噻肟联合克拉维酸复合剂的抑菌圈与单独的头孢噻肟的抑菌圈应3mm. 对于大肠60、埃希菌ATCC25922所测得的药物联合克拉维酸的复合剂抑菌圈与单独的药物抑菌圈相比2mm.1. 如果失控,找出并写明原因,记录后重复试验至合格.生物安全柜维护和保养1. 清洁在通常情况下,清洁只需用少量家用或商用的清洗剂,将它溶于水后直接擦拭,就可将表面的污物擦掉.请不要擦拭任何玻璃,以免产生磨损.2. 在使用过程中每日或每周的清洁消毒和清洗工作室.对操作面板进行消毒和清洗.用柔性的清洗剂或玻璃专用清洗剂清洗箱体外表面和玻璃.对照说明书设备的各种功能进行检查.3. 每月清洗用清洁剂将所有外面的尘埃清除.对设备内部进行消毒处理.对设备进行功能检验,并在通常使用时检查设备安全.4. 每年维护对设备安全性进行全面的检查,对设备进行维护.检查前玻璃门驱动装置的松劲度.检查紫外灯管.将本次维护记录在案.