1、县人民医院检验科临检室检查测定作业指导书编 制： 审 核： 批 准： 版 本 号: ESZAQDGF001 编 制： 审 核: 批 准： 发 布： 二XX年X月目 录序号主 题 内 容 代 号页 号1 精液常规检查ZYJ-3-LJ-0152粪便常规检查（直接涂片法）ZYJ-3-LJ-0283粪便潜血试验定性（纸片法）ZYJ-3-LJ-03104血疟原虫(MP)厚血片检查法ZYJ-3-LJ-04125血疟原虫(MP)薄血片检查法ZYJ-3-LJ-05146尿人绒毛膜促性腺激素定性ZYJ-3-LJ-06177一小时尿沉渣计数ZYJ-3-LJ-07198ABX-MICROS60红细胞计数ZYJ-3-2、LJ-08219ABX-MICROS60白细胞检验ZYJ-3-LJ-092310ABX-MICROS60白细胞分类计数ZYJ-3-LJ-102611ABX-MICROS60血红蛋白检测ZYJ-3-LJ-112912全血血细胞沉降率测定ZYJ-3-LJ-123113ABX-MICROS60红细胞比积的测定ZYJ-3-LJ-133314ABX-MICROS60平均红细胞体积检测ZYJ-3-LJ-143615ABX-MICROS600血小板(PLT)测定ZYJ-3-LJ-153916红细胞平均血红蛋白含量测定ZYJ-3-LJ-164217红细胞平均血红蛋白浓度测定ZYJ-3-LJ-174418尿液酸3、碱度测定（干法学法）ZYJ-3-LJ-184619尿葡萄糖定性实验（干化学法）ZYJ-3-LJ-194920尿蛋白定性测定（干法学法）ZYJ-3-LJ-205221尿血红蛋白测定（干化学法）ZYJ-3-LJ-215522尿胆原定性测定（干法学法）ZYJ-3-LJ-225723脑脊液蛋白定性试验（潘氏法）ZYJ-3-LJ-235924脑脊液外观检查（目测法）ZYJ-3-LJ-246225脑脊液有形成分检查（显微镜法）ZYJ-3-LJ-256426尿亚硝酸盐定性测定（干法学法ZYJ-3-LJ-266827凝血酶原时间（PT）测定ZYJ-3-LJ-277028活化部分凝血活酶时间测定ZYJ-3-LJ4、-287429血浆纤维蛋白原（Fbg）测定ZYJ-3-LJ-297830骨髓巨核细胞计数ZYJ-3-LJ-308231前列腺液常规检查（玻片法）ZYJ-3-LJ-318432异常白细胞检查（显微镜法）ZYJ-3-LJ-328533异常红细胞检查（显微镜法）ZYJ-3-LJ-338934浆膜腔积液粘蛋白定性检查ZYJ-3-LJ-349435浆膜腔积液化学检查ZYJ-3-LJ-359736浆膜腔积液外观检查（目测法）ZYJ-3-LJ-3610037浆膜腔积液有形成分检查ZYJ-3-LJ-3710238血球分析仪操作维护规程ZYJ-3-LJ-3810539ABO血型鉴定(生理盐水法)ZYJ-3-LJ5、-3910940阴道分泌物常规检查ZYJ-3-LJ-4011441血球分析仪操作手册ZYJ-3-LJ-4111642尿乳糜定性检查ZYJ-3-LJ-4211743网织红细胞计数ZYJ-3-LJ-4311944454647484950精液常规检查1. 实验原理记录精液量、颜色、透明度、粘稠度和是否液化。显微镜检查包括精子计数、活动力、活动率、形态。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：必须禁欲（包括遗精和手淫）37天。这是因为少于48小时采取的精液，因相距时间太短，精液中精子的数量可能偏少，容易造成少精症的假象。如果超过7天，精子活率、活力都有所下降，也可造成弱精子症的假象。精液检查应间隔一6、周或两周，要进行23次检查。因为一个人精子的产生在一年中，可因季节、气候等,诸多因素的影响而有一些变化。2.2 标本种类：精液 2.3 标本要求：用清洁干燥小瓶收集，不应采用避孕套内精液。3. 标本储存：立即送检。4. 标本运输：室温运输，冬季需保温运输。5. 标本拒收标准：久置标本，污染标本，避孕套内标本。6. 操作步骤7.1 记录精液量、颜色、透明度、粘稠度和液化时间。7.2 精子活动率：取新鲜标本混匀后，在温玻片上用高倍镜观察100个精子，计数活动精子与不活动精子的比例，计算精子活动的百分率。精子活动率=活动精子数/（活动精子数+不活动精子数）100%7.3 取上述新鲜湿片标本，观察精子7、的活动力，可按下列五级报告：0级：精子完全不活动，加温后仍不活动；I级：精子运动不良，运动迟缓，原地打转或抖动，向前运动能力差；II级：精子活动较好，运动速度尚可，游动方向不定，呈直线或非直线运动，带有回旋；III级：为中速运动；IV级：精子活动好，快速直线运动，很快超越一个视野，活泼有力。7.4 精子计数：7.4.1 于试管内加精子稀释液0.38ml，吸液化精液20ml，加入稀释液内摇匀。7.4.2 充分摇匀后，滴入血细胞计数池内，静置1-2min，待精子下沉后，以精子头部作为基准进行计数。7.4.3 如精子数少，可计数两个大方格内精子数，总数乘以10万即为每毫升精液内精子数，再换算成1098、/L报告。7.4.4如精子数多，可计数5个中方格内精子数，总数乘以100万即为每毫升精液内精子数，再换算成109/L报告。7.5 精子形态观察：革兰氏或瑞氏染色后用油镜观察。异常精子可有：头部过大、过小、尖细、外缘不齐、双头等；中部消失、分枝或肿胀；尾部呈双尾，卷曲度短或消失（缺尾）。7.6 细胞：红、白细胞40的精子活动不良，常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低，主要见于精索静脉曲张、泌尿生殖系统非特异性感染，应用某些药物如抗疟药、雄激素等所致。8.2.3 精子计数：正常人精子计数为10130109/L，相当于一次排出的精子总数为400106600106。当精子计数值20106/ml或一9、次排精总数20，将会导致不育，可能是由于精索静脉曲张、血液中有毒代谢产物、铅污染等或应用大剂量放射线及使用细胞毒性药物导致的精子形态异常。如果精液中发现1的病理性未成熟细胞，包括精原细胞、精母细胞和发育不完全的精细胞，提示睾丸的曲细精管的生精功能受到药物或其他因素影响或损伤。如果精子凝集10，提示生殖道感染或免疫功能异常。9. 注意事项9.1 出现一次异常结果，应隔一周后复查，反复查2-3次才能得出比较正确的结果。9.2 如低倍镜、高倍镜检查均无精子，应将精液离心沉淀后再涂片检查，如两次均无精子，报告“无精子”。10. 操作性能：快速简便11. 方法局限性：易受人为主观经验不足影响结果判断。110、2. 参考文献中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二版）.1997,149-150粪便常规检查（直接涂片法）1. 实验原理：本实验是利用肉眼观察粪便的颜色和性状，以及利用粪便生理盐水涂片在显微镜下观察涂片中是否有虫卵、幼虫、各种细胞、包囊、结晶等。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：无须特殊准备。2.2 标本种类：粪便 2.3 标本要求：标本应取自粪便的不同部位特别是病理性改变比较明显的部位。3. 标本储存：粪便应取指头大小存放于干燥、清洁、无吸水性的容器内。粪便的容器必须有盖且有明显的标记。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：尿液、植物、泥土、污水等污染标本11、；干结粪便。6. 操作步骤6.1 肉眼观察粪的颜色、性状。6.2 再用竹片搜集少量不同部位的粪便标本，涂抹于滴有一滴生理盐水的洁净玻片上。6.3 盖上盖玻片，涂片的厚度以能透过印刷物字迹为准。6.4 先在低倍镜下观察有无包囊、虫卵、幼虫等，再在高倍镜下观察有无红细胞、白细胞、各种结晶，并观察粪便中的菌群分布。7. 结果判断与分析7.1 粪便颜色根据观察所见报告，如黄色、褐色、土灰色、绿色、红色、柏油样等。正常粪便因粪胆素而呈棕黄色，但可因饮食、药物或病理原因影响而改变粪便颜色：灰白色见于钡餐后、服硅酸铝、阻塞性黄疸、胆汁减少或缺乏；绿色见于食用含叶绿素的蔬菜后及含胆绿素时；红色见于下消化道出血12、食用西红柿、西瓜等；柏油样便见于上消化道出血等。酱色常见于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等；米泔水样见于霍乱。7.2 性状可报告为软、硬、糊状、泡沫状、稀汁样、血水样、血样、粘液血样、粘液脓样、有不消化食物等。正常时为有形软便。7.2.1 球形硬便：便秘时可见。7.2.2 粘液稀便：见于肠壁受刺激或发炎时，如肠炎、痢疾和急性血吸虫病等。7.2.3 粘液脓性血便：多见于细菌性痢疾。7.2.4 酱色粘液（可带脓）便：多见于阿米巴痢疾。7.2.5 稀汁样便：可见于急性肠胃炎，大量时见于伪膜性肠炎及了隐孢子虫感染。7.2.6 米泔样便并有大量肠粘膜脱落，见于霍乱等。7.2.7 扁平带状便：可能因直13、肠或肛门狭窄所致。7.3 蛔虫、蛲虫、绦虫节片等较大虫体，肉眼即可分辩。钩虫虫体常需将粪便冲洗过筛后方可看到。服驱虫剂后排便时应检查有无虫体。驱绦虫后应仔细寻找有无虫头。8. 临床意义：为各类消化道疾病提供协助性诊断；查找并鉴别寄生虫。9. 操作性能：快速简便10. 方法局限性：有时会受主观因素的影响。11. 参考文献中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二版）.1997,139-14112. 注意事项12.1 虫卵的报告方式：未找到者注明“未找到虫卵”，找到一种报告一种，找到几种报告几种，并在该虫卵后面注明数量若干，以低倍视野计算。12.2 应注意将植物纤维及其细胞与寄生虫、14、人体细胞相鉴别，并注意有无肌纤维、结缔组织、弹力纤维、淀粉颗粒、脂肪小滴球等。若大量出现，则提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。12.2 细胞中应该注意红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞（直接涂片干后用瑞氏染色）、上皮细胞、巨噬细胞等。12.3 夏科-雷登结晶：为无色或浅黄色两端尖而透明具有折光性的菱形结晶，大小不一。常见于肠道溃疡，尤以阿米巴感染粪便中最易检出。过敏性腹泻及钩虫病患者粪便亦常可见到。12.4 细菌：占粪便净重的1/3（4000亿/g干粪），正常菌群主要是大肠杆菌和肠球菌，占80%；而过路菌（产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等）不超过10%；芽孢菌（如梭状菌）和酵母菌为常住菌，但总量不超过15、10%。正常菌群消失或比例失调可因大量应用抗生素所致，除涂片染色找细菌外，应采用不同培养基培养鉴定。粪便潜血试验（ST-OBT）定性（纸片法）1. 实验原理：粪便潜血纸片法是一种用于检测粪便中是否含有潜血的试剂。反应原理如下：血红素（Hb）+ 双氧水（H2O2） 水(H2O) + 氧（O2）氧（O2）+ 氨基比林 蓝紫色2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：收集标本前三天禁食动物性食物、肝脏及含叶绿素食物、铁剂、中药以免引起假阳性反应。2.2 标本种类：粪便 2.3 标本要求：标本应取自粪便的不同部位；收集标本后迅速检查，以免因长时间放置使潜血反应的敏感度降低。3. 标本储存：粪便应取指头16、大小存放于干燥、清洁、无吸水性的容器内。粪便的容器必须有盖且有明显的标记。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：久置硬结粪便。6. 试剂6.1 试剂名称：隐血试剂带6.2 试剂生产厂家：广州市花都高尔宝生物技术有限公司6.3 包装规格：25人份/筒6.4 试剂盒组成：6.4.1 潜血试纸（OB Paper）：试纸上涂有氨基比林。6.4.2 标准色板潜血试纸 5pcs*606.5 试剂储存条件及有效期：25摄氏度以下干燥环境中保存，有效期内皆可使用。7. 操作步骤7.1 取一洁净干燥玻片，滴加生理盐水一滴。7.2 用竹片搜集少量不同部位之粪便，均匀涂抹于玻片上。7.3 将试剂带浸入粪便中17、，湿透(约1秒钟)后取出。7.4 在30至60秒内观察试剂带颜色并与标准色板对照，测得结果。8. 结果判断与分析8.1 试剂带呈现深绿色，报告为“+”8.2 试剂带呈现绿色，报告为“+”8.3 试剂带呈现淡绿色，报告为“+”8.4 试剂带呈现黄绿色，报告为“弱阳性”8.5 试剂带呈现黄色，报告为“阴性”。 9. 临床意义9.1 适合于检测粪便之潜血。9.2 消化道出血时（如溃疡病、恶性肿瘤、肠结核、伤寒、钩虫病等）本试验可阳性。9.3 消化道恶性肿瘤时，粪便潜血可持续阳性。10. 操作性能：快速简便、安全性高、灵敏度适中。11. 方法局限性：呈色反应与判读的时间控制会受主观因素影响12. 参考18、文献中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二版）.1997,142-14313. 注意事项13.1 本品为一次性使用体外诊断试剂。13.2 超过有效期，不能使用。血疟原虫(MP)厚血片检查法（手工法）1. 实验原理应用瑞氏染色法对制备好的厚血片进行染色后在显微镜下查找疟原虫。2. 标本采集2.1标本采集前病人准备：间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血；恶性疟患者，应在发作后20h左右采血。2.2标本种类：全血或末梢血2.3标本要求：厚血片的溶血要及时。 3. 标本储存：厚血片的放置期限在夏季不超过48h，冬季不超过72h。 4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收19、标准：细菌污染。6. 操作步骤6.1 在洁净玻片上，滴患者血液2滴。6.2 用推片角将血液由内向外转涂成直径约1cm、厚薄均匀的血膜，在室温中自然干燥。6.3 在干燥的血膜上滴加蒸馏水数滴，完全覆盖血膜，溶血数分钟。脱去血红蛋白的血膜呈浅灰色，倾去溶血液。6.4 不必待干，进行瑞氏染色。6.5 干后镜检。7. 结果判断与分析：在油镜下观察20个视野或以上才能报告“未检出疟原虫”；发现虫体后还应在薄血片上进行分类鉴别。8. 临床意义：本实验有利于提高疟原虫的阳性检出率。9. 操作性能：快速简便、阳性检出率高、利于人群普查初筛。10. 方法局限性10.1 易受溶血不完全的影响。10.2 经验缺乏者20、易受其他杂物的影响。10.3 存在主观判断的失误。10.4 不易鉴别出疟原虫的种类。11. 参考文献中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二版）.1997,85-8612. 注意事项12.1 染色后，水洗时不要先倒去染液，应让清水流进染液，使沉渣冲走。12.2 注意区别易与疟原虫混淆的其他杂物。血疟原虫(MP)薄血片检查法（手工法）1. 实验原理应用瑞氏染色法对制备好的薄血片进行染色后在显微镜下查找疟原虫，并鉴别其形态种类。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血；恶性疟患者，应在发作后20h左右采血。2.2 标本种类：全血或21、末梢血2.3 标本要求：薄血片的血膜厚度要适度均匀以利镜检。 3. 标本储存：室温存贮，尽快检查。 4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：细菌污染。6. 操作步骤6.1 以常法推制成薄片。6.2 血膜完全干燥后即可进行瑞氏染色。6.3 在油镜下进行检查。7. 结果判断与分析在油镜下观察，进行形态鉴别。薄血片上3种疟原虫形态特点：形态特点间日疟原虫 三日疟原虫 恶性疟原虫（ 环 状 体）早 期 滋 养 体虫体大小较大，约为红细胞的1/3较大，约为红细胞的1/3较小，约为红细胞的1/6细胞浆浅蓝色，呈较薄之环状浅蓝色，呈较厚之环状浅蓝色，环状较细薄，常位于细胞之边缘，有时1个细胞内有2个环22、状体染色质可长得很大，甚至充满整个红细胞与间日疟原虫同红色小点，1个环状体具有1-2个-或更多晚 期 滋 养 体虫体大小可长得很大，甚至充满整个红细胞较小在末梢血液中查不到细胞浆呈阿米巴状，变化很多呈坚实带状，变化不多疟色素棕黄色，呈微小短杆状，四散分布黄绿色，呈较粗颗粒状，四散分布斑点薛氏小点，鲜红细小，均匀分布齐氏小点，红色裂 殖 体虫体大小很大较小在末梢血液中查不到细胞浆松散，比较不规则坚实较圆裂殖子数目12-24个，平均16个6-12个裂殖子形态排列不规则排列不规则或呈花朵状配 子 母 体虫体大小圆形，约为红细胞1/2以上圆形，与红细胞等大或较小半月形，两端钝圆（雄），两端较尖（雌）细23、胞浆深蓝色深蓝色蓝色染色质结实，深红色，位于一边结实，深红色，位于一边结实，深红色，位于中央疟色素沿边分布沿边分布黑褐色，密集于中央红细胞胀大，色较淡正常或缩小正常，偶然缩小，色深8. 临床意义：本实验用于对疟原虫的形态进行鉴别分类。9. 操作性能：快速简便、操作简单。10. 方法局限性10.1 阳性检出率较低。10.2 存在主观判断的失误。11. 参考文献中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二版）.1997,85-8612. 注意事项12.1 染色后，水洗时不要先倒去染液，应让清水流进染液，使沉渣冲走。12.2 注意区别易与疟原虫混淆的其他杂物。12.3 薄片油镜检查，须找24、出100或100个以上视野才能报告“未检出疟原虫”。12.4 找到环状体后，须再仔细寻找更为成熟的阶段，以便分类。如确实未找到更为成熟阶段的疟原虫，可报告为“检出环状体疟原虫”。12.5 有可能出现2种或3种疟原虫混合感染时，以间日疟与恶性疟原虫混合感染为常见，须注意鉴别。 尿人绒毛膜促性腺激素胶体金法定性1. 实验原理应用由抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）抗体和抗鼠IgG分别固相硝酸纤维膜和胶体金标记的抗HCG单克隆抗体及其他试剂组成，应用层析双抗体夹心法的原理快速检测尿液中HCG。显示结果明确，操作简便。用以妊娠早期诊断。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：无需特殊准备2.2 标本种类25、：随机尿2.3 标本要求：尿液收集应使用一次性尿杯或洁净容器，任何随机尿均适用本实验。 3. 标本储存：如尿液不能及时送检，应置4冰箱，测试前注意复温。 4. 标本运输：室温运输5. 标本拒收标准：细菌污染6. 试剂6.1 试剂名称：大卫胶体金早早孕检测试纸6.2 试剂生产厂家：润和生物医药科技有限公司6.3 包装规格：1人份/袋6.4 试剂盒组成：检测试纸 1人份干燥剂 一包6.5 试剂储存条件及有效期：室温4-30避光密封干燥处贮存，切勿冰冻。有效期17个月。7. 操作步骤7.1 待测样品、检测试纸或其他检测用材料等均在室温平衡后取出试纸。7.2 将测试纸有箭头标志的一端浸入尿液标本容器中26、，约有3秒钟后取出平放，5分钟内观察结果，15分钟后判定无效。7.3 测试纸插入尿液深度不可超过MAX标志线。8. 结果判断与分析阳性：在检测线位置及对照线位置各出现一条红色反应线。阴性：仅在对照线位置出现一条红色反应线。无效：测试纸无红色反应线出现，或仅在检测线位置出现一条红色反应线，表明实验失败或者检测纸失效。 9. 临床意义9.1 本实验主要用于妊娠的诊断。在受孕2-6天即呈现阳性。9.2 用于与妊娠相关疾病和肿瘤的诊断及鉴别诊断。9.3 过期流产或不完全流产，子宫内仍有活胎盘组织时，本实验仍呈阳性。9.4 人工流产后，如果仍呈阳性，提示宫内尚有残余胚胎组织。9.5 宫外孕时，HCG低于27、正常妊娠，仅有60%阳性。10. 操作性能：快速简便、特异性强、灵敏度高、重复性好。11. 方法局限性：试纸受潮易失效12. 参考文献：中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二版）.1997,135-13613. 注意事项：13.1 测试纸从冰箱取出后，先充分复温再打开包装，取出试纸后及时扣严筒盖，谨防受潮。13.2 不要用过期的试剂。13.3 本品为一次性使用体外诊断试剂。13.4 当HCG浓度很高时，检测线颜色可能变浅，属正常现象。13.5 若被测试者仍怀疑有受孕可能，而尿液测试阴性，可在48-72小时后重新收集晨尿再次测定。13.6 子宫肿瘤、葡萄胎或更年期病人，因尿液中28、HCG含量较高，可能会出现阳性结果。13.7 怀疑异位、异常妊娠时，应结合其他方法进行诊断。13.8 妇女有子宫外孕、难免性流产、过期流产、子宫肿瘤、葡萄胎等，本试验结果不能作为判定妊娠依据。13.9 准备做人流手术或服用流产药物的孕妇，必须通过B超检查及医生确诊后方能进行。13.10 本试条需专业人员操作，一次性使用。一小时尿沉渣计数1. 实验原理：准确收集3小时尿液，计数细胞和管型总数，换算为每小时尿沉渣数。2. 标本采集：患者先排尿弃去，准确收集3h尿液于清洁干燥容器内送检（标本留取时间5：30-8：30）。盛尿液的容器必须清洁干燥。3. 标本储存：立即送检。4. 标本运输：室温运输。529、. 标本拒收标准：污染，久置标本。6 实验材料：量筒，血细胞计数板7. 操作步骤7.1 准确测量3h尿量，充分混合。取混匀尿液10ml，置刻度离心管中，1500r/min离心5min，用吸管吸弃上层尿液9ml，留下1ml，充分混匀。吸取混匀尿液1滴，注于血细胞计数板内。细胞共数10个大方格，管型计数20个大方格。7.2 计算： 1000 3小时尿总量ml数1小时细胞数= 10大方格细胞总数 10 3 20大方格管型总数 1000 3小时尿总量ml数1小时管型数= 2 10 3式中：1000为l换算成ml数；10为尿液浓缩倍数。8. 参考值红细胞 男性3万/h，女性4万/h白细胞 男性7万/h，30、女性14万/h管型 3400/h9. 质量控制：进行室内工作人员比对分析，要求差异在10以内。10. 临床意义：10.1 急性肾炎患者红细胞增加。10.2 肾盂肾炎患者白细胞可明显增加。11. 操作注意事项：11.1 尿液应新鲜检查，pH应在6以下，若为碱性尿，则血细胞和管型易溶解。11.2 被检尿液比重最好在1.026以上，如小于1.016为低渗尿，细胞易破坏。11.3 如尿中含多量磷酸盐时，应加入少量稀醋酸液，使其溶解；但切勿加酸过多，以免红细胞及管型溶解；含大量尿酸盐时，应加温使其溶解，以便观察。12. 参考文献：中华人民共和国卫生部医政司编。全国临床检验操作规程（第二版）134页。AB31、X-MICROS 60红细胞计数1. 实验原理：本实验采用流体力学聚集技术原理分析红细胞。使用电阻抗法进行红细胞计数，红细胞通过小孔时，形成的相应的脉冲的多少即红细胞的数目。2. 标本采集：2.1 标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血。2.2 标本要求：2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝2.2.2 用手指末梢血作白细胞检验时，最少样品量为200ul，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。3. 标本储存：2小时内完成检验，室温放置下不超过8小时，4-8保存不超过48小时。4. 标本运输：室温运输5. 标本拒收标准：污染，凝固标本不能作测定。6. 试剂6.1 试剂名称: ABX-MICR 60血细32、胞分析仪6.2 生产厂家：法国ABX6.3 试剂组成试剂1：稀释液试剂2：清洗剂试剂3：溶血素6.4 试剂储存条件及有效期：储存温度为5-30，有效期为一年，开封后的使用期限为60天。7. 仪器设备7.1 仪器名称：ABX-MICROS 60血细胞分析仪7.2 仪器厂家：法国ABX7.3 仪器型号：ABX-MICROS 608 操作步骤8.1 手工模式：8.1.1 上下颠倒试管将内容物充分混匀。8.1.2 轻轻取下盖子，防止血液溅出。8.1.3 将试管正确放入手工吸引管，吸引管浸入样品。8.1.4 按start键，样品开始吸取。8.1.5 当样本从管中吸出后，吸样针向上移动通过清洗块。移去标本33、管，盖上试管盖。8.1.6 检测循环结束后，在屏幕上显示运行结果，吸样针移动到位以便接受新的标本。当前的运行数据将保存在数据记录中。8.1.7 测试下一个标本重复以上操作。9. 结果的分析与判断：在仪器显示屏上将显示结果10. 质量控制10.1 三种质量控制品（高、中、低），分别对应三种靶值，做出来的质控品不能超出质控靶值的上下限范围，否则实验无效。10.2计算方法当结果出现差异时用下列方法校正Coll= (Xct/Zct)Col2式中： Coll新质控调整系数Col2原质控调整系数Xct 质控品靶值Zct 质控品测得值11. 参考值范围：红细胞（RBC）检验：参考值男性4.05.51012/34、L，女性3.55.01012/L，新生儿6.07.51012/L。12. 临床意义：贫血、白血病、大量失血及钩虫病等降低。巨幼红细胞贫血时减少更为明显。慢性缺氧（肺气肿和先天性心脏病等）、严重脱水、大面积烧伤、慢性一氧化碳中毒及真性红细胞增多症等时增高。13. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器，可到别的仪器先检验，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台正常的代替。14. 参考文献14.1 叶应妩、王毓三等，全国临床检验操作规程第二版，东南大学出版社1997，169-17314.2 AB35、X-MICROS 60中文操作说明书ABX-MICROS 60白细胞检验1. 实验原理：本实验采用半导体激光器，以流式细胞术原理分析白细胞。当全血进入白细胞通道后，通过流式细胞技术半导体激光的照射形成白细胞散射图，从而计算出白细胞的数量。2. 标本采集：2.1 标本种类：新抽取的凝血或手指末梢血。2.2 标本要求：2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝2.2.2 用手指末梢血作白细胞检验时，最少样品量为200ul，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。3. 标本储存：2小时内完成检验，室温放置下不超过8小时，4-8保存不超过48小时。4. 标本运输：室温运输5. 标本拒收标准：污染，凝固标本不能作36、测定。6. 试剂6.1 试剂名称: ABX-MICROS 60血细胞分析试剂6.2 生产厂家：法国ABX6.3 试剂组成试剂1：稀释液试剂2：清洗剂试剂3：溶血素6.4 试剂储存条件及有效期：储存温度为5-30，有效期为一年，开封后的使用期限为60天。7. 仪器设备7.1 仪器名称ABX-MICROS 60血细胞分析仪7.2 仪器厂家：法国ABX7.3 仪器型号：ABX-MICROS 608. 操作步骤8.1 手工操作步骤8.1.1 充分颠倒内容物，将其充分摇匀。 8.1.2 轻轻取下盖子，防止血液溅出。8.1.3 将试管正确放入手工吸引管，吸引管浸入样品。8.1.4 按start键，样品开始37、吸取。8.1.5 当样本从管中吸出后，吸样针向上移动通过清洗块。移去标本管，盖上试管盖。8.1.6 检测循环结束后，在屏幕上显示运行结果，吸样针移动到位以便接受新的标本。当前的运行数据将保存在数据记录中。8.1.7 测试下一个标本重复以上操作。9. 结果的分析与判断：在仪器显示屏上将显示结果10. 质量控制10.1 三种质量控制品（高、中、低），分别对应三种靶值，做出来的质控品不能超出质控靶值的上下限范围，否则实验无效。10.2 计算方法当结果出现差异时用下列方法校正Coll= (Xct/Zct)Col2式中： Coll新质控调整系数Col2原质控调整系数Xct 质控品靶值Zct 质控品测得138、1. 参考值范围：白细胞（WBC）检验：参考值：成年人45.5109/L，婴儿（两周岁以下）1112109/L，新生儿1520109/L。12. 临床意义：细菌性感染、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、白血病和应激状态（急性出血和大手术）等增多（妊娠后期、月经期、饭后、剧烈运动后可有生理性增加）。病毒感染、伤害及副伤寒、疟疾、再生障碍性贫血、极严重感染、放射性辐照、肿瘤化疗后和非白血性白血病等减少。13. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器，可到别的仪器先检验，如别的实验室无同类仪39、器，申请厂家送一台正常的代替。14. 参考文献14.1 叶应妩，王毓三，等，全国临床检验操作规程，第二版，东南大学出版社，1997，169-17314.2 ABX-MICR 60中文操作说明书 ABX-MICROS 60白细胞分类计数1. 实验原理本实验采用半导体激光器，以核酸荧光染色及流式细胞术原理分析白细胞。当全血进入白细胞通道后，通过核酸荧光染色、利用流式细胞技术半导体激光的照射形成白细胞散射图，从而计算出中性细胞、淋巴细胞，单核细脃、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞分类的数量。2. 标本采集：2.1 标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血。2.2 标本要求：2.2.1 抗凝剂采用EDTA K240、抗凝。2.2.2 用手指末梢血作白细胞检验时，最少样品量为500ul，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。3. 标本储存：2小时内完成检验，室温放置下不超过8小时，4-8保存不超过48小时。4. 标本运输：室温运输5. 标本拒收标准：污染，凝固标本不能作测定6. 试剂6.1 试剂名称：ABX血细胞分析试剂6.2 生产厂家：法国ABX6.3 试剂组成试剂1：稀释液试剂2：清洗剂试剂3：溶血素6.4 试剂储存条件及有效期：储存温度为5-30，有效期为一年，开封后的使用期限为60天。7. 仪器设备7.1 仪器名称：ABX-MICROS 60血细胞分析仪7.2 仪器厂家：法国ABX7.3 仪器型号：ABX41、-MICROS 608. 操作步骤8.1 手工模式：8.1.1 上下颠倒试管将内容物充分混匀。8.1.1上下颠倒试管将内容物充分混匀。8.1.2 轻轻取下盖子，防止血液溅出。8.1.3 将试管正确放入手工吸引管，吸引管浸入样品。8.1.4 按start键，样品开始吸取。8.1.5 当样本从管中吸出后，吸样针向上移动通过清洗块。移去标本管，盖上试管盖。8.1.6 检测循环结束后，在屏幕上显示运行结果，吸样针移动到位以便接受新的标本。当前的运行数据将保存在数据记录中。8.1.7 准备下一个样品，重复上述步骤。9. 结果的分析与判断：在仪器显示屏上将显示结果10. 质量控制10.1 三种质量控制品（42、高、中、低），分别对应三种靶值，做出来的质控品不能超出质控靶值的上下限范围，否则实验无效。10.2 计算方法当结果出现差异时用下列方法校正Coll= (Xct/Zct)Col2式中： Coll新质控调整系数Col2原质控调整系数Xct 质控品靶值Zct 质控品测得值11. 参考值范围：白细胞分类（DC）：参考值：中性粒细胞0.50.70(5070%)，嗜酸性凿粒细胞0.0050.05(0.5%5%)嗜碱性粒细胞00.01(01%)，淋巴细胞0.20.40(20%40%)和单核细胞0.030.08(3%8%)。12. 临床意义：中性粒细胞增多见于急性化脓性细菌感染、粒细胞白血病、急性出血、溶血、43、手术后和尿毒症等；其减少见于伤寒和副伤寒、疟疾、粒细胞缺乏症、放射性辐照和肿瘤化疗。嗜碱性粒细胞增多见于过敏性疾病、寄生虫病等；其减少见于伤寒和副伤寒等。嗜碱性粒细胞增多见于慢性粒细胞白血病、何杰金氏病和铅中毒等。淋巴细胞增多见于病毒感染，其减少见于免疫缺陷病。单核细胞增多见于某些细菌感染及单核细胞白血病等。13. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器，可到别的仪器先检验，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台正常的代替。14. 参考文献14.1叶应妩，王毓三，等，全国临床检验操作规程，第44、二版，东南大学出版社，1997，169-17314.2 ABX-MICROS 60中文操作说明书 ABX-MICROS 60血红蛋白检测1. 实验原理被稀释的血液的加入溶血剂后，红细胞溶解，释放血红蛋白，后者与溶血剂结合形成血红蛋白衍生物，进入血红蛋白测试系统，在特定波长（一般在530-550nm）下比色，吸光度的变化与液体中Hb含量成比例，仪器便可显示Hb浓度。2. 标本采集：2.1 标本种类：新抽取的凝血或手指末梢血2.2 标本要求：2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝2.2.2 用手指末梢血作白细胞检验时，最少样品量为200ul，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。3. 标本储存：2小时45、内完成检验，室温放置下不超过8小时，4-8保存不超过48小时。4. 标本运输：室温运输5. 标本拒收标准：污染，凝固标本不能作测定6. 试剂6.1 试剂名称:ABX-MICR 60血细胞分析仪6.2 生产厂家：法国ABX6.3 试剂组成试剂1：稀释液试剂2：清洗剂试剂3：溶血素6.4 试剂储存条件及有效期：储存温度为10-30，有效期为一年，开封后的使用期限为60天。7. 仪器设备7.1 仪器名称：ABX血细胞分析仪7.2 仪器厂家：法国ABX7.3 仪器型号：ABX-MICROS 608. 操作步骤8.1 手工模式：8.1.1 上下颠倒试管将内容物充分混匀。8.1.2 轻轻取下盖子，防止血液46、溅出。8.1.3 将试管正确放入手工吸引管，吸引管浸入样品。8.1.4 按start键，样品开始吸取。8.1.5 当样本从管中吸出后，吸样针向上移动通过清洗块。移去标本管，盖上试管盖。8.1.6 检测循环结束后，在屏幕上显示运行结果，吸样针移动到位以便接受新的标本。当前的运行数据将保存在数据记录中。8.1.7 准备下一个样品，重复上述步骤。9. 结果的分析与判断：在仪器显示屏上将显示结果10. 质量控制10.1 三种质量控制品（高、中、低），分别对应三种靶值，做出来的质控品不能超出质控靶值的上下限范围，否则实验无效。10.2 计算方法当结果出现差异时用下列方法校正Coll= (Xct/Zct)47、Col2式中： Coll新质控调整系数Col2原质控调整系数Xct 质控品靶值Zct 质控品测得值12. 参考值范围：参考值：2731(pg)13 临床意义13.1 大细胞性贫血：大于参考值高值。13.2 单纯小细胞性贫血和小细胞低色素性贫血：小于参考值低值。14. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器，可到别的仪器先检验，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台正常的代替。15. 参考文献15.1叶应妩，王毓三，等，全国临床检验操作规程，第二版，东南大学出版社，1997，169-1731548、.2 ABX-MICROS 60中文操作说明书 全血血细胞沉降率测定（B-ESR）(魏氏法)1. 实验原理离体抗凝血液置于特制刻度测定管（魏氏法血沉管）内，垂直立于室温中，一定时间时观察上层血浆高度的毫米数值报告之。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：无需特殊准备。2.2 标本种类：静脉抗凝血（109mmol/L枸橼酸钠溶液抗凝）。2.3 标本要求：标本采集时避免脂肪血、溶血。 3. 标本储存：标本要在采集后，3h内测定，并充分混匀；尽量放在1825室温下测定。 4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：脂肪血、溶血标本。6. 操作步骤6.1 取血沉管（300mm*2.5mm）一支，49、吸取抗凝血至“0”刻度处，拭去管外附着的血液，将管直立在血沉架上 。6.2 记时，室温中静止1h。7. 结果判断与分析：观察血浆高度，以红细胞下沉的毫米数报告之。8. 临床意义8.1 生理性增高：年幼小儿、经期、妊娠3个月至产后1个月。8.2 病理性增高： 急性炎症、结缔组织病、活动性结核、风湿热活动期、组织严重破坏、贫血、恶性肿瘤、高球蛋白血症、重金属中毒等。9. 参考值：男：15mm/60min； 女：20mm/60min10. 操作性能：方法简单11. 方法局限性11.1 室温过低、过高和贫血时，对结果都有影响。11.2 室温过低时血沉减慢，无法校正。12. 参考文献中国人民共和国卫生部50、医政司编.全国临床检验操作规程（第二版）.1997,14.13. 注意事项13.1 红细胞在单位时间内下沉的速度与血浆蛋白的量和质，血浆中脂类的量和质，红细胞的大小与数量，是否呈缗钱相聚以及血沉管的内径、清洁度、放置位置是否垂直，室温高低等因素都有关系。13.2 血液和抗凝剂比例要准确。13.3 血沉管内径要标准（2.5mm）,放置要垂直。13.4 室温过高时血沉加快，可以按温度系数校正。ABX-MICROS 60红细胞比积的测定1. 实验原理当红细胞通过计数孔计数时，其体积的大小与之产生的脉冲的大小成正比，血球压积正是基于此原理测出的，血球压积以百分比表示，可由一公式算出，即红细胞总体积或累51、积容积与1：50000稀释全血体积的比较，其公式如下：HCT（样本中RBC体积/样本体积）100%2. 标本采集：2.1 标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血。2.2 标本要求：2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝2.2.2 用手指末梢血作白细胞检验时，最少样品量为500ul，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。3. 标本储存：2小时内完成检验，室温放置下不超过8小时，4-8保存不超过48小时。4. 标本运输：室温运输5. 标本拒收标准：污染，凝固标本不能作测定6. 试剂6.1 试剂名称: ABX血细胞分析试剂6.2 生产厂家：法国ABX6.3 试剂组成试剂1：稀释液试剂2：清洗剂试剂3：溶血52、素6.4 试剂储存条件及有效期：储存温度为10-30，有效期为一年，开封后的使用期限为60天。7. 仪器设备7.1 仪器名称：ABX-MICROS 60血细胞分析仪7.2 仪器厂家：法国ABX7.3 仪器型号ABX-MICROS 608. 操作步骤8.1 手工模式：8.1.1 上下颠倒试管将内容物充分混匀。8.1.2 轻轻取下盖子，防止血液溅出。8.1.3 将试管正确放入手工吸引管，吸引管浸入样品。8.1.4 按start键，样品开始吸取。8.1.5 当样本从管中吸出后，吸样针向上移动通过清洗块。移去标本管，盖上试管盖。8.1.6 检测循环结束后，在屏幕上显示运行结果，吸样针移动到位以便接受新53、的标本。当前的运行数据将保存在数据记录中。8.1.7 准备下一个样品，重复上述步骤9. 结果的分析与判断：在仪器显示屏上将显示结果10. 质量控制10.1 三种质量控制品（高、中、低），分别对应三种靶值，做出来的质控品不能超出质控靶值的上下限范围，否则实验无效。10.2 计算方法当结果出现差异时用下列方法校正Coll= (Xct/Zct)Col2式中： Coll新质控调整系数Col2原质控调整系数Xct 质控品靶值Zct 质控品测得值11. 参考值范围：红细胞比积（Ht）检验：参考值：男性0.420.49（42%49%），女性0.370.43和新生儿0.490.54。12. 临床意义：失水和大54、面积烧伤等所致的血液浓缩以及真性红细胞增多症时增高。贫血及血液稀释时下降。13. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器，可到别的仪器先检验，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台正常的代替。14. 参考文献14.1 叶应妩，王毓三，等，全国临床检验操作规程，第二版，东南大学出版社，1997，169-17314.2 ABX-MICROS 60中文操作说明书ABX-MICROS 60平均红细胞体积检测1. 实验原理由微处理器计算而得：MCV由RBC和HCT计算得出：MCV(l)HCT(%)/R55、BC(106/l)102. 标本采集：2.1 标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血。2.2 标本要求：2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝2.2.2 用手指末梢血作白细胞检验时，最少样品量为500ul，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。3. 标本储存：2小时内完成检验，室温放置下不超过8小时，4-8保存不超过48小时。4. 标本运输：室温运输5. 标本拒收标准：污染，凝固标本不能作测定6. 试剂6.1试剂名称:ABX-MICR 60血细胞分析仪6.2 生产厂家：法国ABX6.3 试剂组成试剂1：稀释液试剂2：清洗剂试剂3：溶血素6.4 试剂储存条件及有效期：储存温度为10-30，有效期为一年56、，开封后的使用期限为60天。7. 仪器设备7.1 仪器名称：ABX血细胞分析仪7.2 仪器厂家：法国ABX7.3 仪器型号：ABX-MICR 608. 操作步骤8.1 手工模式：8.1.1 上下颠倒试管将内容物充分混匀。8.1.2 轻轻取下盖子，防止血液溅出。8.1.3 将试管正确放入手工吸引管，吸引管浸入样品。8.1.4 按start键，样品开始吸取。8.1.5 当样本从管中吸出后，吸样针向上移动通过清洗块。移去标本管，盖上试管盖。8.1.6 检测循环结束后，在屏幕上显示运行结果，吸样针移动到位以便接受新的标本。当前的运行数据将保存在数据记录中。8.1.7 准备下一个样品，重复上述步骤9. 57、结果的分析与判断：在仪器显示屏上将显示结果10. 质量控制10.1 三种质量控制品（高、中、低），分别对应三种靶值，做出来的质控品不能超出质控靶值的上下限范围，否则实验无效。10.2 计算方法当结果出现差异时用下列方法校正Coll= (Xct/Zct)Col2式中： Coll新质控调整系数Col2原质控调整系数Xct 质控品靶值Zct 质控品测得值11. 参考值范围：红细胞平均体积（MCV）：参考值：成人79101fl，儿童7389f1和新生儿可达105fl。12. 临床意义：用于贫血分类：增大为巨红细胞性贫血，减小为小细胞性贫血（如严重缺铁性贫血）和遗传性球型红细胞增多症；正常红细胞性贫血时58、正常。13. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器，可到别的仪器先检验，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台正常的代替。14. 参考文献14.1 全国临床检验操作规程 叶应妩 王毓三主编第二版 1997 第6-7页14.2 ABX-MICR 60 中文操作说明书ABX-MICROS 60血小板(PLT)测定1. 实验原理直流电电阻法的直流电测量系统的白细胞检测部件带有口径与细胞大小尺寸相同计数孔的传感器相同计数孔的传感器，与每个传感器相毗连的是一个内电极和一个外电极。传感器和电极插在一种59、导电的稀释液中。在内外电极之间通过稀释液传导着一恒定的直流电电流(DC)。非导电性的白细胞悬浮在导电的稀释液中,在计数过程中当一个细胞通过计数孔时，使电极间的电阻增加。该电阻是与细胞体积成正比的。从而引起电极间电压差的改变。电压的改变被称为细胞脉冲。此原理是以欧姆定律为基础的。表达式如下：E=IR式中E为电压,I为电流,R为电阻。由于电流(I)是恒定的,任何原因(如细胞)引起电阻(R)的升高。将导致电压差（E）成正比的改变。这些电压的微小改变被放大，电子干扰或假信号则被滤波电路所消除。经放大的细胞脉冲被传递至PDA(颗粒分布分析)电路以产生直方图。本仪器增加了核酸荧光染色技术，对电阻搞法检测不60、了的血小板进行染色后可计算出血小板的数量。2. 标本采集：2.1 标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血。2.2 标本要求：2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝2.2.2 用手指末梢血作白细胞检验时，最少样品量为500ul，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。3. 标本储存：2小时内完成检验，室温放置下不超过8小时，4-8保存不超过48小时。4. 标本运输：室温运输5. 标本拒收标准：污染，凝固标本不能作测定6. 试剂6.1 试剂名称：ABX-MICR 60血细胞分析仪6.2 生产厂家：法国ABX6.3 试剂组成试剂1：稀释液试剂2：清洗剂试剂3：溶血素6.4 试剂储存条件及有效期：储存温度为161、0-30，有效期为一年，开封后的使用期限为60天。7. 仪器设备7.1 仪器名称：ABX血细胞分析仪7.2 仪器厂家：法国ABX7.3 仪器型号：ABX-MICR 608. 操作步骤8.1 手工模式：8.1.1 上下颠倒试管将内容物充分混匀。8.1.2 轻轻取下盖子，防止血液溅出。8.1.3 将试管正确放入手工吸引管，吸引管浸入样品。8.1.4 按start键，样品开始吸取。8.1.5 当样本从管中吸出后，吸样针向上移动通过清洗块。移去标本管，盖上试管盖。8.1.6 检测循环结束后，在屏幕上显示运行结果，吸样针移动到位以便接受新的标本。当前的运行数据将保存在数据记录中。8.1.7 准备下一个样62、品，重复上述步骤9. 结果的分析与判断：在仪器显示屏上将显示结果10. 质量控制10.1 三种质量控制品（高、中、低），分别对应三种靶值，做出来的质控品不能超出质控靶值的上下限范围，否则实验无效。10.2 计算方法当结果出现差异时用下列方法校正Coll= (Xct/Zct)Col2式中： Coll新质控调整系数Col2原质控调整系数Xct 质控品靶值Zct 质控品测得11. 参考值范围：(100-300)1O9/L 11.1 增加：骨髓增生综合征：漫性粒细胞性白血病、真性红细胞增多症等、急性反应（急性感染、急性失血、急性溶血等）脾切除术后。11.2 减少：血小板生成障碍（再生障碍性贫血、急性白63、血病、急性放射病等）血小板破坏增多：（ITP、脾亢、血小板消耗过多：DIC、家族性血小板减少）12. 临床意义12.1 骨髓增生综合征：漫性粒细胞性白血病、真性红细胞增多症等、急性反应（急性感染、急性失血、急性溶血等）脾切除术后。12.2 小板生成障碍（再生障碍性贫血、急性白血病、急性放射病等）血小板破坏增多：（ITP、脾亢、血小板消耗过多：DIC、家族性血小板减少）。13. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器，可到别的仪器先检验，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台正常的代替。14.64、 参考文献14.1 叶应妩，王毓三，等，全国临床检验操作规程，第二版，东南大学出版社，1997，169-17314.2 ABX-MICR 60操作说明书ABX-MICROS 60红细胞平均血红蛋白含量(MCH)测定1. 实验原理由微处理器计算而得：MCH由RBC和Hb计算得出：MCH(pg)Hb(g/dL)/RBC(106/l)102. 标本采集：2.1 标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血。2.2 标本要求：2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝2.2.2 用手指末梢血作白细胞检验时，最少样品量为500ul，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。3. 标本储存：2小时内完成检验，室温放置下不超过65、8小时，4-8保存不超过48小时。4. 标本运输：室温运输5. 标本拒收标准：污染，凝固标本不能作测定6. 试剂6.1 试剂名称:ABX-MICR 60血细胞分析仪6.2 生产厂家：法国ABX6.3 试剂组成试剂1：稀释液试剂2：清洗剂试剂3：溶血素6.4 试剂储存条件及有效期：储存温度为10-30，有效期为一年，开封后的使用期限为60天。7. 仪器设备7.1 仪器名称：ABX血细胞分析仪7.2 仪器厂家：法国ABX7.3 仪器型号：ABX-MICR 608. 操作步骤8.1 手工模式：8.1.1 上下颠倒试管将内容物充分混匀。8.1.2 轻轻取下盖子，防止血液溅出。8.1.3 将试管正确放入66、手工吸引管，吸引管浸入样品。8.1.4 按start键，样品开始吸取。8.1.5 当样本从管中吸出后，吸样针向上移动通过清洗块。移去标本管，盖上试管盖。8.1.6 检测循环结束后，在屏幕上显示运行结果，吸样针移动到位以便接受新的标本。当前的运行数据将保存在数据记录中。8.1.7 准备下一个样品，重复上述步骤9. 结果的分析与判断：在仪器显示屏上将显示结果10. 质量控制10.1 三种质量控制品（高、中、低），分别对应三种靶值，做出来的质控品不能超出质控靶值的上下限范围，否则实验无效。10.2 计算方法当结果出现差异时用下列方法校正Coll= (Xct/Zct)Col2式中： Coll新质控调整67、系数Col2原质控调整系数Xct 质控品靶值Zct 质控品测得值11. 参考值范围：红细胞平均体积（MCV）：参考值：成人79101fl，儿童7389f1和新生儿可达105fl。12. 临床意义：用于贫血分类：增大为巨红细胞性贫血，减小为小细胞性贫血（如严重缺铁性贫血）和遗传性球型红细胞增多症；正常红细胞性贫血时正常。13. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器，可到别的仪器先检验，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台正常的代替。14. 参考文献14.1 叶应妩，王毓三，等，全国临床检验68、操作规程，第二版，东南大学出版社，1997，第6-7页14.2 ABX-MICR 60操作说明书ABX-MICROS 60红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)测定1. 原理：由微处理器计算而得：MCHC由HCT和Hb计算得出：MCHC(g/dl)Hb(g/dL)/HCT(%)1002. 标本采集：2.1 标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血。2.2 标本要求：2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝2.2.2 用手指末梢血作白细胞检验时，最少样品量为500ul，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。3. 标本储存：2小时内完成检验，室温放置下不超过8小时，4-8保存不超过48小时。4. 标本运输：室温69、运输5. 标本拒收标准：污染，凝固标本不能作测定6. 试剂6.1试剂名称:ABX-MICR 60血细胞分析仪6.2 生产厂家：法国ABX6.3 试剂组成试剂1：稀释液试剂2：清洗剂试剂3：溶血素6.4 试剂储存条件及有效期：储存温度为10-30，有效期为一年，开封后的使用期限为60天。7. 仪器设备7.1 仪器名称：ABX血细胞分析仪7.2 仪器厂家：法国ABX7.3 仪器型号：ABX-MICR 608. 操作步骤8.1 手工模式：8.1.1 上下颠倒试管将内容物充分混匀。8.1.2 轻轻取下盖子，防止血液溅出。8.1.3 将试管正确放入手工吸引管，吸引管浸入样品。8.1.4 按start键，70、样品开始吸取。8.1.5 当样本从管中吸出后，吸样针向上移动通过清洗块。移去标本管，盖上试管盖。8.1.6 检测循环结束后，在屏幕上显示运行结果，吸样针移动到位以便接受新的标本。当前的运行数据将保存在数据记录中。8.1.7 准备下一个样品，重复上述步骤9. 结果的分析与判断：在仪器显示屏上将显示结果10. 质量控制10.1 三种质量控制品（高、中、低），分别对应三种靶值，做出来的质控品不能超出质控靶值的上下限范围，否则实验无效。10.2 计算方法当结果出现差异时用下列方法校正Coll= (Xct/Zct)Col2式中： Coll新质控调整系数Col2原质控调整系数Xct 质控品靶值Zct 质控71、品测得11. 参考值范围：320360(g/L)12. 临床意义12.1 大细胞性贫血、正常细胞性贫血和单纯小细胞性贫血：MCHC正常12.2 小细胞低色素性贫血：小于参考值低值。13. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器，可到别的仪器先检验，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台正常的代替。尿液酸碱度测定（干法学法）1. 实验原理通过PH指示剂测定4.5-9的范围内的PH值，正常人的新鲜尿液PH值在5-7之间。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：以清晨第一次尿为宜，急诊患者可随时72、留取。2.2 标本种类：新鲜尿液2.3 标本要求：采集患者尿液标本时，盛尿液的容器必须清洁干燥，要求留取中段尿。3. 标本储存：从排出到检测应在2小时内完成，如不能及时送检或分析，应置4下冷藏保存，但冷藏时间最长不得超过6小时。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：细菌，白带，精液，粪便，经血污染的标本拒收。6. 试剂6.1 试剂名称 迪瑞Uritest A6.2 试剂厂家 长春迪瑞医疗电子销售有限公司6.3 包装规格：100Test/kit6.4 试剂盒组成：试纸条：100条6.5 试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存于2-10或30条件下，可使用至试剂盒所标示有效期。7. 仪器设备7.73、1 仪器名称：迪瑞尿液分析仪7.2 仪器厂家：长春迪瑞医疗电子销售有限公司7.3 仪器型号：Uritest 2007.4 仪器校准程序：在使用过程中，一般是两周校准一次，如超过此期限，仪器会提示“Please Calibrate”（请校准）。通过测定内部参比块，环境温度和光学系统的改变都可被补偿。当条件改变很大时，比如参比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗，仪器将打印出一个错误信息；校准条是有稳定特征的灰白色试条，这些校准条只能使用一次。校准前，应先清洁试纸托盘与运输臂。步骤为：在“READY”显示时，按键，放上校准条。再按键，校准条被送入机器内，屏幕显示“Calibrating”（正在校准），约一74、分钟后，标准结果将被打印出。“Calibrating O.K”，表示校准成功。8. 操作步骤：8.1 按键，仪器鸣声响时将试纸浸入尿样，鸣声止后取出。8.2 用吸水纸巾吸干试纸条上残余的尿样。8.3 在传送带停止的时间内，将试纸条平放于槽中间，勿歪斜。8.4 测量完成后将自动打印出结果。9. 结果判断：仪器自动打印结果。10. 质量控制：质控尿液的应用：用人工质控尿液进行空内质控，低浓度质控液PH应为5.0，高浓度质控液PH应为8.0。11. 参考范围：随机尿PH4.6-8.0，多数在5.5-6.5，平均6.012. 临床意义12.1 正常尿液可呈弱酸性，但因饮食种类不同，PH波动范围可为5.75、4-8.4。肉食者多为酸性，食用蔬菜水果可为碱性。12.2 久置腐败尿或泌尿道感染，浓血尿均可呈碱性。磷酸盐，碳酸盐结石见于碱性尿；尿酸盐，草酸盐，胱氨酸结石见于酸性尿。酸中毒及服用氯化铵等酸性药物时尿可呈酸性。13. 操作性能：快速简便，特异性强，灵敏度高，重复性好。14. 方法局限性14.1 试带应在干燥，避光处保存，注意有效期，定期用标准质控液进行检测。14.2 按说明书操作，1min内读取结果。14.3 标本应新鲜，否则细菌繁殖会使PH增高。或因丧失挥发性酸而影响结果的准确性。14.4 尿液PH还可作为其他检查项目的质控指标，若PH9均会影响其他检测结果。如蛋白质，比密等，应按规定进行76、调整。15. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系仪器厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。16. 参考文献16.1 王毓三 主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司，1997，北京：118.16.2 刘成玉 主编.临床检验基础实验指导.人民卫生出版社2002,北京：87-88.尿葡萄糖定性实验（干化学法）1. 实验原理根据葡萄糖氧化酶法反应原理，葡萄糖氧化酶特异氧化-D-葡萄糖，生成葡萄糖醛酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下77、，使指示剂氧化而呈现出蓝色。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：以清晨第一次尿为宜，急诊患者可随时留取。2.2 标本种类：新鲜尿液2.3 标本要求：采集患者尿液标本时，盛尿液的容器必须清洁干燥，要求留取中段尿。3. 标本储存：从排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析，应置4下冷藏保存，但冷藏时间不得超过6小时。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：细菌，经血，白带，精液，粪便污染标本不能作测定。6. 试剂6.1 试剂名称：迪瑞6.2 试剂厂家：长春迪瑞医疗电子销售有限公司6.3 包装规格：100Test/kit6.4 试剂盒组成：试纸条：100条6.5 试剂储存条件及有78、效期：试剂盒贮存于2-10条件下，可使用至试剂盒所标示有效期。7. 仪器设备7.1 仪器名称：迪瑞尿液分析仪7.2 仪器厂家：长春迪瑞医疗电子销售有限公司7.3 仪器型号：H-1007.4 仪器校准程序：在使用过程中，一般是两周校准一次，如超过此期限，仪器会提示“Please Calibrate”（请校准）。通过测定内部参比块，环境温度和光学系统的改变都可被补偿。当条件改变很大时，比如参比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗，仪器将打印出一个错误信息；校准条是有稳定特征的灰白色试条，这些校准条只能使用一次。校准前，应先清洁试纸托盘与运输臂。步骤为：在“READY”显示时，按键，放上校准条。再按键，校准79、条被送入机器内，屏幕显示“Calibrating”（正在校准），约一分钟后，标准结果将被打印出。“Calibrating O.K”，表示校准成功。8. 操作步骤：8.1 按键，仪器仪器鸣声响时将试纸浸入尿样，鸣声止后取出。8.2 用吸水纸巾吸干试纸条上残余的尿样。8.3 在传送带停止的时间内，将试纸条平放于槽中间，勿歪斜。8.4 每一个测量完成后将自动打印出结果。9. 结果判断：不变色（-），浅灰色（+），灰色（+），灰蓝色（+），紫蓝色（+）10. 质量控制：阳性质控液的使用，低浓度质控液（葡萄糖3g/L）定性为（+），高浓度质控液（15g/L）定性为（+）。11. 参考范围：阴性12. 临80、床意义：尿糖阳性见于：糖尿病，肾性糖尿病，甲状腺机能亢进等。内服或注射大量葡萄糖及精神激动等也可致阳性反应。13. 操作性能：快速简便，特异性强，灵敏度高，具有半定量作用。14. 方法局限性14.1 试带应避光干燥保存。14.2 灵敏度受尿比密及温度的影响，浓缩尿灵敏度低，温度高时灵敏度高。14.3 本法也受VitC等还原性物质的影响，处理方法同班氏法。15. 注意事项15.1 容器要清洁，不含氧化性物质，最好使用一次性尿杯。15.2 如气温较高，标本不宜长时间存放，以免细菌繁殖消耗尿中葡萄糖，造成假阴性结果。15.3 VitC对测定有影响，注射大剂量VitC后5天内不做尿糖定性。如确实需要测81、定，先将尿液煮沸几分钟后再进行测定。15.4 注意高比密尿或高酮体尿对试带法的影响。必要时可用班氏法辅助确定阳性程度。15.5 尿糖定性实验只是作为糖尿病的筛检试验，如需确诊或进行动态观察，必须结合血糖定量检查。16. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系仪器厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。17. 参考文献17.1 叶应妩 王毓三 主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司，1997，北京：125-12617.2 刘成玉 主编.临82、床检验基础实验指导.人民卫生出版社,2002,北京：103-104尿蛋白定性测定（干法学法）1. 实验原理根据指示剂蛋白误差原理，蛋白质与染料结合形成复合物产生色变，特别是对白蛋白的反应比对球蛋白、血红蛋白、本-周氏蛋白和粘蛋白更为灵敏。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：以清晨第一次尿为宜，急诊患者可随时留取。2.2 标本种类：新鲜尿液2.3 标本要求：采集患者尿液标本时，盛尿液的容器必须清洁干燥，要求留取中段尿。3. 标本储存：从排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析，应置4下冷藏保存，但冷藏时间不得超过6小时。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：细菌，经血，白带83、，精液，粪便污染标本不能作测定。6. 试剂6.1 试剂名称：迪瑞6.2 试剂厂家：长春迪瑞医疗电子销售有限公司6.3 包装规格：100Test/kit6.4 试剂盒组成：试纸条：100条6.5 试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存于2-30条件下，可使用至试剂盒所标示有效期。7. 仪器设备7.1 仪器名称：迪瑞尿液分析仪7.2 仪器厂家：长春迪瑞医疗电子销售有限公司7.3 仪器型号：H-1007.4 仪器校准程序：在使用过程中，一般是两周校准一次，如超过此期限，仪器会提示“Please Calibrate”（请校准）。通过测定内部参比块，环境温度和光学系统的改变都可被补偿。当条件改变很大时，比如参84、比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗，仪器将打印出一个错误信息；校准条是有稳定特征的灰白色试条，这些校准条只能使用一次。校准前，应先清洁试纸托盘与运输臂。步骤为：在“READY”显示时，按键，放上校准条。再按键，校准条被送入机器内，屏幕显示“Calibrating”（正在校准），约一分钟后，标准结果将被打印出。“Calibrating O.K”，表示校准成功。8. 操作步骤：8.1 按键，仪器仪器鸣声响时将试纸浸入尿样，鸣声止后取出。8.2 用吸水纸巾吸干试纸条上残余的尿样。8.3 在传送带停止的时间内，将试纸条平放于槽中间，勿歪斜。8.4 每一个测量完成后将自动打出结果8.1 按键，显示“Prep85、are Strip”,此时试条筒中拿出试条。9. 结果判断：淡黄色（-），淡黄绿色（+/-），黄绿色（+），绿色（+），灰绿色（+），灰兰色（+）10. 质量控制：质控液的使用，低浓度质控液（蛋白质1.5g/L）蛋白定性应为（+）；高浓度质控液（10g/L）蛋白定性为（+）。11. 参考范围：阴性12. 临床意义：分为功能性，体位性，病理性蛋白尿，后者见于肾炎，肾病综合症。13. 操作性能：快速简便，特异性强，灵敏度高，重复性好。14. 方法局限性14.1 试带应干燥，避光保存，远离酸性和碱性物质。避免用（湿）手触摸试带的试剂垫部分，以防试带污染失效。14.2 浑浊尿不影响比色，但尿液颜色异常86、（如血尿，血红蛋白尿，胆红素尿）将影响结果的观察。15. 注意事项15.1 干扰因素的控制与分析15.1.1 PH：尿液偏碱时（PH9），干化学试带法可呈假阳性；尿液偏酸（PH3）则会引起蛋白假阴性。因此，实验前需先将尿液PH调至56。15.1.2 药物：当患者应用大剂量青霉素钾盐，庆大霉素，磺胺，PAS，含碘照影剂时，可使化学试带法呈假阴性。15.1.3 反应时间和标本量：试带法需要足够的反应时间和标本量，因此检测时要求试带充分浸湿，但不宜长时间浸泡。时间过短，标本不足，反应不完全使结果偏低；时间太长使试带上包埋的药物洗脱至尿中，也会导致结果偏低。15.2 试带的差异：不同厂家不同批号的试带87、显色有差异，故强调使用严格标准化的试带。16. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系仪器厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。17. 参考文献17.1 叶应妩 王毓三 主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司，1997，北京：12117.2 刘成玉 主编.临床检验基础实验指导.人民卫生出版社，2002，北京：95-96尿血红蛋白测定（干化学法）1. 实验原理根据血红蛋白接触活性法原理，通过血红蛋白的类过氧化酶样作用催化分解过氧化物，使88、邻联甲苯胺氧化呈色。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：以清晨第一次尿为宜，急诊患者可随时留取。2.2 标本种类：新鲜尿液2.3 标本要求：采集患者尿液标本时，盛尿液的容器必须清洁干燥，要求留取中段尿。3. 标本储存：从排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析，应置4下冷藏保存，但冷藏时间不得超过6小时。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：细菌，经血，白带，精液，粪便污染标本不能作测定。6. 试剂6.1 试剂名称：迪瑞H-100系列尿试纸。6.2 试剂厂家：长春市医疗电子仪器厂。6.3 包装规格：100人分/桶。6.4 试剂盒组成：试纸条：100条6.5 试剂储存条件及89、有效期：试剂盒贮存于2-10条件下，可使用至试剂盒所标示有效期。7. 仪器设备7.1 仪器名称：迪瑞H-100尿液分析仪7.2 仪器厂家：长春市医疗电子仪器厂7.3 仪器型号：迪瑞H-100 8. 操作步骤：8.1 按键，仪器仪器鸣声响时将试纸浸入尿样，鸣声止后取出。8.2 用吸水纸巾吸干试纸条上残余的尿样。8.3 在传送带停止的时间内，将试纸条平放于槽中间，勿歪斜。8.4 每一个测量完成后将自动打出结果。9. 结果判断：浅黄色为（），浅绿色为（），绿色为（），深绿色为（）10. 质量控制：质控尿液的应用：用人工质控尿液进行空内质控，低浓度质控液应为（），高浓度质控液应为（）。11. 参考范围90、：阴性12. 临床意义：正常人尿液中无游离血红蛋白。当体内大量溶血，尤其是血管内溶血，血液中游离血红蛋白可大量增加，当超过1.0-1.35g/L时，即出现血红蛋白尿。此种情况常见于血型不合输血，阵发性睡眠性血红蛋白尿，寒冷性血红蛋白尿，急性溶血性疾病等。还可见于各种病毒感染，链球菌败血症，疟疾，大面积烧伤，体外循环，肾透析，手术后所致的红细胞大量破坏等。13. 操作性能：快速简便，特异性强，灵敏度高，重复性好。14. 方法局限性14.1 试带应妥善保存，注意有效期并避免污染。14.2 尿液必须新鲜，以免因红细胞破坏，导致干化学试带法与显微镜检查的人为误差。14.3 各种原因导致尿中出现红细胞，91、可致假阳性。14.4 VitC对本实验有抑制作用，可致假阴性。14.5 尿路感染时，由于细菌产生过氧化物酶而引起假阳性。某些氧化物如漂白粉也可致假阳性。14.6 浓缩尿，高蛋白尿可降低试带反应的灵敏度。14.7 试带上出现绿色斑点提示为完整红细胞所致。15. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施当检验系统（仪器）不能工作时，可联系仪器厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。16. 参考文献16.1 叶应妩 王毓三 主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司，1997，北京：192、2416.2 刘成玉 主编.临床检验基础实验指导.人民卫生出版社，2002，北京：122-123尿胆原定性测定（干法学法）1. 实验原理根据偶氮结合法的原理，尿胆原在强酸条件下和重氮盐偶联形成胭脂红色素。 2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：以清晨第一次尿为宜，急诊患者可随时留取。2.2 标本种类：新鲜尿液2.3 标本要求：采集患者尿液标本时，盛尿液的容器必须清洁干燥，要求留取中段尿。3. 标本储存：排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析，应置4下冷藏保存，但冷藏时间不得超过6小时。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：细菌，经血，白带，精液，粪便污染标本不能作测定。693、. 试剂6.1 试剂名称：迪瑞 UritestA 系列尿试纸。6.2 试剂厂家：长春市医疗电子仪器厂。6.3 包装规格：100人分/桶。6.4 试剂盒组成：试纸条：100条6.5 试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存于2-10条件下，可使用至试剂盒所标示有效期。7. 仪器设备7.1 仪器名称：迪瑞H-100尿液分析仪7.2 仪器厂家：长春市医疗电子仪器厂7.3 仪器型号：迪瑞H-1008. 操作步骤：8.1 按键，仪器仪器鸣声响时将试纸浸入尿样，鸣声止后取出。8.2 用吸水纸巾吸干试纸条上残余的尿样。8.3 在传送带停止的时间内，将试纸条平放于槽中间，勿歪斜。8.4 每一个测量完成后将自动打出结果94、。9. 结果判断：不变色（），浅红色()，红色()，深红色()。10. 质量控制：质控尿液的应用：用人工质控尿液进行空内质控，低浓度质控液应为（），高浓度质控液应为（）。11. 参考范围：阴性或弱阳性。12. 临床意义：12.1 正常人为弱阳性反应，尿液稀释20倍后多为阴性。12.2 尿胆原阴性常见于完全阻塞性黄疸。12.3 尿胆原增加常见于溶血性疾患及肝实质性病变如肝炎。13. 操作性能：快速简便，特异性强，灵敏度高，重复性好。14. 方法局限性14.1 由于醛反应快速，应在规定时间内观察结果.14.2 卟胆原，内生性吲哚，黑色素原可造成假阳性。14.3 阳性反应时稀释的方法同改良Ehrli95、ch。14.4 尿液要新鲜。15. 注意事项：15.1 阳性程度与饮水量有关，夜间和上午排泄较少，午餐后迅速增高。而且尿胆原的清除率与尿液PH有关，PH为5.0时，排泄率为2ml/min；而为8.0时，排泄率为25ml/min。测试前应嘱患者口服少量NaHCO3使尿液碱化，留取午餐后2-4时尿液做尿胆原定性。检测前再以乙酸调节PH至弱酸性。15.2 若尿胆原定性阴性，可加做尿胆素定性试验予以验证，以免因标本久置造成假阴性。15.3 长期应用抗生素可抑制肠道菌群，严重腹泻也会影响胆红素转变为尿胆原，造成结果阴性。长期便秘使尿胆原过度吸收，定性时阳性程度增高，分析结果时应注意。16. 当检验系统（96、仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系仪器厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。17. 参考文献17.1 王毓三 主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司，1997，北京：12917.2 刘成玉 主编. 临床检验基础实验指导.人民卫生出版社.2002，北京：109-110脑脊液蛋白定性试验（潘氏法）1. 实验原理脑脊液中球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀。2. 标本采集：2.1 标本种类：脑脊液，由临床医师进行腰椎穿刺采97、集，必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。2.2 标本要求：将脑脊液分别收集于3个无菌试管中，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查，第三管作一般性状及显微镜检查。每管收集1-2毫升。2.3 遇高蛋白标本时可采用EDTA K2抗凝。3. 标本储存：立即送检。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：污染，久置标本。6 试剂：5%苯酚溶液：取纯苯酚25ml,加蒸馏水至500ml，用力振摇，置37温箱内1-2天，待完全溶解后，置棕色瓶内保存。7. 操作步骤：取潘氏试剂2-3ml于小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液1-2滴，衬以黑背景，立即观察结果。8. 结果判断阴性：清晰透明，不显雾状极弱98、阳性（）：微呈白雾状，在黑色背景下才能看到弱阳性（+）：灰白色云雾状阳性（+）：白色浑浊强阳性（3+）：白色浓絮状沉淀最强阳性（4+）：白色凝块9. 质量控制 抽取样本进行室内工作人员比对分析，要求差异在10以内。10. 临床意义10.1 脑脊液蛋白质含量增加，提示患者血脑屏障受破坏，常见于脑、脊髓及脑膜的炎症、肿瘤、出血等以及脑软化、脑退化性疾病、神经根病变和引起脑脊液循环梗阻的疾病等，当脑脊液中蛋白质在10g/L以上时，流出后呈黄色胶冻状凝固，而且还有蛋白-细胞分离现象，临床上称为Froin综合征，是蛛网膜下腔梗阻性脑脊液的特征。10.2 含血的脑脊液可使蛋白质含量增加，为鉴别原来有无蛋白99、质增加，可用每微升1万个红细胞的相当增加蛋白质80mg/L来推算，最后用含血的脑脊液中实测的蛋白质量减去出血时从血中带入的蛋白质量由含红细胞数推算成的蛋白质量，即为原来脑脊液的蛋白质含量。常见中枢神经系统疾病的脑脊液检查特点压力（kpa）外观蛋白质定性定量g/L葡萄糖（mmol/L）氯化物(mmol/L)细胞总数及分类细菌正常人无色透明-120-130(0-10)106/L多为淋巴细胞无化脓性脑膜炎混浊有凝块2+以上显著增加，以中性粒细胞为主可发现致病菌结核性脑膜炎毛玻璃样混浊有薄膜形成+2+增加，早期以中性粒细胞为主，其后以淋巴细胞为主找到抗酸性杆菌或结核培养阳性病毒性脑膜炎清晰或微混+正常100、正常增加以淋巴细胞为主无新型隐球菌脑膜炎清晰或微混增加以淋巴细胞为主新型隐球菌脑室及珠网膜下腔出血脑瘤血性+2+正常增加以红细胞为主无脑脊髓梅毒清晰+正常正常增加以淋巴细胞为主无11. 方法学评价：潘氏试验所需标本量少，灵敏度高，试剂易得，操作简便，结果易于观察，其沉淀多少与蛋白质含量成正经比，部分正常脑脊液亦可出现极弱阳性结果。Ross Jine试验主要沉淀的是球蛋白，但敏感性较弱，NoneApett试验可分别检测球蛋白和白蛋白，但操作较繁，极少选用。12. 变异的潜在来源12.1 取材不当。12.2 涂片过厚或过薄，影响形态观察。13 操作注意事项：脑脊液标本必须立即送验及时检查，放置过久101、将影响检验结果，使细胞破坏、变性、或细胞包裹于纤维蛋白凝块中，导致细胞数降低、分类不准确等。存放中的脑脊液葡萄糖会分解，使之含量降低；细菌自溶或破坏可影响细菌检出率等。14. 参考文献：中华人民共和国卫生部医政司编。全国临床检验操作规程（第二版）17-18页。脑脊液外观检查（目测法）1. 实验原理目测脑脊液颜色、透明度、是否有凝块及薄膜。2. 标本采集：2.1 标本种类：脑脊液，由临床医师进行腰椎穿刺采集，必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。2.2 标本要求：将脑脊液分别收集于3个无菌试管中，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查，第三管作一般性状及显微镜检查。每管收集1-2毫升。2102、.3 遇高蛋白标本时可采用EDTA K2抗凝。3. 标本储存：立即送检。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：污染，久置标本。6. 操作步骤6.1 观察颜色。6.2 观察透明度。6.3 观察凝块或薄膜：收集脑脊液于试管内，静置12-24小时，正常脑脊液不形成薄膜、凝块和沉淀物。7. 结果判断与分析：7.1颜色：正常脑脊液是无色透明的液体。在病理情况下，脑脊液可呈不同颜色改变。（1）红色：常由于各种出血引起。脑脊液中出现多量的红细胞，主要由于穿刺损伤出血、蛛网膜下腔或脑室出血引起。前者在留取三管标本时，第一管为血性，以后两管颜色逐渐变淡，红细胞计数结果也依次减少，经离心后上清液呈无色透明103、。当蛛网膜下腔或脑室出血时，三管呈均匀红色，离心后上清液显淡红色或黄色。红细胞在某些脑脊液中5分钟后，即可出现皱缩现象，因此红细胞皱缩现象不能用以鉴别陈旧性或新鲜出血。（2）黄色：可因出血、梗阻、郁滞、黄疸等引起。陈旧性蛛网膜下腔或脑室出血，由于红细胞缺乏蛋白质和脂类对膜稳定性的保护，很易破坏、溶解，出血4-8小时即可出现黄色。停止出血后，这种黄色仍可持续3周左右。椎管梗阻如髓外肿瘤，格林-巴利综合征，当脑脊液蛋白质量超过1.5g/L时，颜色变黄，其黄色程度与蛋白质含量呈正比。化脓性脑膜炎、重症结核性脑膜炎时，因脑脊液蛋白质含量明显增加而呈淡黄色或黄色。重症如核黄疸、新生儿溶血病时脑脊液也呈黄104、染。（3）白色或灰白色米汤样：多因白细胞增加所致常见于化脓性脑膜炎。（4）褐色或黑色：常见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色素瘤。7.2 透明度：正常脑脊液应清晰透明。病毒性脑炎、神经梅毒等疾病的脑脊液也可呈透明外观。脑脊液中白细胞如超过300106/L时可变为混浊；蛋白质含量增加或含有大量细菌、真菌等也可使其混浊；结核性脑膜炎常呈毛玻璃样微混；而化脓性脑膜炎常呈明显混浊。填写报告时用“清晰透明”、“微浑”、“浑浊”等描述。7.3 凝块或薄膜：正常脑脊液不形成薄膜、凝块和沉淀物。若脑脊液内蛋白质包括纤维蛋白质多于10g/L即可出现凝块或沉淀物，结核性脑膜炎的脑脊液静置12-24小时后，可见表面有纤维105、的网膜形成，取此膜涂片检查结核杆菌，阳性率较高。蛛网膜下隙梗阻时，由于阻塞，远端的脑脊液蛋白质含量常高达15g/L，此时脑脊液呈黄色胶冻状。填写报告时用“无凝块”、“有凝块”、“有薄膜”、“胶冻状”等描述。8. 质量控制抽取样本进行室内工作人员比对分析，要求差异在10以内。9. 操作注意事项：脑脊液标本必须立即送验及时检查，放置过久将影响检验结果，使细胞破坏、变性、或细胞包裹于纤维蛋白凝块中，导致细胞数降低、分类不准确等。存放中的脑脊液葡萄糖会分解，使之含量降低；细菌自溶或破坏可影响细菌检出率等。10. 参考文献：中华人民共和国卫生部医政司编。全国临床检验操作规程（第二版）145页。脑脊液有形106、成分检查（显微镜检查法）1. 实验原理在显微镜下对脑脊液有形成分进行计数和分类检查。2. 标本采集：2.1 标本种类：脑脊液，由临床医师进行腰椎穿刺采集，必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。2.2 标本要求：将脑脊液分别收集于3个无菌试管中，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查，第三管作一般性状及显微镜检查。每管收集1-2毫升。2.3 遇高蛋白标本时可采用EDTA K2抗凝。3. 标本储存：立即送检。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：污染，久置标本。6. 实验材料：细胞计数板；红细胞稀释液；瑞氏血细胞染色液，生产厂家：（台资）珠海贝索生物技术有限公司。7. 实验仪器：7107、.1 仪器名称：OLYMPUS 显微镜7.2 仪器厂家：OLYMPUS7.3 仪器型号：OLYMPUS CH308. 操作步骤8.1 细胞总数8.1.1 对澄清的脑脊液可混匀后用滴管直接滴入计数池，计数10个大方格内红、白细胞数，其总和即为每l的细胞数。再换算成每升脑脊液中的细胞数。如细胞较多，可计数一大格内的细胞10，即得每l脑脊液中细胞总数。如用升表示，则再乘以106。也可用生理盐水或红细胞稀释液稀释后再用人工计数，或直接用血细胞分析仪进行计数。8.1.2 浑浊或带血的脑脊液可用血红蛋白吸管吸取混匀的脑脊液20l，加入含红细胞稀释液0.38ml的小试管内，混匀后滴入计数池内，用低倍镜计数4108、个大方格中的细胞总数，乘以50，即为每l脑脊液的细胞总数。8.2 白细胞数8.2.1 非血性标本：小试管内放入冰乙酸1-2滴，转动试管，使内壁沾有冰乙酸后倾去之，然后滴加混匀的脑脊液3-4滴，数分钟后，混匀充入计数池，按细胞总数操作中的红、白细胞计数法计数。8.2.2 血性标本：将混匀的脑脊液用1%冰乙酸溶液稀释后进行计数。为剔除因出血而来的白细胞数，用下式进行校正。每l脑脊液内白细胞校正数 每l脑脊液内红细胞数每l脑脊液内白细胞数=每l脑脊液内白细胞未校正数 每l血液内红细胞数例示：血液内红细胞4 000 000/l；脑脊液内红细胞20 000/l；血液内白细胞10 000/l；脑脊液内白细109、胞60/l 20 00010 000则：60 =60-50=10 4 000 000即该患者脑脊液内白细胞之校正数为10。8.3 细胞分类8.3.1 直接分类法：白细胞计数后，将低倍镜换为高倍镜，直接在高倍镜下根据细胞核的形态分别计数单个核细胞（包括淋巴细胞及单核细胞）和多核细胞，应数100个白细胞，并以百分率表示。若白细胞少于100个，应直接写出单核、多核细胞的具体数字。8.3.2 染色分类法：如直接分类不易区分细胞时，可将脑脊液离心沉淀，取沉淀物2滴，加正常血清1滴，推片制成均匀薄膜，置室温或37温箱内待干，进行瑞氏染色后用油镜分类。如见有不能分类的细胞，应另行描述报告，如脑膜白血病或肿瘤110、时。8.4 寄生虫学检查：经沉淀涂片认真寻找虫卵、幼虫等。9. 结果判断与分析10. 质量控制：进行室内工作人员比对分析，要求差异在10以内。11. 参考范围11.1 成人脑脊液内无红细胞，白细胞极少，其参考范围：腰池中为（0-10）106/L；脑室内为（0-5）106/L；儿童为（0-15）106/L，新生儿为（0-30）106/L。如白细胞达（10-50）106/L为轻度增加，（50-100）106/L为中度增加，200106/L以上显著增加。11.2 正常脑脊液中白细胞主要为单个核细胞，多为淋巴细胞及大单核细胞，两者之比约为7：3，偶见内皮细胞：软脑膜和蛛网膜细胞、室管膜细胞、脉络膜细胞111、等。12. 临床意义12.1 中枢神经系统感染性疾病时脑脊液根据细胞病理学变化分三个不同时期：急性炎性渗出期，呈粒细胞反应；亚急性增殖期，呈激活淋巴细胞或单核-巨噬细胞反应；修复期呈淋巴细胞反应。化脓性脑膜炎的急性期变化最突出，持续时间最长；此期脑脊液细胞数每微升可高达数千，以中性粒细胞为主，当用抗生素治疗后，脑脊液细胞数迅速下降。梅毒性脑炎亚急性期出现较早，持续时间较长，脑脊液中细胞数轻度增加，以淋巴细胞为主，在单纯疱疹病毒性脑炎的脑脊液淋巴样细胞中可发现胞质内包涵体，结核性脑膜炎时其脑脊液细胞数可增加，但超过500106/L者较为罕见，在发病初期以中性粒细胞为主，但很快下降，由于患者多在发112、病数天后才来诊治，因此首次腰穿时，脑脊液中中性粒细胞已趋下降而淋巴细胞为多。粒细胞、淋巴及浆细胞同时存在是结核性脑膜炎的特点。新型隐球菌性脑膜炎可在脑脊液中直接发现隐球菌，必要时用印度墨汁染色予以确诊。12.2 中枢神经系统肿瘤脑脊液细胞总数可正常或稍高，以淋巴细胞为主。脑脊液中能否找到肿瘤细胞取决于肿瘤位置及恶性程度、穿刺部位和采集标本的多少。同时也与检查者技术水平有关，采用细胞正玻片离心沉淀仪可提高检出率。脑脊液找到白血病细胞是白血病脑膜转移的证据。12.3 脑血管病脑脊液细胞学检查有助于鉴别脑出血或腰穿损伤性出血。前者在早期病后数小时可见大量红细胞和明显中性粒细胞增多，2-3天内达高峰，113、在脑脊液中可发现吞噬细胞，出血后数小时至第3天可出现含有红细胞的吞噬细胞，5天后可见含铁血黄素吞噬细胞。如为穿刺损伤性出血则不会有上述反应。12.4 脑寄生虫病不仅脑脊液细胞数升高，并可见嗜酸性粒细胞增多，约占白细胞的60%或更高。浆细胞增多为另一特点。如将脑脊液离心沉淀物全倾倒在玻片上，在显微镜下检查可发现血吸虫卵、阿米巴原虫、弓形体、旋毛虫的幼虫等，甚至还可找至细粒棘球绦虫的头节或头钩。12.5 红斑狼疮有时可在脑脊液中找到红斑狼疮细胞。13. 方法学评价细胞计数为手工法，存在人为误差。细胞较少时应增加计数池计数面积。当穿刺损伤血管导致血性脑脊液或出血性脑血管病时，计数细胞总数已无意义，白114、细胞数亦须经校正。细胞分类检查一般用脑脊液离心沉渣涂片，经瑞特染色后用油镜分类，但细胞形态常受影响。为了尽可能多地收集细胞和保持完好的细胞结构，国内一些单位已将细胞玻片离心沉淀仪运用于脑脊液细胞学检查，提高了癌细胞的检出率，在细胞染色技术上也采用这种方法。目前常用染色方法为MayGnimwaldGiemsa染色法。其客观存在如吖啶橙荧光染色法适用于对瘤细胞的辨认；非特异性酯酶染色法适用脑脊液中T细胞辨认；高碘酸雪夫染色法用以鉴别腺癌细胞和原淋巴细胞；过氧化物酶染色用以鉴别形态相似的幼稚细胞；脂类染色法用于鉴别脂类吞噬细胞；硝基四氮唑染色法用于鉴定成熟和幼稚的中性粒细胞等。14. 操作注意事项：115、14.1 脑脊液标本必须立即送验及时检查，放置过久将影响检验结果，使细胞破坏、变性、或细胞包裹于纤维蛋白凝块中，导致细胞数降低、分类不准确等。14.2 取材后，必须立即涂片。14.3 推好的血膜片应在空气中摇动，使其尽快干燥，以免细胞变形。天气寒冷或潮湿时，应于37温箱中保温促干，以免细胞变形缩小。14.4 根据血膜厚薄，细胞量多少及室内温度等把握好染色时间，使染色效果满意。14.5 镜检时循序检查，必要时用油镜确认；并注意整体情况。14.6 计数应及时进行，以免脑脊液凝固，使结果不准确。14.7 细胞计数时，应注意新型隐球菌与白细胞的区别。前者不溶于乙酸，加优质墨汁后可见不着色的荚膜。14.116、8 计数池用后，应用75%乙醇消毒60min。忌用苯酚消毒，因有损计数池的刻度 15. 参考文献：中华人民共和国卫生部医政司编。全国临床检验操作规程（第二版）145-147页。 尿亚硝酸盐定性测定（干法学法）1. 实验原理反应依赖于尿中格兰氏阳性细菌把硝酸盐还原成亚砷酸盐，亚砷酸盐与对氨基苯砷酸反应生成重氮化合物，重氮化合物再与萘基乙二胺二盐酸结合呈现出桃红色。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：以清晨第一次尿为宜，急诊患者可随时留取。2.2 标本种类：新鲜尿液2.3 标本要求：采集患者尿液标本时，盛尿液的容器必须清洁干燥，要求留取中段尿。3. 标本储存：从排出到检测应在2小时内完成。如117、不能及时送检或分析，应置4下冷藏保存，但冷藏时间不得超过6小时。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：细菌，经血，白带，精液，粪便污染标本不能作测定。6. 试剂6.1 试剂名称：迪瑞 UritestA 系列尿试纸。6.2 试剂厂家：长春市医疗电子仪器厂。6.3 包装规格：100人分/桶。6.4 试剂盒组成：试纸条：100条6.5 试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存于2-10条件下，可使用至试剂盒所标示有效期。7. 仪器设备7.1 仪器名称：迪瑞H-100尿液分析仪7.2 仪器厂家：长春市医疗电子仪器厂7.3 仪器型号：迪瑞H-1008. 操作步骤：8.1 按键，仪器仪器鸣声响时将试纸浸入118、尿样，鸣声止后取出。8.2 用吸水纸巾吸干试纸条上残余的尿样。8.3 在传送带停止的时间内，将试纸条平放于槽中间，勿歪斜。8.4 每一个测量完成后将自动打出结果。9. 结果判断：粉红色斑点或粉红色反应为阳性结果。10. 质量控制：质控尿液的应用：用人工质控尿液进行空内质控，低浓度质控液亚硝酸盐应为（-），高浓度质控液亚硝酸盐应为（+）。11. 参考范围：阴性12. 临床意义：阳性结果提示尿液中存在革兰氏阳性细菌，并提示尿中所存在的细菌数目在10 5个/ml以上。13. 操作性能：快速简便，特异性强，灵敏度高，重复性好。14. 方法局限性14.1 粉红色反应为阳性结果，并提示尿中所存在的细菌数目119、在10 5个/ml以上，但颜色的强度与所存在的细菌数不成正比例关系。 14.2 阴性结果并不表示尿液中无细菌存在，阴性结果可见于非硝酸盐转化型细菌的尿路感染。当尿液在膀胱内储留时间不足4小时以上以便使硝酸盐被还原，或者饮食中缺乏硝酸盐，尽管尿液中所存在之细菌含有还原酶，其试验结果也可能为阴性。14.3 高比重的尿液可降低亚硝酸盐试验的灵敏度。对于含有少量亚硝酸盐（等于或少于13mmol/L）的样本，尿液中的维生素C浓度等于或大于1.42mmol/L时可产生假阴性结果。15. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系仪器厂家，进行紧急修理，如一时不能修120、好，如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。16. 参考文献16.1 王毓三 主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司，1997，北京：118.16.2 刘成玉 主编.临床检验基础实验指导.人民卫生出版社2002,北京：87-88.凝血酶原时间（PT）测定1. 实验原理凝固法确定量的血浆（50微升）样本经一定时间加温后，加入PT试剂，采用波长660nm的光照射样本，凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定，然后通过标准曲线求出凝血酶原时间，再通过参数计算得出凝血酶原活动度及INR值。2. 标本采集2.121、1 早晨空腹采血(空腹12小时左右)，静脉采血。2.2 3.8(w/v)枸椽酸钠0.3ml+静脉血2.7ml，混匀。3. 标本存放：1小时内(3000r/min15min)分离血浆，室温放置不超过2小时，28保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70不超过6个月），只能冻融1次，在37迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。4. 标本运输：低温条件下运输。5. 标本拒收的标准：抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作测定。6. 实验材料：6.1 德国Dade Behring Marburg 公司凝血酶原测定试剂，每瓶加4ml蒸馏水溶解(40人份)，未开封试剂28122、贮存到说明书上有效期，复溶试剂28保存不超过5天。6.2 Dade Control质控血浆.用蒸馏水1ml溶解后放置30分钟，才能使用或分装。复溶后，室温保存2小时，284小时。7. 仪器设备：7.1 仪器名称：北京世帝半自动血液凝固分析仪7.2 仪器厂家：北京中勤世帝公司7.3 仪器型号：北京世帝7.4 仪器技术参数：7.4.1 速度：最快检测速度20测试/小时，组合检测约15测试/小时。7.4.2 试剂位：5个。7.4.3 样本位：8个。7.5 仪器校准程序：7.5.1 校准频率：当方法改变，试剂厂家或试剂型号改变，仪器维修影响测定结果等情况时，必须进行校准。7.5.2 校准操作：设置标准123、曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)。8. 操作步骤：8.1 检查前准备：8.1.1 清空反应杯。8.1.2 添加足够反应杯。8.1.3 添加足够试剂杯。8.1.4 标本准备：3000r/min15min分离血浆。8.2 开机：开机后仪器自检并预热，约10分钟。屏幕上方“PT Warm”变为“PT ”，表示仪器预热完成，进入系统准备工作状态，可进行测定。8.3 添加试剂：在仪器自检并预热过程中，根据标本数量，添加适量的PT试剂，每人份需100微升，可适当多加一人分，以防试剂不足。试剂加完后应立即盖好，并放回冰箱保存。 8.4 放置标本：在仪器自检并预热过程中，取出样本杯，放入样本位，用校正好124、的加样器准确加入50微升已分离好的血浆样本。按顺序加入样本杯中。注意更换吸头。8.5 仪器预热结束后，选择通道，PT测试为通道1或通道2。打开通道盖子，把已经过预热的样本杯连同血浆放入通道内，盖好盖子，按下“START”键。仪器显示“PT 180”并开始倒计时。8.6 当显示倒计时为“PT 10”时，打开盖子，用加样器准确加入100微升PT试剂，沿样本杯壁迅速加入样本杯中，并盖上盖子。8.7 约一分钟后，仪器自动打印出PT、INR、Fbg值。8.8 每日维护：完成每日的测定后，关机前维护。8.6.1 清空试剂杯，和已使用过的反应杯。8.6.2 将试剂放入冰箱。8.9 关机：直接关闭仪器右下电源125、开关。9. 检验结果的判断与分析：9.1 仪器测定PT的线性范围在5-600秒，测定完成后仪器显示PT秒数、PT活动度、INR值、Fbg等参数。若不能对参数进行正确计算，将出现下列信息：.出现错误，不能得到分析数据.不能计算参数.数值超出线性范围.9.2 仪器设定PT参考范围在10-14秒，如果得不到一个正常数值，在数据的左侧将出现下列标记： 出现错误信息 数据高于可报告的高限10. 质量控制：每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品，以2S为警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则详见室内质控作业指导书。11. 临床意义：PT是用于筛查外源性凝血系统（、）及口服抗126、凝药物剂量（如华发令、双香豆素等）的检测项目。11.1 参考范围：秒数S：10-14 S（患者结果超过正常对照5以上有临床意义）活动度：80-12011.2 PT延长见于先天性凝血因子、缺乏；低（无）纤维蛋白原血症；获得性见于DIC、原发性纤溶症、维生素K缺乏、肝病、血循环中有抗凝物质（如口服抗凝剂、肝素）。11.3 PT缩短：见于先天性凝血因子V增多、口服避孕药、高凝状态（DIC早期、急性心肌硬塞等）、血栓性疾病（脑血栓形成、急性血栓性静脉炎）、多发性骨髓瘤、洋地黄中毒、乙醚麻醉后。11.4 监测口服抗凝药（如华发令、双香豆素等）的重要指标。一般要求：PT(S)：18-24 S INR：2.127、5-3.5，不同疾病不同值。12. 变异的潜在来源12.1 抗凝剂：草酸盐、EDTA、肝素不适用于PT检查12.2 标本采集处理不当，如血与抗凝剂未充分混匀，出现凝块，混匀时过分用力，使标本溶血，造成结果变异。12.3 纤溶药物的影响，如双香豆素、链激酶、尿酶等。12.4 超剂量使用肝素使凝固时间延长。12.5 FDP增加使凝固时间延长。12.6 某些药物，如口服避孕药、雌激素、天门冬酰胺酶、钠络酮等影响测试结果。13. 操作注意事项：干粉试剂及质控血浆溶解13.1 确认溶剂类型，一般溶解液包括：蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定溶解液，必须按说明书要求使用。13.2 溶解时，轻轻转动容器，保128、证干粉完全溶解，避免剧烈振荡。13.3 复溶后，室温放置5-10分钟方可使用。14. 仪器维护与保养14.1 日常维护：试样管座、试剂预热槽、吸液管架的清洁。14.1.1 切断仪器电源，从电源插座拔掉电源插头。14.1.2 用拧干的湿抹布将各处污垢物擦掉。如果擦不掉，则应用沾有水和中性清洁剂的抹布擦掉污物后，再用柔软的干抹布擦干。切勿使用水和中性清洁剂以外的其它清洁溶液，否则会破坏表面涂层。14.2 每周维护14.2.1 仪器的清洁14.2.1.1 切断仪器电源，从电源插座拔掉电源插头。14.2.1.2 用布擦掉仪器表面的污垢后，再用柔软的干抹布擦干。14.2.1.3 取下底面的过滤器，用水清129、洗后进行干燥，然后再装回原处。14.2.2 用吹风清洁：用附带的吹风刷每周清洁一次，以保证检测部和内置打印机处于良好的使用状态。14.2.2.1 关闭仪器电源，从插座拔出电源插头。14.2.2.2 取出试剂预热槽内的试剂。14.2.2.3 取下附带的吹风刷前端的刷子。14.2.2.4 在吸液管导引器处于关闭的状态下，用吹风吹掉其表面的灰尘。14.2.2.5 清洁内置打印机出口的灰尘。14.2.2.6 开启吸液管导引器，卸下检测部的试样管，用吹风吹除检测部孔内部的灰尘，一般要求吹灰次数应在20次以上。15. 参考文献15.1 叶应妩.王毓三等全国临床检验操作规程第三版，东南大学出版社.15.2 130、北京中勤世帝公司北京世帝操作手册 1998.6修订本.活化部分凝血活酶时间（APTT）测定1. 实验原理确定量的血浆样本（50l）经过一定时间（3min）加湿后，加入部分凝血活酶时间反应试剂（50l），加温3min，加入0.025MCaCl250l，采用波长660nm的光照射样本，凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定，然后通过标准曲线求出活化部分凝血活酶时间。2. 标本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右)，静脉采血。2.2 3.8(w/v)枸椽酸钠0.3ml+静脉血2.7ml，混匀。3. 标本存放：1小时内(3000r/min15min)分离血浆，室温放置不超过2131、小时，28保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70不超过6个月），只能冻融1次，在37迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。4. 标本运输：低温条件下运输。5. 标本拒收的标准：抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作该项目检测。6. 实验材料：6.1 R1：德国Dade Behring Marburg 公司活化部分凝血活酶时间反应试剂，每瓶2ml（40人份水剂），未开封试剂28贮存到说明书上有效期，开盖后28保存14天。6.2 R2：0.025m CaCl2，28贮存到说明书有效期。6.3 Dade Citrol质控血浆.用蒸馏水1ml溶解后放置30分钟，132、才能使用或分装。复溶后，室温保存2小时，284小时。7. 仪器设备：7.1 仪器名称：北京世帝半自动血液凝固分析仪7.2 仪器厂家：北京中勤世帝公司7.3 仪器型号：北京世帝7.4 仪器技术参数：7.4.1 速度： 最快检测速度20测试/小时，组合检测约15测试/小时7.4.2 试剂位：5个。7.4.3 样本位：8个。7.5 仪器校准程序：7.5.1 校准频率：当方法改变，试剂厂家或试剂型号改变，仪器维修影响测定结果等情况时，必须进行校准。7.5.2 校准操作：设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)8. 操作步骤：8.1 检查前准备：8.1.1 清空反应杯。8.1.2 添加足够反应杯。133、8.1.3 添加足够试剂杯。8.1.4 标本准备：3000r/min15min分离血浆。8.2 开机：开机后仪器自检并预热，约10分钟。屏幕上方“AP Warm”变为“AP ”，表示仪器预热完成，进入系统准备工作状态，可进行测定。8.3 添加试剂：在仪器自检并预热过程中，根据标本数量，添加适量的APTT R1、R2试剂，每人份测试需R1、R2各50微升，可适当多加一人份，以防试剂不足。试剂加完后应立即盖好，并放回冰箱保存。 8.4 放置标本：在仪器自检并预热过程中，取出样本杯，放入样本位，用校正好的加样器准确加入50微升已分离好的血浆样本。按顺序加入样本杯中。注意更换吸头。8.5 仪器预热结束134、后，选择通道，PT测试为通道3或通道4。打开通道盖子，把已经过预热的样本杯连同血浆放入通道内，盖好盖子，按下“START”键。仪器显示“AP 60”并开始倒计时。8.6 当显示倒计时为“AP 10”时，打开盖子，用加样器准确吸入50微升APTT R1试剂，沿样本杯壁迅速加入样本杯中，并盖上盖子。此时仪器显示“Ca 180”并开始倒计时。8.7 当显示倒计时为“Ca 10”时，打开盖子，用加样器准确吸入50微升APTT R2试剂，沿样本杯壁迅速加入样本杯中，并盖上盖子。8.8 约一分钟后，仪器自动打印出PT、INR、Fbg值。8.9 每日维护：完成每日的测定后，关机前维护。8.9.1 清空试剂杯135、，和已使用过的反应杯。8.9.2 将试剂放入冰箱。8.10 关机：直接关闭仪器右下电源开关。9. 检验结果的判断与分析：9.1 仪器测定APTT的线性范围在5-600秒，测定完成后仪器显示PT秒数，若不能对参数进行正确计算，将出现下列信息：.出现错误，不能得到分析数据.不能计算参数.数值超出线性范围.9.2 仪器设定APTT参考范围在33-44秒，如果得不到一个正常数值，在数据的左侧将出现下列标记： 出现错误信息 数据高于可报告的高限10. 质量控制：每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品，以2S为警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则详见室内质控作业指导书。1136、1. 临床意义：APTT常用于内源性凝血系统（、因子）的筛选及肝素抗凝治疗的监测。11.1参考范围：33-44秒（患者结果超过正常对照10秒以上为异常）11.2 APTT延长：见过先天性凝血因子缺乏（如血友病甲、乙，接触因子、缺乏、VWF等）；多种凝血因子缺乏（如严重肝病、维生素K缺乏、DIC、纤溶亢进等）；血液中有抗凝物质存在。11.3 APTT缩短：见于DIC高凝期和妊娠高血压综合症等高凝状态。11.4 是监测肝素治疗的首选指标。12. 变异的潜在来源12.1 抗凝剂：草酸盐、EDTA、肝素不适用于PT检查。12.2 标本采集处理不当，如血与抗凝剂未充分混匀，出现凝块，混匀时过分用力使标本137、溶血，造成结果变异。12.3 纤溶药物的影响（如双香豆素、链激酶、尿酶等），超剂量使用肝素。12.4 FDP增加使凝固时间延长。12.5 某些药物的影响（如口服避孕药、雌激素、天门冬酰胺酶、钠络酮等）。13. 操作注意事项：干粉试剂及质控血浆溶解13.1 确认溶剂类型，一般溶解液包括：蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定溶解液，必须按说明书要求使用。13.2 溶解时，轻轻转动容器，保证干粉完全溶解，避免剧烈振荡。13.3 复溶后，室温放置5-10分钟方可使用。14. 仪器维护与保养14.1 日常维护：试样管座、试剂预热槽、吸液管架的清洁。14.1.1 切断仪器电源，从电源插座拔掉电源插头。14.138、1.2 用拧干的湿抹布将各处污垢物擦掉。如果擦不掉，则应用沾有水和中性清洁剂的抹布擦掉污物后，再用柔软的干抹布擦干。切勿使用水和中性清洁剂以外的其它清洁溶液，否则会破坏表面涂层。14.2 每周维护14.2.1 仪器的清洁14.2.1.1 切断仪器电源，从电源插座拔掉电源插头。14.2.1.2 用布擦掉仪器表面的污垢后，再用柔软的干抹布擦干。14.2.1.3 取下底面的过滤器，用水清洗后进行干燥，然后再装回原处。14.2.2 用吹风清洁：用附带的吹风刷每周清洁一次，以保证检测部和内置打印机处于良好的使用状态。14.2.2.1 关闭仪器电源，从插座拔出电源插头。14.2.2.2 取出试剂预热槽内的139、试剂。14.2.2.3 取下附带的吹风刷前端的刷子。14.2.2.4 在吸液管导引器处于关闭的状态下，用吹风吹掉其表面的灰尘。14.2.2.5 清洁内置打印机出口的灰尘。14.2.2.6 开启吸液管导引器，卸下检测部的试样管，用吹风吹除检测部孔内部的灰尘，一般要求吹灰次数应在20次以上。15. 参考文献15.1 叶应妩.王毓三等全国临床检验操作规程第三版，东南大学出版社.15.2 北京中勤世帝公司北京世帝操作手册 1998.6修订本.血浆纤维蛋白原（Fbg）测定1. 实验原理确定量的血浆样本经过一定时间的加温后，加入纤维蛋白原试剂，采用波长为660nm的光照射样本，凝血过程中血浆的混浊度可以通140、过测量散射光光强度的改变来测定，从散射光光强度的测定，可以作出凝血曲线，通过Percentage Detection Method法求得凝血时间，再通过凝血时间，求出Fbg含量。2. 标本采集2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右)，静脉采血。2.2 3.8(w/v)枸椽酸钠0.3ml+静脉血2.7ml，混匀。3. 标本存放：1小时内(3000r/min15min)分离血浆，室温放置不超过2小时，28保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70不超过6个月），只能冻融1次，在37迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。4. 标本运输：低温条件下运输。5. 标本拒收的标准：抗凝剂141、不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作测定。6. 实验材料：6.1 德国Dade Behring Marburg 公司凝血酶原测定试剂，每瓶加4ml蒸馏水溶解(40人份)，未开封试剂28贮存到说明书上有效期，复溶试剂28保存不超过5天。6.2 Dade Control质控血浆.用蒸馏水1ml溶解后放置30分钟，才能使用或分装。复溶后，室温保存2小时，284小时。7. 仪器设备：7.1 仪器名称：北京世帝半自动血液凝固分析仪7.2 仪器厂家：北京中勤世帝公司7.3 仪器型号：北京世帝7.4 仪器技术参数：7.4.1 速度：最快检测速度20测试/小时，组合检测约15测试/小时。7.4.2142、 试剂位：5个。7.4.3 样本位：8个。7.5 仪器校准程序：7.5.1 校准频率：当方法改变，试剂厂家或试剂型号改变，仪器维修影响测定结果等情况时，必须进行校准。7.5.2 校准操作：设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)。8. 操作步骤：8.1 检查前准备：8.1.1 清空反应杯。8.1.2 添加足够反应杯。8.1.3 添加足够试剂杯。8.1.4 标本准备：3000r/min15min分离血浆。8.2 开机：开机后仪器自检并预热，约10分钟。屏幕上方“PT Warm”变为“PT ”，表示仪器预热完成，进入系统准备工作状态，可进行测定。8.3 添加试剂：在仪器自检并预热过程中，根据143、标本数量，添加适量的Fbg试剂，每人份需100微升，可适当多加一人分，以防试剂不足。试剂加完后应立即盖好，并放回冰箱保存。 8.4 放置标本：在仪器自检并预热过程中，取出样本杯，放入样本位，用校正好的加样器准确加入50微升已分离好的血浆样本。按顺序加入样本杯中。注意更换吸头。8.5 仪器预热结束后，选择通道，Fbg测试为通道1或通道2。打开通道盖子，把已经过预热的样本杯连同血浆放入通道内，盖好盖子，按下“START”键。仪器显示“PT 180”并开始倒计时。8.6 当显示倒计时为“PT 10”时，打开盖子，用加样器准确加入100微升Fbg试剂，沿样本杯壁迅速加入样本杯中，并盖上盖子。8.7 约144、一分钟后，仪器自动打印出Fbg值、PT、INR等。8.8 每日维护：完成每日的测定后，关机前维护。8.6.1 清空试剂杯，和已使用过的反应杯。8.6.2 将试剂放入冰箱。8.9 关机：直接关闭仪器右下电源开关。9. 检验结果的判断与分析：9.1 仪器测定Fbg的线性范围在0.5-9.5 g/L，测定完成后仪器显示Fbg值、PT秒数、PT活动度、INR值等参数。若不能对参数进行正确计算，将出现下列信息：.出现错误，不能得到分析数据.不能计算参数.数值超出线性范围.9.2 仪器设定Fbg参考范围在，如果得不到一个正常数值，在数据的左侧将出现下列标记： 出现错误信息 数据高于可报告的高限10. 质量145、控制：每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品，以2S为警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则详见室内质控作业指导书。11. 临床意义：Fbg是用于判定血栓前状态或血栓性疾病的必查项目.11.2 Fbg含量增高：高凝状态(如糖尿病伴血管病变，急性心肌梗塞，脑血管病变，口服避孕药，妊娠及其中毒症，深静脉血栓形成，动脉粥样硬化，高血脂症等);亦见于急性传染病，急性感染，肾小球疾病活动期，放射治疗后，烧伤，休克，外科手术后，恶性肿瘤，多发性骨髓瘤等.11.3 Fbg含量减少：肝脏疾病(重症肝炎，慢性肝炎，肝硬化等);DIC消耗性低凝血期及纤溶期，溶栓治疗的监测，原发性纤146、维蛋白原缺乏症，原发性纤溶活性亢进，恶性贫血及肺、甲状腺、子宫、前列腺手术等.11.4 纤维蛋白原异常：纤维蛋白原异常是一种遗传疾病，是常染色体显性遗传.患者Fbg含量可能在正常范围，但纤维蛋白原有质的异常.主要是Fbg分子的一个多态上出现一个异常氨基酸，临床上可无症状或有轻度出血倾向.12. 变异的潜在来源12.1 抗凝剂：草酸盐、EDTA、肝素不能用于Fbg测定项目，抗凝比例不当也将影响结果的准确性。12.2 样本采集处理不当，如血与抗凝剂未充分混匀，出现小凝块；混匀时过分用力，使红细胞破坏出现溶血，均会造成结果变异。12.3 纤溶药物的影响：如双香豆素、链激酶、尿酶等12.4 妊娠与急性147、炎症的影响13. 操作注意事项：干粉试剂及质控血浆溶解13.1 确认溶剂类型，一般溶解液包括：蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定溶解液，必须按说明书要求使用。13.2 溶解时，轻轻转动容器，保证干粉完全溶解，避免剧烈振荡。13.3 复溶后，室温放置5-10分钟方可使用。14. 仪器维护与保养14. 仪器维护与保养14.1 日常维护：试样管座、试剂预热槽、吸液管架的清洁。14.1.1 切断仪器电源，从电源插座拔掉电源插头。14.1.2 用拧干的湿抹布将各处污垢物擦掉。如果擦不掉，则应用沾有水和中性清洁剂的抹布擦掉污物后，再用柔软的干抹布擦干。切勿使用水和中性清洁剂以外的其它清洁溶液，否则会破坏表148、面涂层。14.2 每周维护14.2.1 仪器的清洁14.2.1.1 切断仪器电源，从电源插座拔掉电源插头。14.2.1.2 用布擦掉仪器表面的污垢后，再用柔软的干抹布擦干。14.2.1.3 取下底面的过滤器，用水清洗后进行干燥，然后再装回原处。14.2.2 用吹风清洁：用附带的吹风刷每周清洁一次，以保证检测部和内置打印机处于良好的使用状态。14.2.2.1 关闭仪器电源，从插座拔出电源插头。14.2.2.2 取出试剂预热槽内的试剂。14.2.2.3 取下附带的吹风刷前端的刷子。14.2.2.4 在吸液管导引器处于关闭的状态下，用吹风吹掉其表面的灰尘。14.2.2.5 清洁内置打印机出口的灰尘。149、14.2.2.6 开启吸液管导引器，卸下检测部的试样管，用吹风吹除检测部孔内部的灰尘，一般要求吹灰次数应在20次以上。15. 参考文献15.1 叶应妩.王毓三等全国临床检验操作规程第三版，东南大学出版社.15.2 北京中勤世帝公司北京中勤世帝 CA-1500操作手册 1998.6修订本.骨髓巨核细胞计数1. 实验原理用瑞氏染色法，对制备好的骨髓片进行染色，低倍镜下（必要时转油镜确认）以1.5cm3cm为单位面积，计数巨核细胞数，并加以分类。2. 标本采集：2.1 骨髓穿刺部分：一般取胸骨、棘突、髂骨前、嵴或后嵴等部分，两岁以内小儿主张用胫骨穿刺。穿刺部分不同，取材可能有明显的差异，必要时可做多150、部位取材，以便能得到更准确的分析数据。2.2 骨髓采集量：一般不超过0.2ml，否则易于稀释。2.3 骨髓取材满意的几项指标：2.3.1 抽取骨髓时，患者有特殊酸痛感。2.3.2 骨髓涂片应有骨髓小粒。2.3.3 显微镜下可见骨髓特有细胞成分，如巨核细胞、浆细胞、网状细胞、组织嗜碱细胞、幼稚红细胞、幼稚粒细胞等。3. 标本储存：取材后应立即推制成骨髓薄片，并尽快送检。4. 标本运输：保持干燥，室温运输。5. 标本拒收的标准：重度血稀，无骨髓特有细胞成份标本。6. 实验材料：瑞氏血细胞染色液，生产厂家：（台资）珠海贝索生物技术有限公司。7. 实验仪器：7.1 仪器名称： OLYMPUS 显微镜8151、. 操作步骤：8.1 骨髓片瑞氏染色：将制好的干燥骨髓涂片平置于染色架上，滴加瑞氏染色液A液3-5滴使其迅速盖满骨髓膜，然后加瑞氏染色B液3-5滴，轻轻摇动玻片或用洗耳球吹气使A、B染液充分混匀，染色1-2分钟（气温低或涂片较厚时可适当延长染色时间），用自来水冲去染液，待干。8.2 巨核细胞计数：将瑞氏染色干燥后的骨髓片，用低倍镜计数巨核细胞，并按原始巨核细胞、幼稚巨核细胞、颗粒型巨核细胞、产板型巨核细胞、裸核型巨核细胞分类记录，计数面积以1.5cm3cm为一单位面积。9. 质量控制：每30份样本，抽两份样本进行室内工作人员比对分析，要求差异在10以内。10. 临床意义：10.1 参考值：巨核152、细胞参考值7-35个1.5cm3cm面积。分类：原始巨核细胞0，幼稚巨核细胞0-0.05，颗粒型巨核细胞0.10-0.27，产板型巨核细胞0.44-0.60，裸核型巨核细胞0.08-0.30。10.2 原始巨核细胞增多见于巨核细胞白血病（M7），幼稚型巨核细胞比例增多见于特发性血小板减少性紫癫的急性型，颗粒型巨核细胞增多比例增多见于特发性血小板减少性紫癫的慢性型。巨核细胞减少见于巨核细胞系统再生障碍及某些白血病。11. 变异的潜在来源11.1 取材不当，骨髓成份被血液稀释。11.2 涂片过厚或过薄，影响巨核细胞计数。11.3 低倍镜下漏数小巨核细胞。12. 操作注意事项：12.1 骨髓取材禁忌153、症：血友病、严重凝血因子缺乏症。12.1 取材量不能过多，一般不超过0.2ml，以防血稀。12.3 取材后，必须立即涂片，因骨髓液中纤维蛋白原含量高，会很快凝固，影响涂片。12.4 推好的髓片应在空气中摇动，使其尽快干燥，以免细胞变形。12.5 根据髓膜厚薄，细胞量多少及室内温度等把握好染色时间，使染色效果满意。12.6 镜检时循序检查切勿漏检，必要时用油镜确认。13. 参考文献叶应妩.王毓三等全国临床检验操作规程第三版，东南大学出版社.前列腺液常规检查（玻片法）1. 实验原理先用肉眼观察前列腺液的液体性状，再用湿片镜检观察并记录镜下所见，最后革兰氏染色后检查细菌。2. 标本采集2.1 标本采154、集前病人准备：无须特殊准备2.2 标本种类：前列腺液 2.3 标本要求：不应夹杂过多的尿液与精液3. 标本储存：一般要求立即送检，不宜久置。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：久置干结标本。6. 操作步骤7.1 肉眼观察液体颜色、是否混有血液、粘稠度（有无脓块）。7.2 湿片镜检，高倍镜下观察白细胞、红细胞、卵磷脂小体，其次为上皮细胞、精子淀粉样体等。7.3 革兰氏染色后检查细菌。8. 结果判断与分析8.1 卵磷脂小体：报告在高倍视野中分布数量。8.2 白细胞、红细胞：每高倍视野所见的最低至最高值：红细胞0-3/HP;白细胞0-5/HP8.3 如找到精子、上皮细胞应报告。9. 临床意155、义9.1 前列腺炎时，白细胞增多，可找到细菌，卵磷脂小体常减少。9.2 前列腺癌时，可有血性液体，镜检见多量红细胞、可见癌细胞。10. 操作性能：快速简便11. 方法局限性：易受人为主观经验不足影响结果判断。12. 参考文献中国人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第二版）.1997,151异常白细胞检查（显微镜检查法）1. 实验原理用瑞氏染色法，对制备好的血涂片进行染色，然后在显微镜下进行形态检查。2. 标本采集：2.1 标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血。2.2 标本要求：2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝。2.2.2 用手指末梢血作白细胞检验时，如手指有冻疮，则主张采用156、耳垂血。3. 标本储存：取材后应立即推制成血涂片，并尽快送检。4. 标本运输：保持干燥，室温运输。5. 标本拒收标准：污染，凝固标本不能作测定。6. 实验材料：瑞氏血细胞染色液，生产厂家：（台资）珠海贝索生物技术有限公司。7. 实验仪器：7.1 仪器名称：OLYMPUS 显微镜7.2 仪器厂家：OLYMPUS7.3 仪器型号：OLYMPUS CH308. 操作步骤8.1 采血后推制厚薄适宜的的血膜片，血膜应呈舌状，头、体、尾清晰可分。8.2 瑞氏染色：将制好的干燥血涂片平置于染色架上，滴加瑞氏染色液A液3-5滴使其迅速盖满血膜，然后加瑞氏染色B液3-5滴，轻轻摇动玻片或用洗耳球吹气使A、B染液157、充分混匀，染色1-2分钟（气温低或涂片较厚时可适当延长染色时间），用自来水冲去染液，待干。8.3 高倍镜（必要时油镜）观察白细胞形态。1. 结果判断与分析9.1 核象变化。(1) 核左移：说明外周血中幼稚或杆状核粒细胞增多，见于急性白血病，急性化脓性细菌感染，急性中毒，急性溶血。正常妊娠、缺氧及低血压也可出现细胞核左移现象。(2) 核右移：说明中性粒细胞核分叶过多，见于巨幼细胞性贫血，恶性贫血，化疗及炎症恢复期，遗传性中性粒细胞分叶过多，尿毒症等。巨多核中性粒细胞：成熟中性细胞胞体增大，核分叶过多，常为5-9叶，甚至12-15叶。各叶大小差别很大，常见于巨幼细胞性贫血。此外，在疾病进行期突然出158、现核右移，表示预后不良。(3) 分叶过少：乳酸缺乏症，假性pelger-huet异常等。9.2 其他核异常环形或面包圈型核：见于慢粒，慢性粒细胞白血病，骨髓异常增生综合征等。中性粒细胞形态变化9.3 中性粒细胞的毒性变化：1） 细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。2） 中毒颗粒：比正常中性颗粒粗大，大小不等，分布不均匀，染色较深，呈黑色或紫黑色。有时颗粒很粗大，与嗜碱粒细胞易混淆；有时小而稀少，散杂在正常中性颗粒之中。含中毒颗粒的中性粒细胞应与嗜碱粒细胞区别，其要点：嗜碱粒细胞核较少分叶、染色较浅、颗粒较大、大小不均、着色更深、细胞边缘处常分布较多，可分布于核上，胞浆中常159、见小空泡。在血片染色偏碱或染色时间过长时，易将中性颗粒误认为中毒颗粒。但只要注意全片各种细胞的染色情况，则不难区别。含中毒颗粒细胞在中性细胞中所占比值称为毒性指数。毒性指数愈大，提示中毒变性结果。3） 空泡：可为单个，但常为多个。大小不等，亦可在核中出现。被认为是细胞脂肪变性的结果。4） Dohle体：是中性粒细胞胞浆内因毒性变而保留的嗜碱性区域。呈圆形、梨形或云雾状。界限不清，染成灰蓝色，直径为1-2m，是胞质局部不成熟，即核与胞质发育不平衡的表现。Dohle小体亦可见于单核细胞中，其意义相同。5） 退行性变：常见者有胞体肿大、结构模糊、边缘不清晰、核固缩、核肿胀和核溶解（染色质模糊、疏松）160、等等。如胞质破裂后消失，只剩胞膜，则成裸核或蓝状细胞，退行性变亦可见于衰老细胞，在正常情况下为数极少。这些毒性变化可单独出现，亦可同时出现。观察中性粒细胞的毒性的变化，对估计疾病的预后有一定帮助。9.4 其它异常白细胞：1） Pelger-Huet畸形：表现为成熟中性粒细胞核分叶能力减弱。常为杆状和分两叶（其间难成细丝）。呈肾形或哑铃形。染色质聚集成小块或条索网状，其间有空折间隙。为常染色体显性遗传异常，一般无临床症状。但也可继发于某些严重感染、白血病、骨髓增生异常综合征、肿瘤转移和某些药物（如水仙胺、磺基二甲基异恶唑）治疗后。2） Chediak-Higashi畸形：在Chediak-Hig161、ashi综合征患者骨髓和血液各期粒细胞中，含数个至数十个直径2-5m的包涵体，即异常巨大的紫蓝或紫红色颗粒。电镜观察和细胞化学显示，巨大颗粒为异常溶酶体。患者容易感染，常伴白化病。为常染色体显性遗传，此异常颗粒也偶见于单核细胞、淋巴细胞中。3） Alder-Reilly畸形：其特点是在中性粒细胞中含巨大深染的嗜天青颗粒，染深紫色。此异常颗粒与中毒颗粒的区别是颗粒较大，不伴有白细胞数增高、核象左移和空泡等其它毒性变化。患者常伴有脂肪软骨营养不良或的遗传性粘多糖代谢障碍。类似颗粒亦可见于其它白细胞中。4） May-Hegglin畸形：患者粒细胞终身含有淡蓝色包涵体。实验证明这种包涵体与前述常见于严162、重感染、中毒等所见Dohle体相同，但常较大而圆。除中性粒细胞外，其他粒细胞甚至巨核细胞内亦可见到。9.5 淋巴细胞形态学变化（1） 异型淋巴细胞：在传染性单核增多症、病毒性肺肝炎、流行性出血热等病毒感染或过敏原刺激下，可使淋巴细胞增生，并出现某些形态学变化，称为异型淋巴细胞。Downey将其按形态特征分为三型：I型（空泡型）：最多见。胞体比正常淋巴细胞稍大，多为圆形、椭圆形或不规则形。核圆形、肾形或分叶状、常偏位。染色质粗糙，呈粗网状或小块状，排列不规则。胞质丰富，染深蓝色，含空泡或呈泡沫状。型（幼稚型）：胞体较大，核圆形或卵圆形。染色质细致呈网状排列，可见1-2个发生母细胞化的结果。型（不163、规则型）：胞体较大，外形常不规则，可有多数伪足。核形状及结构与I型相同或不同，染色质较粗糙致密。胞质量丰富，染色淡蓝或灰蓝色，有透明感，边缘处着色较深蓝色。可有少数空泡。（2） 受放射线损伤后淋巴细胞形态变化：通过放射生物学的研究以及对射线损伤病人观察，证实淋巴细胞是白细胞中对电离辐射最敏感的细胞。人体遭受较小剂量的电离辐射之后，虽未出现明显临床症状，但血中淋巴细胞的数量却已显著减少。若经较大剂量照射后，淋巴细胞迅速减少，剂量越大，减少得越严重以致衰竭，与此同时受损伤的淋巴细胞还出现形态学改变，如核固缩、核破坏、双核的淋巴细胞以及含有卫星核的淋巴细胞。后者是指胞质中主核之旁出现小核也称微核，是164、射线损伤后较为特殊的所见。（3） 淋巴细胞性白血病时形态学变化：在急、慢性淋巴细胞白血病时，不但出现各阶段的原幼细胞，且处于各分阶段的白血病的细胞都有特殊的形态变化。10. 质量控制：每30份样本，抽两份样本进行室内工作人员比对分析，要求差异在10以内。11. 变异的潜在来源11.1 取材不当。11.2 涂片过厚或过薄，影响形态观察。12. 操作注意事项：12.1 取材后，必须立即涂片。12.1 推好的血膜片应在空气中摇动，使其尽快干燥，以免细胞变形。天气寒冷或潮湿时，应于37温箱中保温促干，以免细胞变形缩小。12.3 根据血膜厚薄，细胞量多少及室内温度等把握好染色时间，使染色效果满意。12.165、4 镜检时循序检查，必要时用油镜确认；并注意整体情况。13. 参考文献：中华人民共和国卫生部医政司编。全国临床检验操作规程（第二版）5-7页。异常红细胞检查（显微镜检查法）1. 实验原理用瑞氏染色法，对制备好的血涂片进行染色，然后在显微镜下进行形态检查。2. 标本采集：2.1 标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血。2.2 标本要求：2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝。2.2.2 用手指末梢血作检验时，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。3. 标本储存：取材后应立即推制成血涂片，并尽快送检。4. 标本运输：保持干燥，室温运输。5. 标本拒收标准：污染，凝固标本不能作测定。6. 实验材料：瑞氏血166、细胞染色液，生产厂家：（台资）珠海贝索生物技术有限公司。7. 实验仪器：7.1 仪器名称：OLYMPUS 显微镜7.2 仪器厂家：OLYMPUS7.3 仪器型号：OLYMPUS CH308. 操作步骤8.4 采血后推制厚薄适宜的的血膜片，血膜应呈舌状，头、体、尾清晰可分。8.5 瑞氏染色：将制好的干燥血涂片平置于染色架上，滴加瑞氏染色液A液3-5滴使其迅速盖满血膜，然后加瑞氏染色B液3-5滴，轻轻摇动玻片或用洗耳球吹气使A、B染液充分混匀，染色1-2分钟（气温低或涂片较厚时可适当延长染色时间），用自来水冲去染液，待干。8.6 高倍镜（必要时油镜）观察红细胞形态。9. 结果判断与分析：在良好的染167、色血涂片上，正常红细胞的大小形态较为一致，直径为6.77.7m，染色淡红色，中央着色较边缘淡。各种病因作用于红细胞生理进程的不同阶段引起相应的病理变化，导致某些类型贫血的红细胞产生特殊的形态变化，可从染色血涂片上红细胞的大小、形态、染色等方面反映出来。此种形态学改变与血红蛋白测定、红细胞计数结果相结合可粗略地推断贫血原因，对贫血的诊断和鉴别诊断有很重要的临床意义。红细胞的形态变化主要表现在以下四个方面：（一）红细胞大小改变1. 小红细胞（microcyte）直径小于6m者称为小红细胞，正常人遇见。如果血涂片中出现较多染色过浅的小红细胞，提示血红蛋白合成障碍，可能由于缺铁引起；或者是珠蛋白代谢异168、常引起的血红蛋白病。而遗传性球形细胞增多症的小红细胞，其血红蛋白充盈良好，生理性中心浅染区消失。2. 大红细胞（macrocyte）直径大于10m。见于溶血性贫血及巨幼细胞贫血。3. 巨红细胞（megalocyte）直径大于15m。最常见于缺乏叶酸及维生素B12所致的巨幼细胞性贫血。其胞体所以增大是因为缺乏上述因子时，幼稚红细胞内DNA合成不足，不能按时分裂所致。如果血涂片中同时存在分叶过多的中性粒细胞则巨幼细胞性贫血可能性更大。4. 红细胞大小不均（anisocytosis）是指红细胞之间直径相差一倍以上而言。常见于严重的增生性贫血血涂片中。而巨幼细胞性贫血时尤为明显，可能与骨髓粗制滥造红细169、胞有关。（二）红细胞形态改变1. 球形红细胞（spherocyte）细胞直径小于正常。厚度增加常大于2m。无中心浅染色区，似球形。常见于遗传性球形细胞增多症和伴有球形细胞增多的其它溶血性贫血。如自身免疫性溶血性贫血、新生儿溶血病以及红细胞酶缺陷所致溶血性贫血等。2. 椭圆形红细胞（elliptocyte）细胞呈卵圆形、杆形、长度可大于宽度3-4倍，最大直径可达12.5m，横径可为2.5m。此种红细胞置于高渗、等渗、低渗溶液或正常人血清内，其椭圆形保持不变，但幼红细胞及网织红细胞均不呈椭圆形。在遗传性椭圆形细胞增多症病有血涂片中此种红细胞可达25%，甚至高达75%（正常人约占1%）。3. 靶形红170、细胞（target cell）红细胞中心部位染色较深，其外围为苍白区域，而细胞边缘又深染，形如射击之靶。有的中心深染区不像孤岛而像从红细胞边缘延伸的半岛状态或柄状，而成不典型的靶形红细胞。靶形红细胞直径可比正常红细胞大，但厚度变薄，因此体积可正常。常见于各种低色素性贫血。在珠蛋白生成障碍性贫血时尤易见到。可能因HbA含量贫乏而又分布不匀所致应注意与在血涂片制作中未及时固定而引起的改变相区别。4. 镰形红细胞（sickle cell）形如镰刀状。这是由于红细胞内存在着异常血红蛋白S所致，在缺氧情况下尤易形成此尖红细胞。因此检查镰形红细胞需将血液制成湿片，然后加入还原剂如偏亚硫酸病。5. 口形红细171、胞（stomatocyte）红细胞中央有裂缝，中心苍白区呈扁平状，颇似张开的口形或鱼口。在正常人偶见。如积压涂片中出现较多口形红细胞，见于口形红细胞增多症。少量出现可见于弥漫性血管内凝血（DIC）、酒清中毒。6. 棘细胞（acanthocyte）该红细胞表面有针尖状突起，其间距不规则。突起的长度和宽度右不一。在-脂蛋白缺乏症病人的血涂片中出现较多。也可见于脾切除后、酒精中毒性肝脏疾病、尿毒症。须注意与皱缩红细胞区别。皱缩红细胞周边呈锯齿形排列紧密、大小相等，外端较尖。7. 裂片细胞（schistocyte）为红细胞碎片或不完整的红细胞。大小不一。外形不规则，有各种形态如刺形、盔形、三角形、扭转172、形等。正常人血涂片中裂片细胞小于2%，弥漫性血管内凝血、微血管病性溶血性贫血、重型珠蛋白生成障碍性贫血时出现较多。8. 红细胞形态不整（poikilocytosis）指红细胞形态发生各种明显改变的情况而言，可呈泪滴状、梨形、棍棒形、新月形等，最常见于巨幼细胞性贫血。可能因贫血严重但又缺乏原料，在骨髓内粗制滥造；也可能因红细胞脆性增大，在推片时碎裂所致。（三）红细胞内血红蛋白含量改变1. 正常色素性（normochromic）正常红细胞在瑞特染色的血片中为淡红色圆盘状，中央有生理性空白区，通常称正常色素性。除见于正常人外，还见于急性失血、再生障碍性贫血和白血病。2. 低色素性（hypochrom173、ic）红细胞的生理性中心浅染色区扩大，甚至成为环圈形红细胞，提示其血红蛋白含量明显减少，常见于缺铁性贫血、珠蛋白生杨障碍性贫血、铁幼粒细胞性贫血，某些血红蛋白病时也常见到。3. 高色素性（hyperchromic）指红细胞内生下性中心浅染区消失，整个红细胞均染成红色，而且胞体也大。其平均红细胞血红蛋白的含量是增高的，但平均血红蛋白浓度多属于正常。最常见于巨幼细胞性贫血。4. 嗜多色性（polychromatic）属于尚未完全成熟的红细胞，故细胞较大，由于胞质中含多少不等的嗜碱性物质RNA而被染成灰色蓝色。嗜多色性红细胞增多提示骨髓造红细胞功能活跃。在增生性贫血时增多，溶血性贫血时最为多见。（四174、）红细胞中出现异常结构1. 碱性点彩红细胞（basophilic stippling cell）简称点彩红细胞，指在瑞特氏染色条件下，胞质内存在嗜碱性深蓝色颗粒的红细胞，属于未完全成熟红细胞，其颗粒大小不一、多少不等、正常人血涂片中很少见到，仅为万分之一。有铅、铋、汞中毒时增多，常作为名铅中毒的诊断的筛选指标。有人认为是由于红细胞的膜受重金属损伤后，其胞质中的核糖体发生聚集性引起，也可能是由于血红蛋白合成过程中原卟啉与铁结合受损所致，伴有再生紊乱现象。2. 染色质小体（howell jollys body）位于成熟或幼红细胞的胞质内，呈圆形，有1-2m大小，染紫红色，可1至数个，已证实为核残余175、物，常见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血及脾切除术后。3. 卡波环（cabot ring）在嗜多色性或碱性点彩红细胞的胞质中出现的紫红色细线圈状结构，有时绕成8字形。现认为可能是胞质中脂蛋白变性所致常与染色质小体同时存在。见于巨细胞性贫血和铅中毒患者。4. 有核红细胞（nucleated eryhrocyte）即幼稚红细胞，存在于骨髓中。正常成人外周血液中不能见到。1周之内婴儿的血涂片可见到少量。在成人外周血涂片中出现有核红细胞属病理现象，最常见于各种溶血性贫血。由于大量红细胞破坏后，骨髓增生，除网织红细胞大量入血外，还有一些有核红细胞提前释放入血，这说明骨髓的调节功能良好。另一种可能是造血系统恶176、性疾患或其它部位的癌肿转达移到骨髓，最常见于急、慢性白血病及红白血病。后者可见更早阶段的幼红细胞，并伴有形态上巨幼样变及其它畸变。综合以上红细胞形态变化，结合红细胞及血红蛋白减低程度，可以初步作出贫血的形态学诊断（见下表）。常见各类贫血的形态学诊断简表血涂片中红细胞形态学所见病因推断参考化验项目红细胞血红蛋白网织红细胞其它红细胞大小不均，以小型为主，有明显中心染区扩大缺铁性贫血红细胞大小，形态大致正常再生障碍性贫血血小板同上，多色性红细胞较易见到急性失血中性分叶同上，易见嗜多色性红细胞，亦可见到有核红细胞急性溶血尿中有游离Hb，血小板正常或红细胞大小不均，大红细胞及巨红细胞易见到，血红蛋白量丰177、富，生理性中心浅染区常见多色及有核红细胞缺乏维生素B12及叶酸引起的巨幼细胞性贫血血小板正常或10. 质量控制：每30份样本，抽两份样本进行室内工作人员比对分析，要求差异在10以内。11. 变异的潜在来源11.1 取材不当。11.2 涂片过厚或过薄，影响形态观察。12. 操作注意事项：12.1 取材后，必须立即涂片。12.1 推好的血膜片应在空气中摇动，使其尽快干燥，以免细胞变形。天气寒冷或潮湿时，应于37温箱中保温促干，以免细胞变形缩小。12.3 根据血膜厚薄，细胞量多少及室内温度等把握好染色时间，使染色效果满意。12.4 镜检时循序检查，必要时用油镜确认；并注意整体情况。13. 参考文献：178、中华人民共和国卫生部医政司编。全国临床检验操作规程（第二版）17-18页。浆膜腔积液粘蛋白定性检查（Rivalta法）1. 实验原理渗出液中可含多量浆膜粘蛋白，在酸性条件下可产生白色雾状沉淀。2. 标本采集：2.1 标本种类：浆膜腔积液标本由临床医师行胸腔穿刺术，腹腔穿刺术或心包穿刺术分别采集。2.2 标本要求：送验标本最好留取中段液体于消毒容器试管或消毒瓶内，常规及细胞学检查约留取2毫升。2.3 为防止出现凝块，细胞变性、细菌破坏自溶等，除应即时送验及检查外，常规及细胞学检查宜用EDTAK2抗凝。3. 标本储存：立即送检。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：污染，久置标本。6 实验179、材料：量筒，乙酸。7. 操作步骤：取100ml量筒，加蒸馏水100ml，滴入乙酸0.1ml（pH35），充分混匀，静止数分钟，将穿刺液靠近量筒液面逐滴轻轻滴下，在黑色背景下，观察白色雾状沉淀的发生及其下降速度等。8. 结果判断与分析阴性：清晰不显雾状；：渐呈白雾状；：甲后呈白雾状；2+：白薄云状；3+：白浓云状。在滴下穿刺液后，如见浓厚的白色云雾状沉淀很快地下沉，而且形成较长的沉淀物，即Rivalta反应阳性。如产生白色浑浊不明显，下沉缓慢，并较快消失者为阴性反应。9. 质量控制：进行室内工作人员比对分析，要求差异在10以内。11. 临床意义：10.1 漏出液（transusate）为非炎症性180、积液，其形成常见原因为：血管内胶体渗透压下降；当血浆白蛋白浓度明显减少时，如肾病伴有蛋白大量丢失、重度营养不良、晚期肝硬化、重症贫血，一般血浆白蛋白低于25g/L，就有出现浆膜腔积液的可能；毛细血管流体静脉压升高；如静脉回流受阻静脉栓塞、肿瘤压迫、充血性心功能不全和晚期肝硬化等；淋巴回流受阻止如淋巴管被血丝虫阻塞或者淋巴管被肿瘤所压迫等，这些胸、腹腔积液有或能是乳糜样的；水、钠潴留可引起细胞外液增多，常见于晚期肝硬化、充血性心力衰竭和肾病等。10.2 渗出液（exudate）多为炎症性积液。炎症时由于病原微生物的毒素、缺氧以及炎症介质作用使用血管内皮细胞受损，血管通透性增加，以致血管内大分子物181、质如白蛋白甚至球蛋白和纤维蛋白原都能通过血管壁而渗出，在渗出过程中，还有各种细胞成分的渗出。当血管严重受损，红细胞也外溢，因此炎性渗出液中含有红细胞也是炎症反应的特征。渗出液产生多为细菌感染所致少数见于非感染病因，如外伤、血液、胆汁、胰液、胃液等刺激后。此外恶性肿瘤也可引起类似渗出液的积液。渗透出液与漏出液鉴别见下表。漏出液与渗出液的鉴别漏出液渗出液原因非炎症炎症、肿瘤或物理、化学刺激所致外观淡黄不定可为黄色、血色、脓样、乳糜样透明度透明，偶见微混多为混浊比密1.018凝固不凝常自凝粘蛋白试验阴性阳性PH7.46.8蛋白质定量25g/L30g/L积液总蛋白/血清总蛋白3.3mmol/L，与血糖182、相近可变化，常3.3mmol/L，低于血糖LD200U/L积液LD/血清LD0.60.6细胞总数常500106/L白细胞分类以淋巴细胞及间皮细胞为主因病因不同而异，一般急性感染以中性粒细胞为主，慢性以淋巴细胞为主癌细胞未找到可找到癌细胞或异常色体细菌未找到可找到病原菌常见疾病充血性心力衰竭、肝硬化和肾炎伴低蛋白血症细菌感染、原发性或转移性肿瘤、急性胰腺炎等。11. 方法学评价：参见浆膜腔积液化学检查作业指导书。12. 操作注意事项：浆膜腔积液标本必须立即送验及时检查，放置过久将影响检验结果。13. 参考文献：中华人民共和国卫生部医政司编。全国临床检验操作规程（第二版）148-149页。浆膜腔积183、液化学检查1. 实验原理同血清相应检测项目相同。2. 标本采集：2.1 标本种类：浆膜腔积液标本由临床医师行胸腔穿刺术，腹腔穿刺术或心包穿刺术分别采集。2.2 标本要求：送验标本最好留取中段液体于消毒容器试管或消毒瓶内，至少留2毫升。2.3 为防止出现凝块，细胞变性、细菌破坏自溶等，除应即时送验及检查外，生化检查标本宜用肝素抗凝。3. 标本储存：立即送检。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：污染，久置标本。6 实验试剂：参见相应血清检测项目作业指导书。7 实验仪器：参见相应血清检测项目作业指导书。8. 操作步骤8.1 PH测定时标本应抽取在肝素化的真空注射器具内，注意与外界空气隔绝。184、即时送验及时检查。8.2 蛋白质、葡萄糖、酶学定量测定方法与血清定量相同。2. 结果判断与分析9.1 PH：漏出液PH7.4；渗出液一般偏低。化脓性感染时积液PH200U/L，积液LD/血清LD比值0.6可作为渗透出液的指标。在各类渗液中经化脓性感染和积液LD活性最高，其次是癌性种液，结核性略高于正常。LD同功酶测定如LD3、LD4、LD5或仅LD5增高可疑为恶性肿瘤。9.4.2 溶菌酶：正常胸腹水含量0-5mg/L，94%结核性积液中溶菌酶含量超过30mg/L，明显高于癌性积液、结缔组织病。如果用积液和血清中溶菌酶比值表示，也是结核性最高，因此测定胸腔积液中溶菌酶对结核性胸膜炎的诊断有帮助，185、连续观察可估计预后。如同进测定胸腔积液中溶菌酶和LD时，通常结核性两者均升高、心力衰竭引起的漏出液两者均低，癌性胸腔积液时溶菌酶低而LD活性高，此种分离现象是癌性胸腔积液析特点。9.4.3 腺苷脱氢酶（ADA）：一般在结核性积液中ADA活性升高且幅度最大，癌性次之，漏出液最低。ADA大于40U/L应考虑为结核性。9.4.4 淀粉酶：大多数胰腺炎患者及胰腺创伤等所致腹腔积液中，淀粉酶活性可高达血清淀粉酶的数倍至几十倍。当食道破裂时唾液经食道穿孔处流进胸腔，此时胸腔积液淀粉酶也升高，检查胸腔积液中AMY对食道穿孔早期诊断也是有价值的。9.4.6 碱性磷酸酶：大多数小肠扭转穿孔患者的腹腔穿刺液中碱性186、磷酸酶活性升高，约为血清碱性磷酸酶的2倍，发病2-3小时即升高，并随病情进展而增加。9.4.7 其它（1）铁蛋白（feritin，Ft）：癌性积液中铁蛋白多大于600g/L，结核性时也升高，因此铁蛋白对癌性和结核性鉴别缺乏特异性。如果与溶菌酶一起测定则有价值，癌性腹水铁蛋白明显升高，腹水Ft/血清Ft1，而溶菌酶含量不高；结核性者两者均升高，溶菌酶升高极为明显。（2）纤维连结蛋白（fibronectin，FN）：纤维连结蛋白是种多糖蛋白。有报告癌性腹水FN为173.965.9mg/L，非癌性腹水为13.46.8mg/L(P75mg/L，可高度怀疑癌性腹水，并认为肿瘤细胞可合成分泌FN。（3）纤187、维蛋白原降解产物（fibrin degradation products，FDP）：在癌性积液中FDP明显高于结核性，而结核性又高于肝硬化引起的积液。因此积液中FDP1000mg/L时，考虑癌性可能性较大。（4）C反应性蛋白（C-resctive protein，CRP）：CRP为急性时相反应蛋白，可用于漏出液及渗液的鉴别判断。CRP10mg/L为渗出液。其敏感性、特异性约为80%左右。10. 质量控制：参照相应血清检测项目。11. 方法学评价:通过外观、比密、凝固、粘蛋白试验及细胞计数来鉴别渗出液和漏出液，有时也难准确判断，临床符合率仅约60%，远远满足不了临床需要。检测浆膜腔积液和血清的蛋188、白质含量及乳酸脱氢酶活性，当积液LD200U/L；积液LD/血清LD比值0.6，积液总蛋白/血清总蛋白比值0.5，如三项同时存在时可以诊断为渗出液，反之为漏出液，大大提高了临床符合率，但还有约5%误诊率。所以根据腹水性质考虑病因时既要了解一般规则，又要考虑病人具体情况。12. 操作注意事项：浆膜腔积液标本必须立即送验及时检查，放置过久将影响检验结果。13. 参考文献：中华人民共和国卫生部医政司编。全国临床检验操作规程（第二版）148-149页。浆膜腔积液外观检查（目测法）1. 实验原理目测浆膜腔积液颜色、透明度、凝块等一般性状。2. 标本采集：2.1 标本种类：浆膜腔积液标本由临床医师行胸腔穿189、刺术，腹腔穿刺术或心包穿刺术分别采集。2.2 标本要求：送验标本最好留取中段液体于消毒容器试管或消毒瓶内，常规及细胞学检查约留取2毫升，生化检验留2毫升，厌氧菌培养留1毫升。如查结核杆菌则约需10毫升。2.3 为防止出现凝块，细胞变性、细菌破坏自溶等，除应即时送验及检查外，常规及细胞学检查宜用EDTAK2抗凝，生化检查标本宜用肝素抗凝。加留1管不加任何抗凝剂用以观察有无凝固现象。3. 标本储存：立即送检。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：污染，久置标本。6. 操作步骤6.1 观察颜色。6.2 观察透明度。6.3 观察凝块、薄膜和沉淀物。6.4 需要时可测定比密，比密用比密计或折射仪190、测定，前者标本用量多，后者只需数滴。7. 结果判断与分析：7.1 积液量：该项由病室医护人员用量筒测定或将全部由检验人员测其总量。液量可随病情，部位和抽取目的不同而异，可由数毫升至上千毫升。7.2 颜色多为深浅不同的黄色，可用淡黄色、黄色、深黄色表示。一般漏出液颜色较淡，渗出液体深。红色多为血性，可用淡红色、红色、及暗红色报告之。可能为结核菌感染、肿瘤出血性疾病、内脏损伤及穿刺损伤所致淡黄色脓样多系化脓性感染，由于大量细胞和细菌存在所致乳白色如胸导管淋巴管阻塞所致称真性乳糜液，当积液中含量脂肪变性细胞时也呈乳糜样，叫假性乳糜液，可用脂蛋白电泳、乙醚试验及镜检等加区分。绿色可能系铜绿假单胞菌感染191、所致。7.3 透明度可根据标本不同情况用清、微浑、浑浊报告。漏出液为清晰透明液体。渗出液常困含大量细胞、细菌而呈现不同程度混浊。乳糜液因含大量脂肪也呈混浊外观。7.4 凝块漏出液中因含纤维蛋白原少，一般不易凝固。渗出液可因有纤维蛋白原等凝血因子以及细菌、组织裂解产物、往往自行凝固或有凝块出现。积液中含有纤维蛋白溶酶时可将已形成的纤维蛋白又溶解，反而可能看不见凝固或凝块。7.5 比密高低主要取决于蛋白质含量。漏出液的比密一般低于1.015，而渗出液一般高于1.018。8. 质量控制：抽取样本进行室内工作人员比对分析，要求差异在10以内。9. 操作注意事项：浆膜腔积液标本必须立即送验及时检查，放置192、过久将影响检验结果。10. 参考文献：中华人民共和国卫生部医政司编。全国临床检验操作规程（第二版）148页。浆膜腔积液有形成分检查（显微镜检查法）1. 实验原理在显微镜下对浆膜腔积液有形成分进行计数和分类检查。2. 标本采集：2.1 标本种类：浆膜腔积液标本由临床医师行胸腔穿刺术，腹腔穿刺术或心包穿刺术分别采集。2.2 标本要求：送验标本最好留取中段液体于消毒容器试管或消毒瓶内，常规及细胞学检查约留取2毫升。2.3 为防止出现凝块，细胞变性、细菌破坏自溶等，除应即时送验及检查外，常规及细胞学检查宜用EDTAK2抗凝，加留1管不加任何抗凝剂用以观察有无凝固现象。3. 标本储存：立即送检。4. 标193、本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：污染，久置标本。6. 实验材料：细胞计数板；红细胞稀释液；瑞氏血细胞染色液，生产厂家：（台资）珠海贝索生物技术有限公司。7. 实验仪器：7.1 仪器名称：OLYMPUS 显微镜7.2 仪器厂家：OLYMPUS7.3 仪器型号：OLYMPUS CH308. 操作步骤8.1 细胞总数：细胞计数方法与脑脊液相同，计数时应把全部有核细胞（包括间皮细胞）都列入细胞计数中。8.2 白细胞分类计数应在抽出后立即离心沉淀，用沉淀物涂片经瑞氏染色进行分类。8.3 观察其它有形成分：结晶：寄生虫，脱落细胞等。9. 结果判断与分析9.1 细胞计数：红细胞计数对渗出液与漏液的鉴别194、意义不大。文献报告恶性肿瘤引起的积液压中血性者占50-85%。当积液中的红细胞大于0.11012/L时应考虑可能是恶生肿瘤、肺栓塞或创伤所致，也要考虑结核病和穿刺损伤的可能。红细胞增多时不能使用血细胞分析仪计数，因积液中沉渣会引起假性增加，以及纤维蛋白存在而堵塞计数小孔。白细胞计数对渗出液中和漏出液和鉴别有参考价值。现认为漏出液中的白细胞数常不超过100106/L，如果超过500106/L多为渗出液。结核性与癌性积液中的白细胞通常超过200106/L。而化脓性积液时往往1000106/L。9.2 白细胞分类：漏出液中细胞较少，以淋巴及间皮细胞为主。渗出液则细胞较多，各种细胞增加的临床意义如下。195、 9.2.1 中性分叶核粒细胞增多：常见于化脓性渗出液，细胞总数也常超过1000106/L。在结核性浆膜腔炎早期的渗出液中，也可见以中性粒细胞增加为主。9.2.2 淋巴细胞增多：主要提示慢性炎症、如结核、梅毒、肿瘤或结缔组织病所致渗出液。有条件者可测定T细胞亚群，一般积液中T淋巴细胞数大于外周血中T细胞。若胸水中见到浆细胞样淋巴细胞可能是增殖型骨髓瘤。少量浆细胞则无临床意义。9.2.3 嗜酸性粒细胞增多：常见于变态反应和寄生虫所致的渗出液。此外多次反复穿刺刺激、结核性渗出液的吸收期、人工气胸、手术后积液、系统性红斑狼疮、间皮瘤等积液中嗜酸性粒细胞亦增多。9.2.4 间皮细胞增多：提示浆膜刺激或196、受损，该细胞在瑞氏染色后，大小约为15-30m，圆形、椭圆形或不规则形，核在中心或偏位，多为一个核，也可见两个或多个核者，均紫色，胞质多呈淡蓝色有时有空泡。间皮细胞在渗出液中退变，使形态不规则，还有幼稚型间皮细胞，染色质较粗糙致密，但核仁不易见到，都应注意与癌细胞区别。9.2.5 其它细胞：炎症情况下，在大量出现中性粒细胞的同时，常伴有组织细胞出现。红斑狼疮细胞可偶见于浆膜腔积液中。在陈旧性出血的积液中可见到含铁的血黄色细胞。9.3 结晶：胆固醇结晶呈无色透明，缺陷角四方形板状，可见于陈旧的性胸水中脂肪性及胆固醇性胸膜炎的胸炎中，浆膜腔出血后可见到含铁血黄素颗粒。偶见夏科-莱登结晶。9.4 寄197、生虫检验：可将乳糜样浆膜腔积液离心沉淀后，将沉淀物倒在玻片上检查有无微丝蚴。包虫病胸水可以检查出棘球蚴的头节和小钩。阿米巴病的积液中可以找到阿米巴滋养体。9.5 细胞学检查：怀疑恶性肿瘤时可用细胞玻片离心沉淀仪收集积液中细胞，作巴氏或H-E染色，如见有多量形态不规则，细胞胞体大小不等，核偏大并可见核仁及胞质染色较深的细胞应高度重视，认真鉴别。必要时用多克隆或单克隆抗体作免疫组织化学检查。必要时作染色体检查，这是诊断恶性肿瘤有效检查方法之一，阳性率可达75%左右。染色体分析多数为非整倍体，以超过2倍体及多倍体为主。常伴有特殊形态的染色体，如巨大染色体、微小染色体、有时有染色体断裂、移位、镶嵌现象198、。10. 质量控制：进行室内工作人员比对分析，要求差异在10以内。11. 方法学评价：参见浆膜腔积液化学检查作业指导书。12. 操作注意事项：浆膜腔积液标本必须立即送验及时检查，放置过久将影响检验结果。13. 参考文献：中华人民共和国卫生部医政司编。全国临床检验操作规程（第二版）148-149页。ABX-MICR 60血球分析仪操作维护规程1. 仪器分析原理和分析参数1.1 原理：基于电阻抗检测方法（流体动力学聚焦方法），半导体激光器的流式细胞术方法和SLS血红蛋白检测法。流体动力学聚焦方法：在检测器中，样品喷头被放在缝隙前，与中心相一致。稀释样品从样品喷头进入圆锥形腔后，被前鞘试剂包围，穿过199、缝隙中心，为穿过缝隙中心提供精确的细胞信号。穿过后，稀释的样品被送入捕捉的试管。流式细胞术方法：血液样品被吸取、测量、稀释至一定比率并被染色，然后送入流式细胞中心，鞘流机制促进了细胞计数的准确性和重复性。半导体激光束照射到血细胞，Photodiode接受到前散射光，photo multiplier试管接受后散射光和荧光，光转换为电脉冲，获得血细胞信息。1.2 分析参数：WBC, RBC, HGB, HCT, MCV, MCH, MCHC, PLT, NEUT%, LYMPH%, MONO%, EO%, BASO%, NEUT#, LYMPH#, MONO#, EO#, BASO#, RDW-S200、D, RDW-CV, PDW, MPV, P-LCR, RET%, RET#, IRF, LFR, MFR, HFR2. 仪器参数2.1 环境温度：15-30；相对湿度：45-85。2.2 主机体积：530*630*720mm（宽*高*深）；重量：约59kg。2.3 压缩机体积：280*400*355mm（宽*高*深）；重量：约17kg。2.4 电源供给：主机和进样器：100-240V10%(50-60HZ) 压缩机：100-117V10%(50-60HZ)；220-240V10%(50-60HZ)2.5 电压：主机和进样器：250VA 压缩机：100-117V 50HZ-230VA 60HZ201、-280VA 220-240V 50HZ-220VA 60HZ-250VA2.6 保护类型：I级设备2.7 绝缘协调：II级电压，2度保护2.8 显示范围HCT0.0-100.0%PLT0-99992.9 背景值：WBC 0.1DIFF-WBC 0.2RBC 0.02HGB 0.1PLT 5.0PLT-0 102.10 样本处理速度：约80样本/小时2.11 交叉污染：1.0以内2.12 样本体积要求：样本模式：150l；关闭模式：150l；手动模式：85l；毛细管模式：40l。2.13 数据贮存容量：有直方图的分析数据：10000样本；散点图：10000样本；病人信息：5000人份；命令信息202、：1000样本；质控文件：25个。3. 操作规程3.1 开机前检查：3.1.1 检查试剂：检查当天所需试剂量，如不够，应更换试剂。在检测过程中若试剂用完，系统将自动停止工作，并提醒操作者更换试剂，更换后才能再次启动。3.1.2 检查试管和电缆线。3.1.3 确保分析流水线中无试管架，确保左右试管架区和分析流水线的清洁。3.1.4 倒掉废液容器中的废液。3.2 开机：打开电源开关（先开打印机再开IPU再开主机）3.3 打开IPU电源，启动Windows 2000系统，自动确认身份；启动XT-2000i程序，显示启动对话框，输入用户名和密码。3.4 仪器自检：顺序为：自我检测，下载主机控制程序，启203、动机械和流体动力学部件，清洗，等待温度稳定，背景检查。3.5 质控分析3.5.1 按下列方式显示QC图：单击菜单屏上QC键；单击工具栏上QC键；从“View”菜单选择QC3.5.2 设置质控方法：单击Setting单击Controller Method单击单选键，选择QC方法。X-bar：连续测定质控品2次，将所得数据的均值作为质控数据；L-J：质控品单次测定数据作为质控数据。3.5.3 设置靶值，输入批号。3.5.4 选择QC文件。3.5.5 检查质控品量，需要样品量1.0ml或更多，吸引样品量约150l。3.5.6 按样品分析程序分析质控品。3.6 样品分析3.6.1 手工模式：单击菜单屏204、上Controller键，弹出质控菜单，双击质控菜单上Manual Sample No.键，或单击工具栏Manual键，出现手工样品编号对话框，输入样品ID编号。3.6.1.1 上下颠倒试管将内容物充分混匀。3.6.1.2 轻轻取下盖子，防止血液溅出。3.6.1.3 将试管正确放入手工吸引管，吸引管浸入样品。3.6.1.4 按start键，样品开始吸取。8.1.5 当ready led 暗（并发出两声短音）移开试管。3.6.1.6 当ready led再次亮起时，准备下一个样品，重复上述步骤。3.6.2 进样器模式：3.6.2.1 将试管入试管架，将试管架放在进样器的右侧槽中，最多能入5个试管205、架。3.6.2.2 单击sampler start键4. 维护保养项目和频率4.1 每日保养：关机（仪器自动排空和清洗）。每500个标本或一天工作结束后关机，若连续使用仪器至少每24小时关机一次。4.2 每月保养：清洗进样池、分析通道和进样架。4.3 每万次循环保养：清洗样品旋转阀（显示“清洗SRV”的信息）。4.4 必要保养：倒掉贮存池中的液体；清洗手动清洗杯；清洗样品旋转阀槽；清洗进样槽；去除阻塞物（阻塞物去除程序）；清洗红细胞检测孔；去除光电检测部件的流动池中气泡；清洗光电检测部件的流动池；更换废液箱；清洗手动吸样探针的下方槽；清洗废物腔。4.5 部件供应：更换试剂；更换进样针；更换方向206、限幅器；更换第39号橡胶盘；更换保险丝。4.6 压力和真空度的调节：调节压力至0.25Mpa调节压力至0.16Mpa调节压力至0.07Mpa调节气压装置的真空度调节真空度至0.04Mpa5. 校准方法和程序5.1 以下几种情况需校准：初次操作前(由代理商进行)；当重复测定质控品发生变异；当更换主要部件如样品旋转阀。5.2 自动校准程序：5.2.1 单击主显示屏上Controller键，显示控制菜单；在控制菜单中双击Auto Calibration键，弹出Auto Calibration窗口。5.2.2 选择参考栏，键入按标准方法得出的HGB或HCT参考值，确认；输入所有的靶值，仪器开始分析。5207、.2.3 分析完成后，可剔除偏离数据：单击校准数据编号检查框，选择后，数据被剔除，将重新计算和显示参考平均值、分析平均值和平均补偿率。5.2.4 更新校准值：单击OK键，将自动校准得出的补偿率运用倒仪器，增加校准史，关闭自动校准窗口。重新检测样品，确认分析值在允许范围内，并且与参考值相差不大。5.3 校准样品：需使用符合下列条件的510种新鲜正常血液：健康人（当时未服药）血液；加入适量抗凝剂；每份不少于2ml；HGB100g/L；HCT在35.5-55.5之间。校准时不用质控品。6. 期间核查项目和频率7. 相关记录：仪器使用记录、定期维护记录、期间核查记录、校准记录ABO血型鉴定（生理盐水法208、）1. 原理根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。A型红细胞膜上含有A抗原，B型红细胞膜上含有B抗原，AB型红细胞膜上含有A、B抗原，抗A、抗B试剂是分别针对A抗原和B抗原的特异性抗体。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知的抗A、抗B试剂与受检者的红细胞混合时，与抗A试剂发生凝集者即为A型，与抗B分型试剂发生凝集者即为B型，与抗A、抗B试剂均发生凝集者即为AB型，与抗A、抗B试剂均不凝集者即为O型。所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗A或/和抗B。2. 标本采集2.1 标本种类：新抽取的抗凝血209、或手指末梢血和血清。2.2 标本要求：2.2.1 抗凝剂：如用抗凝血，多主张用EDTA K2（/dL）抗凝。2.2.2 用手指末梢血作血型检测时，最少样品量为100ul，如手指有冻疮，则主张采耳垂血。3. 标本储存：2小时内完成实验，室温放置下不超过8小时，4-8保存不超过48小时。4. 标本运输：室温运输5. 标本拒收标准：细菌污染、溶血标本不能作测定6. 试剂6.1 试剂名称：ABO血型检测试剂6.2 试剂生产厂家：南京华欣药业生物工程有限公司6.3 试剂组成试剂1：抗A分型试剂（蓝色），效价1：128，2-8避光保存，室温放置不宜过久。试剂2：抗B分型试剂（黄色），效价1：128，2-8210、避光保存，室温放置不宜过久。试剂3：5A、B及O型红细胞盐水悬液，自制。配制方法：分别采取已知A、 B、O三种血型的红细胞，经盐水洗涤3次，以压积红细胞配成不同浓度的红细胞悬液。红细胞悬液的配制悬液浓度（）压积红细胞（滴）盐水（滴）25102011112ml（40）0.8ml（16）0.4ml（8）0.2ml（4）为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取3个或以上的健康成人血液，按A、B、O型分别混合后，按上法制备。7. 操作步骤7.1 玻片法7.1.1 取清洁玻片1张（或白瓷板1块），用肥皂水刷洗后晾干，用蜡笔划出小格，并注明A、B字样。将抗A试剂、抗B试剂各一滴分别滴于玻片（或瓷盘）上A211、B处。分别取等体积待检血样（5-10红细胞悬液或全血）于抗A试剂和抗B试剂。7.1.2 另取洁净玻片1张（或白瓷板1块），用蜡笔划成方格，标明A细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。7.1.3 用不同的竹签将分型试剂与待检血样调匀，同时不停的摇动玻片（或瓷盘）并观察血型凝集（或溶血）反应。如以玻片做试验时，也可用低倍镜观察结果。7.2 试管法7.2.1 取洁净小试管（内径10mm60mm）2支，分别标上A、B字样，用滴管分别向A管滴加抗A分型试剂1滴。向B管滴加抗B分型试剂1滴。向A、B管各滴加待检血样的5红细胞悬液各1滴，混合。7.212、2.2 另取洁净小试管（内径10mm60mm）3支，分别标明A、B和O细胞。用滴管分别加入受检者血清1滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型5红细胞悬液1滴，混合。7.2.3 摇匀后以1000转/分的速度离心1分钟判定结果。将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（或溶血）现象。如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。8. 结果判断8.1 观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。8.2 凝集强度判断标准：4红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。3红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。2红细胞凝块分散成许多小块，见到游离213、红细胞。1肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。=镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞。MF混合凝集外观是指镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍呈分散分布。表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。8.3 按下表报告受检者红细胞ABO血型ABO血型正反定型结果分型血清受检者红细胞受检者受检者血清试剂红细胞抗A抗B抗AB血型ABOABA细胞B细胞O细胞9. 临床意义：输血、器官移植与亲子鉴定10. 操作性能：快速简便、特异性强、灵敏度高、重复性好。11 超出范围结果处理11.1 红细胞自凝：冷凝集系增高是最为常见原因。应用37-40的生理盐水洗涤红细胞可去除红细胞表面附着的导致214、红细胞凝集的冷集素。11.2 正反定型结果不一致原因11.2.1 分型血清效价太低、亲和力不强。如抗A血清效价不高，可将A亚型误定为O型，AB型误定为B型。11.2.2 红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例则不适当，使反应不明显，误判为阴性反应。11.2.3 受检者红细胞上抗原位点过少（如亚型）或抗原性减弱（见于白血病或恶性肿瘤）以及B类或cisAB等。11.2.4 受检者血清中蛋白紊乱（高球蛋白血症），或实验时温度过高，常引起红细胞呈缗钱状排列。11.2.5 受检者血清中缺乏应有的抗A和抗B抗体，如丙种球蛋白缺乏症。11.2.6 各种原因引起的红细胞溶解，误判为不凝集，部分溶血时，可溶性血型物215、质中和了相应的抗体。11.2.7 由细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。11.2.8 血清中有意外抗体，如自身抗I，常引起干扰。11.2.9 老年人血清中抗体水平大幅度下降。11.3 正反定型结果不一致的解决方法：11.3.1 另从受检者采取1份新鲜血液标本，这样可以纠正因污染或搞错样本造成的不符合。11.3.2 将红细胞洗涤数次，配成2盐水细胞悬液，用抗A、抗B、抗AI，抗AB及抗H做试验可以得到其它有用的信息。11.3.3 对受检红细胞作直接抗球蛋白试验，如结果呈阳性，表示红细胞已被抗体致敏。11.3.4 用A1、A2、B、O红细胞从自身红细胞检查受检血清。如果怀216、疑是抗I，用O型（或ABO相合的）脐血红细胞检查。11.3.5 如果试验结果未见凝集，应将细胞及血清试验至少在室温和4放置30min，用显微镜检查核实。11.3.6 如疑为A抗原或B抗原减弱，则可将受检红细胞与抗A或抗B血清作吸收及放散试验以及受检者唾液作A、B、H血型物质测定。后者只对80HAB分泌型的人有用。11.3.7 如试验结果红细胞呈缗钱状排列，加等渗盐水1滴，混合。往往可使缗钱现象消失。应注意不应先加盐水1滴于受检者血清中而后和红细胞作试验，以免使血清中抗体被稀释。11.3.8 如受检者为A型血而疑为有类B抗原时，可用下列方法进行鉴别：11.3.8.1 观察细胞与抗A及抗B的凝集强217、度，与抗A的反应要比抗B的反应强。这种区别用玻片法作试验更为明显。11.3.8.2 用受检者红细胞与自身血清作试验，血清中的抗B不凝集自身红细胞上的类B抗原。11.3.8.3 检查唾液中是否有A、B物质，如果是分泌型，可检出A物质而无B物质。11.3.8.4 核对患者的诊断，类B抗原的形成与结肠癌、直肠癌、革兰阴件杆菌感染有关。12. 方法局限性12.1 分型血清质量性能符合要求，用毕后，应放置冰箱保存，以免细菌污染。12.2 试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。12.3 操作方法应按规定，一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。12.4 按理IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4为最强，但为了防止冷凝集现象干扰，一般仍在室温（20-24）内进行试验，37可使反应减弱。12.5 离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。12.6 观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。12.7 判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误。12.8 试剂一旦发现浑浊不得使用。12.9 制红细胞悬液时防止自凝现象。13. 参考文献中国人民共和国卫生部医政司编. 全国临床检验操作规程（第二版）. 1997，89-92