1、医院输血科值班、工作人员培训制度及岗位职责编 制： 审 核： 批 准： 版 本 号: ESZAQDGF001 编 制： 审 核： 批 准： 版 本 号: 输血科工作制度一 查对制度 （标本接收时）（一）三查 1、检查输血申请单是否填写清楚，如姓名、性别、年龄、住院号、就诊卡号、床号、备血品种及备血量等； 2、检查标本管上是否贴有输血申请单联号，是否写明姓名、病区、床号； 3、核查受血者有无鉴定血型。（二）七核对 1、核对输血申请单病人姓名与送检标本上姓名是否一致； 2、核对输血申请单与病历上的病人姓名、住院号、床号、是否一致； 3、核对送检标本是否有溶血、污染；4、核对临床诊断写否；5、核对申2、请备血量是否一致；6、核对输血日期是否一致；7、核对门诊、急诊病人身份和受血者标本是否一致；以上“三查七对”如有一项不符合，一律退回。二 领血、发血制度1、领血时必须由专人到输血科来领血，特殊情况可由病区派一名能够办理核对手续的工作人员到输血科一同核对后方可领取血液；2、领血者必须带病人门诊病历或住院病历或取血单来领取血液；3、发血时要由输血科工作人员与领血人员两人进行核对，核对无误后方可发血；4、全血及血液成分制品发出血库后应立即输注给病人，原则上不能退回。5、输血时应严格遵守操作规程，应密切注意输血反应，如有异常反应，应立即停止输血，保留余血，即时追查原因，并通知输血科进行实验追查，同时做3、好记录。6、输血科工作人员应按照血液的保存日期先后进行发血，临床医务人员不应拒领（特殊情况除外）。三、工作人员制度1、初定血型一人（包括核对输血标本一次）;2、血型复核一人（包括核对输血标本一次）3、血交叉配血试验一人（包括核对病历一次）4、发血以及发血浆一人（包括核对病历一次）5、取血发血后要有登记记录输血科质量控制工作制度 为达到质量要求所采取的作业技术和活动，以提高医学检验质量，特制定本科室质量控制制度1、 进行室内质控（IQC），参加室间质评（EQA），作为科室常规化、制度化的质量保证体制。2、 质量控制包括检验方法、器材、仪器、试剂、质控品、标准品、操作手册、确认和建立方法、室内质控4、纠正措施、质控记录及对各专业质量的特点要求等。3、 记录质控全过程，包括质控物、操作过程、质控结果、上报结果、回报结果、与靶值差异可能原因、采取措施等。4、 阶段时期召开质控小组会议，总结EQA成绩、实验差距或不足、改进措施等。5、 参加地区和全国EQA总结会议。学习质控有关文献、掌握质控学术动态（质控项目、质控规则等）。6、 科室须在每天工作前进行质控工作，对于存在的问题，科室统一汇总并进行总结分析。输血科值班制度1、值班人员必须坚守岗位，履行职责，负责门急诊供血的各项工作，确保临床输血及时、安全。2、值班人员不得擅离职守，如确有急事必须离开时，应报告科主任，并由科主任指定人员接替后方可离开5、，并应严格交接班。3、工作认真负责，严守各项规章制度和操作规程，努力完成职责以内的工作。4、值班人员负责检查烤箱、孵箱、水浴箱、冰箱等仪器的运转情况，并作好温度等有关记录，检查科内的门、窗、水、电等是否关好。5、遇有供血不足、停电及其他重大事情时，应设法解决并作记录，并应及时向科主任及总值班汇报。6、值班者要随时保持工作场所和实验台的清洁卫生。7、认真填写值班日记并做好交接工作，交接时间根据不同季节各班次上下班时间确定。仪器设备的管理和维护制度1、 仪器、设备管理须指定专人统一负责，贵重精细仪器设备落实到专人负责和使用。2、 凡贵重仪器、设备的使用者，必须事先接受培训和带教，实习、进修人员不得6、单独进行操作使用。3、 必须严格按操作规程使用仪器、设备，用后清洗管道、擦拭外部、盖上防尘罩，准确、认真填写使用记录及运行状态，并签上使用者姓名。4、 仪器、设备的档案资料含：仪器设备性能说明书，图纸，合格证，配件，到货验收单，安装调试记录，使用说明书，维护保养和定期检验、校正记录、故障或事故记录等，应由专人负责保管。5、 仪器使用中如发生故障应及时通知专职维修人员进行维修，不得擅自拆卸设备零件，发现问题应立即停机，及时、准确地填写使用运行记录。6、 严禁仪器设备超负荷运转，平时对仪器设备要定时校验、维护。对长期不用的仪器设备要定期保养维护，并适时运转，如遇故障应及时排除或报修，使之始终保持完7、好状态，以备需要时正常运转。7、 对计量器具等设备必须严格执行周期检定制度，检定率达到100，以保证准确性。8、 本科仪器、设备、计量器具只限本单位使用，未经领导批准一律不得外借。试剂与材料管理制度1、试剂与材料生产商和供应商应具有国家法律、法规所规定的相应资质。选用的试剂与材料应符合国家相关标准，并能保证供给。2、每批试剂与材料使用前应确认在有效期内，并记录。3、试剂与材料过期、报废需报告科主任，作好相关登记。 4、定期检查试剂与材料的库存，若不足及时补充，以满足工作需要。5、每一新批号的抗血清、试剂细胞都由质控员进行效价、亲和力、特异性等测定并作好记录。临床用血指导、监督、会诊制度1、努力8、学习专业知识，熟练掌握输血专业理论和专业技术，培养具备指导临床用血的业务能力和理论水平。2、向临床供血时，必须根据临床科室的申请和患者的病情，提供合适的血液制品。3、利用多种形式向临床开展科学用血、合理用血的宣传，推广普及新的输血知识和输血理论。4、深入临床，与临床医生、护士合作开展患者自体输血。5、参与临床相关疑难病例的讨论，与临床医生一起研究危重特殊患者的输血问题。6、对临床输血进行严格监督，凡输血适应证不对、输血方法欠妥、输血手续不全的应及时提出，未发出的可拒绝发出。血液入库、保存、领发管理制度血液的入库1、 凡需入库的血液成品，应严格按入库制度核对验收。核对验收内容包括运输条件、血液外9、观、血袋密封及包装是否合格，标签填写是否清楚齐全（供血机构名称及其许可证号、血型、姓名、编号、血量、血液品种及采血日期、血液成分的制备日期、储存条件等），确保入库血液及血液成分制品的质量。凡标签污染，热合不良漏血，核对发现问题的血液制品应拒绝入库。2、 血液验收合格并核对无误后，双方签名确认。血液的贮存1、贮存血液按不同品种、血型、规格和有效日期分别竖立放置于金属架中，存放在不同的专用冰箱内。2、血液成品保存温度及保存期如下：悬浮红细胞：42 CAPD 35天；CPD 28天；ACD 21天；悬浮少白红细胞：42 CAPD 35天；CPD 28天；ACD 21天；洗涤红细胞：42 24小时内输10、注；冰冻红细胞：42 解冻后24小时内输注；机采血小板：222 5-7天（水平振荡）；机采粒细胞：222 24小时内输注；新鲜冰冻血浆：-20以下1年；普通冰冻血浆：-20以下3年；病毒灭活血浆：-20以下3年；冷沉淀：-20以下1年；全血：42 CAPD 35天；CPD 28天；ACD 21天；3、贮血冰箱应每日定时观察，并作记录。当冰箱的温度自动控制记录或报警装置发出报警信号时，要立即查明原因，及时解决并记录。4、平时应做好贮血冰箱的维护保养，经常保持冰箱的清洁、干燥，严禁存放与血液无关的用品，以防血液污染。4冰箱空气培养每月一次。5、对血库贮存的血液，应每日观察血液质量有无变化，如发现异11、常 ( 如颜色不正常，分界不清，有溶血、脂血、疑块、雾状、絮状物、气泡等 )要及时处理及反馈质控员。6、保持血库工作良好秩序，冰箱中库存血液及血液成分制品存放整齐，按失效日期先后存放，入库、出库应轻拿轻放，手续齐全。 血液的领发 1、配血合格后，用血科室必须有医务人员持能够确认受血者身份的凭据（如病历或取血单），并携带取血箱前来取血。双方必须进行“三查七对一确认”，准确无误后，双方共同签名方可发出。三查：一查患者血标本；二查献血员血标本；三查配血报告单；七对：一对血型；二对姓名；三对住院号或就诊卡号；四对病区床号；五对性别；六对临床输血申请单；七对诊断；一确认：最后确认患者血型与血液出库单上的12、血型是否相符。2、供出的血液应做到四查（ 有无溶血、 凝块、污染、热合渗漏 ） 七对（血型、品种、血量、采血日期、失效日期、血袋编号、批准文号 ），当面交接清楚。3、每袋血液发出前，发血人员应再次检查复核。要求做到 :a. 血液质量良好 ；b. 血袋完好无损 ；c. 包封严密 ；d. 标签、各项检验报告单填写清楚、完整 ；e. 血型和交叉配血实验无错误。4、发血时按先后次序，逐个发出。5、过期血和不合格血液一律不得发出。凡已发出的血液不予退回。6、输血科工作人员应按照保存日期的先后先发放保存日期较长的血液（ 必须用近期血液者例外）。7、血液发出后，须将血液标本保留一周，待患者无不良反应后弃去。13、8、输血后，若有输血不良反应，病区应及时填写患者输血不良反应回报单并送回输血科。工作人员培训和继续教育制度为提高工作人员的专业理论和业务技术水平，促进学科发展，特制定本制度。1、制定出各级各类人员切实可行的培训计划，加强管理，认真组织落实。2、输血科技术人员必须首先要熟练掌握ABO血型正反定型、Rh(D)定型、抗体筛选试验，交叉配血试验（包括能够检出IgG抗体的聚凝胺法、酶法，微柱凝胶法）等基本技术，尤其要掌握这些实验技术的影响因素，假阴性和假阳性的原因分析与克服方法；其次要掌握血型标准血清的效价测定，产前免疫性抗体及新生儿溶血病的检查、血型自动加样系统的操作等实验技术。3、职工培训首先安排学14、习科内制定的各项工作制度，强化基本实验技术的培训，其次要了解国内外学术动态。每季度组织1-2次业务知识讲座，能者为师。4、结合科室实际情况和未来工作发展需要，选拔业务骨干参加与本专业有关的学术会议和培训班，必要时派人外出进修，学习输血医学近年来的发展动态、最新知识。5、凡参加外出开会、培训、进修的工作人员，结束学习返回后，须及时向全科人员传达所学知识，如数上交培训资料，由科室统一保管使用，未经科领导批准，任何人不得私自存留。6、加强三基知识培训，定期采用多种形式考核。7、表彰和奖励学习、教学及科研工作中成绩显著的个人。门、急诊病人输血有关规定为了加强门、急诊输血管理，保证病人用血安全，规范和方15、便门、急诊输血病人的用血，特制定本规定：1、门诊病人输血由门诊导医台接待。由专人负责将病人的血标本、输血申请单和收费单据等相关手续送到输血科。在输血科取血或血制品时，与输血科一起认真三查七对，确认无误后双方签字再取血, 最后带病人至二楼急诊输液室交输液室护士实施输血。2、急诊病人输血由急诊中心负责。由专人将病人的血标本、输血申请单和收费单据等相关手续送到输血科。在输血科取血或血制品时，与输血科一起认真三查七对，确认无误后双方签字再取血。3、门、急诊输血病人血标本采集应严格按照输血规范要求执行。血标本的试管上贴好标签，写清病人姓名和就诊卡号。4、门、急诊病人在输血前必须要再次三查七对，准确无误后16、开始输血，输血开始半小时内应密切观察病情，发现输血反应要及时报告上级医师和输血科，并认真处理。5、病人和家属一律不能取血。6、门诊病人有关输血问题与6404导医台联系；急诊病人有关输血问题与6381急诊预诊处联系；任何关于输血咨询与6825输血科联系。 输血科工作职责科主任职责1、在医院党委和院长领导下，全面负责输血科的医疗、教学、科研和行政工作。2、制定科室长远发展规划和年度工作计划，并认真组织实施。3、建立、健全各项工作制度和标准操作规程，施行全面质量管理，定期督促、检查、考核落实情况。4、组织、检查、指导临床输血业务的开展和研究工作，积极引进新技术，开展新项目、新疗法。5、坚持科技兴科，17、认真组织、安排、检查全科工作人员的业务培训和实习、进修人员的学习情况，落实培训和教学计划，不断提高全科工作人员的工作能力和业务水平。鼓励全科人员积极参与科学研究，撰写论文，积极参加各种学术会议，并有相应奖励措施。6、定期召开科务会议，研究、分析各项工作开展情况及存在问题，制定改进措施，布置和总结工作。7、负责本科医德医风建设，经常进行医疗安全教育，严防事故和差错，确保输血安全。主任技师职责岗位职责1、科室管理工作(1)协助科主任负责制定科室的中长期发展规划，指导科室建设和发展。(2)在科主任领导下，全面负责并指导科室工作部门的科研、教学、临床检验等工作。制定科室的年度工作计划，组织实施，经常督18、促检查。(3)作好科室人员、设备的合理安排和调度，建立良好的工作秩序。(4)督促各级人员认真执行各项规章制度和技术操作规程，作好登记、统计。(5)经常检查安全措施，严防差错事故。2、医疗工作(1)指导下级技术人员的临床研究和临床服务工作，改进技术方法，提高研究水平和临床检测质量。(2)研究与开发新项目、建立新方法、推广应用新技术新成果等。(3)指导建立实验室室内质量控制制度，保证科学研究和临床检测质量。(4)检查、指导和参加由主管技师负责的定期校正检验仪器和试剂。3、教学工作(1)全面负责科人员的业务训练、技术考核。(2)参加编写本专业的专著、各类讲义等。(3)全面负责进修、实习人员的培训及教19、学。(4)指导硕士研究生。(5)经常组织开展全科的学术活动，作好医学情报资料的交流。(6)参加继续医学教育班的教学工作。4、科研工作 (1)协助科主任做好本专业学科建设，人才培养的计划拟定，在科主任领导下组织、实施、评估，保证本专业学科健康有序发展。(2)跟踪本专业国内先进水平，结合临床积极开展新技术、新项目研究，积极申报国家或省级课题，投稿刊发学术论文，参加全国或国际性会议。(3)带领科室开展技术革新，改进技术措施。根据实际研究与临床工作需要，结合本部门的实际，能够创立新方法、研究新技术。履职要求1、遵纪守法，热爱本职工作，遵守医院和科室各项规章制度，具有良好的医德医风和团队精神。2、熟练掌20、握临床输血专业基本与相关的理论知识以及专业技术技能。在输血技术方面有所专长，熟悉临床输血相关学科的新进展，积极掌握国内外领先的优势项目或核心技术。 3、广泛大量阅读国内外专业期刊，熟悉本专业国内外现状及发展趋势，不断吸取新知识、新理论和新技术，并用于研究和临床实践之中，保持和发扬在国内外领先的研究水平。4、具有培养本专业中、高级专业人才的能力，有较好的教学组织和管理能力，主动积极做好传、帮、带工作。5、有较高的学术造诣，具有跟踪本专业先进水平及独立承担科研工作的能力，能根据本专业的发展提出课题，并有课题设计、组织及总结的能力，在省、市内外有一定的知名度，在省、市专业学会或省级刊物有一定的职务。21、6、硕士以上学位，英语达到6级以上或相应水平。副主任技师职责岗位职责1、在科主任和主任技师指导下，负责派定的医疗、教学、科研工作。2、医疗工作(1)主持实验室建设和管理，负责全面质量，保证输血安全。(2)掌握输血所有临床检测项目的原理和操作。(3)参加建立科室的质量控制制度，保证科学研究和临床检验的质量。(4)指导成分输血和其他临床用血，处理输血反应。(5)管理仪器设备的使用和维修，检查和督促本部门试剂和消耗品的使用。(6)积极配合医疗和科研，根据需要开展新的检验项目，满足研究与临床工作的要求。(7)执行中级技师一切岗位职责。3、教学工作(1)参加学术活动和继续医学教育的教与学工作。指导下级技22、术人员的实验操作，考核其工作质量。(2)每年为下级医技人员进行技术讲课和交流至少2次。(3)负责检验系输血检验的教学和实习生的带教，积极监督并指导下级医技人员开展实习生带教工作。(4)每年需系统学习输血医学专业或临床检验专业基础课新进展，作好读书小结。4、科研工作(1)参与制定实验室发展规划，操作规范。(2)参加实验的日常科研管理，负责临床检验仪器的请领、维修和保养(3)掌握科研选题、课题设计及研究方法，能结合临床实践提出课题，开展科研工作。(4) 参加研究、开发适合临床需要的新技术、新方法和新项目。(5) 根据临床和实验室科研工作结果，积极撰写论文及综述。履职要求1、遵纪守法，热爱本职工作，23、服从组织安排，遵守医院和科室各项规章制度，具有良好的医德医风和团队精神。2、掌握输血医学专业相关的基础理论与基本知识，熟悉输血临床。熟练掌握输血相关技术如血型鉴定，交叉配血（抗人球法），新生儿溶血病的实验诊断，自身输血技术和无菌技术，血栓弹力图技术等。 熟悉临床输血基础理论和技术，了解血液学，免疫学，分子生物学等有关知识。3、经常阅读国内外专业期刊，了解本专业尤其是从事领域的国内外现状及发展趋势，不断吸取新知识、新理论与新技术，并用于研究和临床实践之中。加强基础理论和基本知识的学习，提高从事本职工作的能力。4、本科以上学历，英语水平达CET4级以上，具有指导下级技师、进修人员的能力，能承担规定24、的教学任务。5、具有较强的科研能力，掌握科研选题、课题设计及研究方法，能结合临床实践提出课题，开展科研工作，并进行课题总结。6、每2年发表1篇以上专业论文和文献综述。每2年至少向国家级或国际学术会议投稿1篇。7、能够参加研究、开发适合临床需要的新技术、新方法与新项目，每2年一项。主管技师职责岗位职责1、在科主任和上级技师指导下，负责派定的医疗、教学、科研工作。2、医疗技术工作(1)参与实验室建设和管理。(2)承担输血七项以上临床检测项目。(3)参加建立实验室的质量控制制度，保证科学研究和临床检验的质量。(4)积极配合医疗和科研，根据需要开展新的检验项目，满足研究与临床工作的要求 。(5)参加管25、理仪器设备的使用和维修，检查和督促本部门试剂和消耗品的使用。(6)考察先进仪器设备在研究与临床工作中的价值与性能，并负责其维护与管理。(7)执行初级技师一切岗位职责。3、教学工作(1)参加学术活动和继续医学教育的教与学工作。指导下级技术人员的实验操作，考核其工作质量。(2)每年为下级医技人员进行技术讲课和交流至少1次。(3)每年至少在全科做读书报告2次。(4)每年需系统学习输血医学专业或临床检验专业基础课新进展，作好读书小结，并交上一级医师(技师)修改。(5)每年必需参加医学继续教育课程，一类学分不少于15分。(6)参加实习生带教工作和输血检验的教学。4、科研工作(1)参与制定研究室发展规划，26、操作规范。 (2)参加科室的日常科研管理，负责临床检验仪器的请领、维修和保养。(3)积极参加申报课题工作，帮助课题负责人做一些具体细致的工作。并以合作申请者身份，积极参与课题申请活动。 (4)参与制定科研选题，课题设计及研究方法等工作，结合临床实践、开展科研工作，并进行课题实验部分的总结。(5)参加研究、开发适合临床需要的新技术、新方法和新项目。履职要求1、遵纪守法，热爱本职工作，服从组织安排，遵守医院和科室各项规章制度，具有良好的医德医风和团队精神。2、掌握输血医学专业相关的基础理论与基本知识，了解输血临床有关理论。熟练掌握输血相关技术如血型鉴定，交叉配血（抗人球法），Coombs试验，自身27、输血技术和无菌技术、血栓弹力图技术等。熟悉临床检验基础理论和技术，了解血液学，免疫学，分子生物学等有关知识。3、经常阅读国内外专业期刊，了解本专业尤其是从事领域的国内外现状及发展趋势，不断吸取新知识、新理论与新技术，并用于研究和临床实践之中。在加强基础理论和基本知识的学习、搞好基本技能训练的同时，在上级医技人员指导下，提高从事本职工作的能力。4、大专以上学历。老人员中专以上学历，新人员大学本科以上学历。5、每2年发表1篇发表科学论文和文献综述。每2年至少向国家级或国际学术会议投稿1篇。6、能够独立带教实习生，并能正确引导下级技师处理常见问题，有一定的组织管理能力。技师职责岗位职责1、在科主任和28、上级技师指导下，负责派定的医疗、教学、科研工作。2、医疗工作(1)主要承担或参加临床输血工作。严格执行临床输血技术规范。(2)承担至少5项临床输血项目。认真做好实验室的质量控制，保证临床输血检验的质量。(3)积极配合医疗、科研，在上级医技人员指导下开展新项目，满足研究与临床工作的需要。(4)服从领导，遵守劳动纪律。(5)参加正常值班，在工作需要时主动加班。(6)保障正常的工作次序和环境，避免重大责任事故。(7)接收标本和发血及血制品时应严格执行查对制度。认真核对检验结果，填写输血报告单，作好登记，签名后发出报告。(8)熟练掌握实验室常规仪器的操作使用。3、教学工作(1)指导进修和实习人员的技术29、操作工作并给予研究生技术和设备使用等帮助。(2)每年至少在全科做读书报告一次(3)每年需系统学习、回顾输血专业或临床检验专业基础课12门，了解新进展， 作好读书笔记，小结。(4)每年必须参加医学继续教育课程，按规定完成继续教育学分。4、科研工作(1)参加科研工作，按期保质地完成承担的课题任务。(3)发表科学论文和文献综述，每二至三年完成1篇。(4)作好科研试剂的购买、保管、使用登记，节约各项研究使用的耗材，及其仪器设备的管理维护。(5)参加研究、开发适合临床需要的新技术、新方法、新项目。(6)负责科研仪器的请领、维修和保养，作好科研试剂和购买、登记、使用管理、保存领用科研耗材，作好使用管理和节30、约。履职要求1、遵纪守法，热爱本职工作，服从组织安排，遵守医院和科室各项规章制度，具有良好的医德医风和团队精神。2、掌握输血专业的基础理论与基本知识包括输血技术学，临床输血学，输血管理学。了解血液学，分子生物学、免疫学、遗传学、临床检验等相关学科的基础理论和技术。3、经常阅读国内专业期刊，在上级医技人员指导下阅读国外的文献，了解本专业尤其是所从事领域的国内外现状及发展趋势，不断吸取新知识、新理论、新技术，并用于研究和临床工作的实践。在加强基础理论和基本知识的学习、搞好基本技能训练的基础上，在上级医技人员指导下，提高从事本职工作的能力，能独立解决一些工作中的问题。4、本科以上学历，英语达CET431、级以上水平。5、具有良好计算机操作能力。6、具有一定的科研能力。技术规范与操作规程ABO和Rh血型鉴定（试管法）【原理】 正定型：用已知血清测定红细胞上未知抗原。 反定型：用已知抗原测定血清中的未知抗体。【操作】 正定型： 将受检者的红细胞配成5%的盐水悬液备用，取小试管3支，并标明A、 B和D并各加入1滴抗A和抗B、抗D试剂，再加入受检者红细胞悬液1滴，混匀，1000rpm,离心1分钟。 反定型：取小试管2支，并标明a和b，分别加入5%标准A型和B型红细胞1滴，再加入受检者血清1滴，混匀，1000rpm,离心1分钟。将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（或溶血）现象，32、如肉眼不凝集，应将反应物倒在玻片上，再以显微镜检查。【结果判定】1、ABO血型结果判定正定型抗A 抗BA + -B - +O - -AB + +反定型A型红细胞 B型红细胞- + + -+ +- -1、 Rh（D）血型结果判定：红细胞与抗D凝集为Rh（D）阳性，无凝集为Rh（D）阴性，阴性必须作抗人球试验确证。【注意事项】1、 单克隆抗体试剂和试剂细胞每天使用前必须与相应的红细胞和血清作阳性、阴性对照，以检测其活性。2、 对含有较多自身冷凝集素的受检者，正定型易误定为AB，需用37生理盐水洗涤受检者红细胞23次，去除吸附在红细胞上的冷凝集素。 3、Rh（D）血型只做正定型。 ABO和Rh血型鉴33、定（抗人球法）【工作准备】1、A1，B标准反定型细胞的制备（1%）：取5ul A型和B型标准压积红细胞分别悬浮于0.5ml低离子稀释液中，制成1%标准反定型细胞。（若是成品试剂细胞，红细胞浓度为5%，需稀释5倍）2、5%样本红细胞制备：样本压积红细胞25ul或50ul全血悬浮于0.5ml低离子液中。【操作步骤】1、A1，B管中分别加入50ul 1%A1，B标准红细胞，再加入50ul标本血清或血浆（反定型）。2、取5%样本红细胞10ul加入A，B，D和Ctrl管中3、离心10分钟，判断结果，记录。【注意事项】1、每日实验前，先取出低离子稀释液及标准红细胞，平衡至室温，以防冷凝集。2、必须标记卡。34、3、DiaMed卡封口已破损时，管中干涸，或有气泡时，不可使用。4、应用低离子稀释液保证反应结果可靠，正定型细胞浓度要在5%左右，不可太浓或太稀。5、纤维蛋白可吸附部分红细胞，应将血样离心。6、反定型先加样，以便标准细胞与血清血浆反应，先加细胞再加血浆或血清。7、正反定型对照，确定结果及亚型。正定型结果若为弱阳性，应怀疑为ABO亚型。可重做完全测试。正反定型不符时，请设计实验分析。 8、质控管为阳性时，请先用生理盐水洗细胞，再做血型。9、严格按照标准程序操作可检出弱抗原，血型亚型。10、某些药物、疾病可导致弱阳性及正反定型不符。11、细菌及异常血清蛋白可影响结果。 ABO标准红细胞的制备【操作35、步骤】 1、取10ml试管3支，分别标记A、B、O。2、分别取35人份健康新鲜A型、B型、O型红细胞于上述三支试管内，混匀。3、用大量生理盐水充分洗涤至少3次，每次用滴管充分混匀，洗涤至上清液澄清为止，弃上清，留压积红细胞备用。4、将压积红细胞根据实验方法的要求配制成不同浓度的标准红细胞悬液备用。【注意事项】1、配制过程中各型之间应谨防交叉污染，滴管、剪刀等要严格分开；2、配制好的压积红细胞4oC保存可用35天，一旦有溶血现象，都应立即重新配制。3、每日使用前都应与对应的血清作阴性、阳性对照，以检测其活性和特异性。ABO血型正反定型不符原因及处理【原因】1操作或实验本身的错误 2. 红细胞的问36、题 3. 血清的问题【处理】1、排除实验操作失误，如血清未加，使用错误的抗体或红细胞试剂（如红细胞在洗涤的过程中受到污染），血清或试剂与红细胞比例不当，没能认识到溶血也是阳性反应等。2、排除操作失误后，按下列基本程序处理：1） 重取标本。2） 多次洗涤标本红细胞或试剂红细胞，除去可能引起意外阳性反应的血浆中的或试剂红细胞中的化学成分。3） 应用抗-AB，抗-A1或抗-H检测红细胞。4） 如果怀疑血清中有抗-A1，则用数份抗A2红细胞标本进行检测。5） 用O型筛选细胞检测，确定是否是非特异性的冷抗体的干扰。6） 室温孵育30分种后，离心观察凝集结果，能检测弱的抗原抗体反应，但要用O型和自身红细胞37、做对照，以排除抗-I或抗-H等抗体对正反定型结果的干扰，抗-I和抗-H是对所有成人红细胞都反应的凝集素。7） 抗原弱表达或血清意外反应应结合临床具体分析，分别对待。8） 样本红细胞可能由于病理情况被一些未知的抗体致敏，此时要对红细胞做相应的处理后再定血型，例如多次洗涤样本红细胞再次实验。9） 对于血型抗原表达弱的情况下，可采用吸收放散的方法进行血型的鉴定。10）有些是由于红细胞自身冷凝的原因，发生自身的凝集所致，应将细胞做预温处理或恒温下进行血型的鉴定。11）有些进行了血型不合的骨髓移植的病人在一定时间内也可以出现正反定型不一的情况，应紧密结合临床作出正确的判断。总之，血型的正反定型不一致，要38、从红细胞自身和血清两个方面寻找原因，要结合临床，联系病情等相关因素作相应的处理。盐水法交叉配血【实验原理】红细胞加入血清中，当血清中存在针对红细胞膜上的ABO血型或其它血型抗原的抗体时，离心力加速抗体抗原的结合速度，由于人类ABO血型抗体是以IgM型为主(包括MN、P等血型抗体),这种抗体可以结合多个盐水介质中悬浮的红细胞，最终导致红细胞凝集;也可以激活补体，导致红细胞膜的损伤，出现溶血。在进行交叉配血试验时，加入受血者血清和用生理盐水制备的献血者红细胞悬液的试管，称为交叉配血主侧管，加入献血者血清和用生理盐水制备的受血者红细胞悬液的试管，称为次侧管。分别离心后，肉眼观察试管中红细胞有无凝集或39、溶血。为了防止红细胞弱凝集的漏检，必须用显微镜观察镜下有无红细胞凝集，两者合称为盐水介质交叉配血试验。此试验主要检查受血者或献血者血清中是否存在破坏对方红细胞的不规则完全性（IgM型）或补体依赖性红细胞抗体;并可以验证ABO血型鉴定是否正确，确保受血者和献血者血液相容，防止发生急性输血性溶血反应。【操作步骤】1、抽取受血者静脉血34ml，待凝固后分离血清;以生理盐水洗涤受血者红细胞3次，配成3%红细胞悬液。同样的方法处理献血者标本;2、取洁净小试管2支，1支加入受血者血清（PS）+献血者红细胞（DC）,标为主侧管，另1支加入献血者血清（DS）+受血者细胞（PC），标为次侧管;3、标为主侧管内加40、受血者血清2滴，献血者红细胞悬液1滴。次侧管加献血者血清2滴，受血者红细胞悬液1滴;4、混匀后，立即将两只试管放入离心机，以120g离心1min 或1300 g离心15s;5、小心取出试管后，肉眼观察上清液有无溶血现象，再轻轻摇动试管，直至红细胞成为均匀的混悬液，并观察有无红细胞的凝集;6、取载玻片一张，用两滴管分别从主侧管和次侧管内吸取红细胞悬液各1滴，分别滴在载玻片两侧，用显微镜观察结果，最后得出试验结果。注：3%红细胞悬液配制方法： 取洗涤后压积红细胞30ul，加入1ml生理盐水中悬浮，即成为3%的红细胞悬液。【结果判断】ABO同型配血，主侧和（或）次侧管红细胞无凝集，无溶血，表示受血者41、和献血者盐水介质配血相容，献血者血液可以输注。出现主侧和次侧试管或单独一侧试管内红细胞凝集和（或）溶血则表明两血不相容，献血者血液不可输注。【注意事项】1、盐水介质交叉配血试验是临床输血前最基本的相容试验，此试验灵敏度不高，特异性不强，仅能检测完全性（IgM型）红细胞血型抗体，不能检测不完全性（IgG型）抗体。在临床实际工作中，盐水交叉配血完成后，必须增加另外一种可以检测不完全性抗体介质的配血方法，防止此类抗体漏检，保证输血安全；2、应用盐水介质交叉配血试验时，出现两血不相容，应当首先重新进行献血者和受血者ABO血型鉴定，排除ABO血型鉴定错误导致的两血不相容；3、溶血标本不得用于交叉配血试验42、；4、冬季实验室温度较低出现红细胞凝集时，应当排除受血者或献血者血清中存在自身冷凝集素。分别取受血者和献血者红细胞悬液各1滴，滴加在载玻片上，显微镜下观察有无红细胞自身凝集现象，借以确定是否存在自身冷凝集素。确定是冷凝集素导致的红细胞凝集，可以把主侧或次侧试管放置在37度水浴箱内，轻轻摇动试管，取出试管后立即吸取试管内红细胞悬液放在显微镜下观察结果。抗人球卡交叉配血【实验原理】 微柱凝胶测试法基于生物化学凝胶过滤技术和离心技术及免疫化学抗原抗体特异性反应。当红细胞上的抗原与相应抗体反应时，通过抗人球蛋白的桥联，红细胞发生凝集。离心时凝集块不能通过凝胶间隙而留在凝胶上层，呈阳性反应。未凝集红细胞43、离心时可通过凝胶间隙而沉积在凝胶底部，呈阴性反应。【工作准备】1、将低离子稀释液室温平衡。准备样本。2、1%样本红细胞的制备：分别取病人和献血者压积红细胞5ul悬浮于0.5ml的低离子稀释液中。【抗人球卡的准备】选择配血抗人球卡（Liss/coombs卡），揭去封口锡纸（需要几孔打开几孔，可用剪刀剪），编上病人（主侧）和献血员（次测）姓名（或号码）。【加样】1 主侧加入50ul献血者细胞（1%），25ul受血者血浆或血清。2 次侧加入50ul受血者细胞（1%），25ul献血者血浆或血清。【孵育及离心】370C孵育15分钟。然后离心10分钟（转速1030rpm，机器已自动设定）【读取结果】按达亚44、美卡图示：主侧（），次侧（），认为交叉配血结果良好。【注意事项】1、加样时，每个病人都要更换加样头，避免病人间交叉污染；先病人后献血员，避免献血员标本污染病人标本（或每次都更换加样头）；加红细胞和血浆要在反应孔两侧壁上，避免主次侧相互污染，影响结果判断。2、加样时，先加红细胞，后加血清，否则会致假阴性。3、LISS溶液从冰箱取出后，室温平衡10分钟，否则会致冷凝集。4、若对次侧弱凝集可疑，可补做病人自身红细胞对照，即只加病人1红细胞悬液50 ul，其他操作同上。5、10分钟离心过程不能人为中断，否则本次实验结果无效。孵育、离心时间不能随意缩短或延长。6、结果判断时，溶血也应视为配血不合或由于其45、他原因造成，不能忽视。凝聚胺交叉配血【原理】红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺溶液，它是一种高价阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞表面的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后，加入悬浮液（Resuspen46、ding）, （Resuspending）具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性，但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。【试验步骤】1、取二支试管，标主次侧，主侧管加病人的血清（血浆）2滴，加供血者35%红细胞悬液（洗涤不洗涤均可）1滴，次管反之。2、各加LIM0.7ml，混合均匀后，再各加Polybrene溶液2滴，并混合均匀。3、用BASO血库专用离心机1000g离心力，离心10秒（若为普通离心机，离心条件为：3400rpm，离心10秒），然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。4、轻轻摇动试管，目测红47、细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。5、最后加入Resuspending 2滴，轻轻摇动试管混合并同时观察结果。如果在30秒1分钟内凝集散开，代表是由Polybrene引起的非特异性聚集，配血结果相合，如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。【注意事项】1、可以用含EDTA之血浆代替血清。2、若病人血清（血浆）含肝素，如洗肾患者，须多加4 6滴Polybrene溶液中和肝素。3、试剂使用前请回复室温再行操作。4、加做辅助性抗球蛋白试验，目的是增加检测抗-K的敏感性，对检测其它红细胞抗体无帮助。5、在冬天室温极低的情况下，操作48、交叉配血试验，某些病人的血清中含有寒冷凝集素等因素，而导致假阳性的结果出现。若有此怀疑，建议在最后加入 Resuspending时，将试管立即置入370C水浴中，轻轻转动试管混合，并在30秒内观察结果。6、BASO血库专用离心机1000g离心力相当于3000rpm。上文所指的普通离心机一般为80型离心机，其相当离心力所对应的转速为3400rpm。塑料器材采血操作规程【采血器材】 采血袋，碘伏，酒精，棉签，压脉条，止血钳，血型标签，采血秤等【采血步骤】 1 压脉条束紧上臂，使静脉充盈，选择清晰可见、粗大、弹性好、较固定、不易滑动的静脉。2 用碘伏以穿刺点为中心由内向外螺旋式旋转涂拭，待干。3 采49、血器导管中段用止血钳夹住，血袋要平放于采血秤上，拔去护针帽，采血者用右手拇指、食指、中指持采血针柄，针头斜面向上或稍侧斜，针与皮肤成30O-50O角刺入皮肤。当针头刺入皮肤后改变角度呈10 O左右，沿静脉走行方向平稳刺入静脉。当看到血液回流时，此时保持针头位置固定，视血流通畅，即可固定针头位置，松开止血钳，轻轻摇动采血袋，使血液与抗凝剂充分混匀，并嘱放血者不停地做松握拳动作。4 当采血量达到所需要量时，用止血钳夹住导管，松开压脉带，拔出采血针，用干棉签压住静脉穿刺点。5 用热合器热合导管，贴上血型标签，注明采血者详细信息。放4冰箱内保存。【注意事项】1、采血时应精神集中，按操作规程进行。2、遇有穿刺不顺利或血流不畅时，不可惊慌，要分析原因并采取措施及时纠正，必要时请其他人员协助。若进行第二次穿刺，需更换一套采血器材。3、采集过程中，密切观察血流情况，并不断摇动血袋使血液与保存液充分混匀。 4、采血量的计算：采血后血袋重量（g）=采血量（ml数）全血比重采血袋和保养液的重量（全血比重为1.050）