1、医院遗传咨询介入性产前诊断、唐筛等制度汇编编 制： 审 核： 批 准： 版 本 号: ESZAQDGF001 编 制： 审 核： 批 准： 版 本 号: 第一部分 遗传咨询遗传咨询门诊医师职责1 有人道主义精神。本着对患者个人、家庭及社会负责的原则，以热情关怀的态度对每一位来访者，并对患者的病情做到严守秘密。 2 熟悉医学遗传学。对遗传病有基本了解，对有关遗传病的基本知识、基本理论、风险计算等应较为熟练。3具有定的临床经验，并掌握遗传病的诊断技能。要能准确地把握遗传病临床体征，实验室检验结果、系谱分析等，从而进行综合分析，以便对疾病作出确切的诊断，且能对防治进行指导。4了解遗传病的群体资料。对2、一些常见的遗传病种，必须了解它在当地的群体中的发病率、基因频率、携带者频率、突变频率等，才能准确地估计复发风险。5具备查阅有关遗传病的工具书和网络资源的能力。6当遇到不能解决的问题时，以便及时请求会诊、转诊或其他帮助。遗传咨询程序1.询问病史：详细询问先证者(先证者又称索引病例，是指家族中第一个就诊或确诊 的遗传病患者)自觉症状、发病年龄、发病原因、有害因素接触史等。详细询问父母双方的血缘关系，职业。母亲孕期，特别是怀孕前3个月有无接触有害因素，如射线、农药、有害化学物质、有毒气体；有无慢性病史，如肝炎、糖尿病、肾脏病、高血压等；有无病毒感染史；有无缺氧、高热及用药史，如安眠药、四环素、氯霉素3、烷化剂等。孕妇生育史，如是否生过畸形儿、遗传病儿、有无自然流产史等。 2询问家族史并绘制系谱图：问家族史时，应从患者的同胞开始问起，然后再分别沿父系和母系追问，尤其不要遗漏先证者的I（级亲属是指父母、子女、同胞兄妹）、级亲属。将上述关系和情况按国际通用的方式绘制成系谱图。 3临床检查：按一般临床要求进行检查，但要注意肤纹的检查。 4实验室检查：根据需要确定检查项目，染色体核型分析，分子生物学诊断，绒毛、羊水、脐血的产前诊断，生化、内分泌、免疫学检查及各种必要的物理检查等。 5确定是否为遗传病：从系谱调查出发，结合患者的病史、体征及实验室检查，包括染色体分析、生化检查结果等，做出明确诊断。因为4、许多遗传病病种发病率极低，临床上很罕见，对其认识还很不足，因此必要时应争取其他科室的支援，甚至外院专家的会诊。 6确定疾病的类型：是遗传病，还是先天性疾病？是单基因病、多基因病，还是染色体病？ 7确定遗传方式，推算再发风险率：所谓的再发风险率是指已经出生了一个遗传性疾 病的病儿，以后再出生的每个子女发病的可能性。如常染色体隐性遗传病，再发风险率为25；如已有一个病儿，其第二胎的再发风险率为25；如已有了两个病儿，其第三、四胎的再发风险率仍各为25。所以说再发风险率没有记忆能力。8提出处理意见和建议，特殊病例登记建卡，便于以后的查询。遗传咨询门诊工作流程采集信息（询问先证者情况及家族遗传病史、医5、疗史、流产史、死胎史、早产史、婚姻史、环境因素和特殊化学物接触及特殊反应情况、年龄、居住地区、民族等）绘制系谱临床检查和物理检查妇产科、儿科、神经科等(包括影像学)检查，特别注意肤纹检查实验室检查（染色体核型分析、分子生物学、生化、内分泌、免疫学检查等）确定疾病的类型（与哪种遗传病有关？）确定遗传方式（单基因遗传病）遗传病再发风险的估计提供产前诊断方法的有关信息（胎儿标本采集方法主要有绒毛活检、羊膜腔穿刺、脐静脉穿刺等。产前诊断方法主要有超声诊断、生化免疫、细胞遗传诊断、分子遗传诊断等）提供结婚、生育或其他建议提出处理意见和建议遗传咨询门诊病历书写规范1) 遗传咨询病历书写是指医务人员通过问诊6、查体、辅助检查、诊断、治疗等医疗活动获得有关资料，并进行归纳、分析、整理形成医疗活动记录的行为。2) 遗传咨询病历书写应当客观、真实、准确、及时、完整。3) 病历书写应当使用蓝黑墨水或碳素墨水。 4) 病历书写应当使用中文和医学术语：通用的外文缩写和无正式中文译名的症状、体征、疾病名称等可以使用外文。5) 病历书写应当文字工整，字迹清晰，表述准确，语句通顺，标点正确。书写过程中出现错字时，应当用双线划在错字上，不得采用刮、粘、涂等方法掩盖或去除原来的字迹。6) 病历按照规定的内容书写，并由相应医务人员签名。实习医务人员、试用期医务人员、进修医务人员书写的病历，应当经过在本医疗机构合法执业的医7、务人员审阅、修改并签名。2遗传咨询病历书写内容1）一般情况，内容包括就诊日期、患者姓名、年龄、籍贯、职业、住址(或单位)，联系电话，邮政编码：（除就诊日期外，其余内容应在患者办理就诊病历时一并办理。） 2) 主诉是指促使患者遗传咨询的主要原因。 3) 现病史是指本次疾病的发生、演变、诊疗等方面的详细情况。孕妇应包括末次月经、孕周以及妊娠经过。 4) 过去史是指患者既往的健康和疾病情况，内容包括既往一般健康状况、疾病史、传染病史、预防接种史、手术外伤史、输血史、药物过敏史等。 5) 女性患者的月经史、婚姻及孕产史，男性患者的婚姻和生育史。 6) 家族史是指夫妇双方家族中有无类似或其他遗传病或先天8、畸形情况。绘制系谱。绘制方法常以该家系中首次确诊的患者(先证者)开始，追溯其直系和旁系各世代成员及该病患者在家族亲属中的分布情况：7) 体格检查。应当按照系统循序进行书写，内容包括身高、体重、血压、发育、营养、心脏、肺部、腹部及脊柱，四肢等。8) 专科情况：包括妇科和产科检查内容等。9) 辅助检查：是指患者所做的各项检验、检查结果的记录。10) 诊断：是指经治医师根据患者就诊情况，综合分析所作出的诊断。11) 咨询医师意见。指根据病情的具体情况，向患者详细解释某种致畸因素可能对妊娠 影响；或有关某种遗传病的发病原因、遗传方式、诊断与防止，以及在亲属与子女中再发此病的风险；或还需要进一步检查、会9、诊或转诊等，供患者参考。12) 医师签名及记录日期。遗传咨询的保护患者隐私制度1接诊区、候诊区、检查区分开，一次只限一位病人(及其家属)进入接诊区，其他病人则有秩序地坐在候诊区等侯，不能随意进入接诊区或检查区。2遗传咨询医师有责任向患者说明咨询工作者的保密原则。3遗传咨询工作中的有关信息，包括病案记录、辅助检查结果和其他资料，均属专业信息，应在严格保密的情况下进行保存，不得列入其他资料之中。遗传咨询医师只有在患者或家属同意的情况下才能对患者(及家系)进行影象学资 料采集。在因专业需要进行病例讨论，或采用案例进行教学、科研、写作等工作时，应隐去那些可能据以辨认出患者的有关信息。会诊制度1科内会诊10、：由主治医师提出，科主任召集本科医生会诊。 2相关科室会诊：由于病情疑难复杂，非一个科能够解决，需要其他科协助诊断治疗 时，由主治医师提出，主任医师同意，并填写会诊申请单送有关科室。 3院内会诊：须由科主任提出，经医务部门同意，确定会珍时间，通知有关科室人员 参加。院内会诊一般由申请会诊的科主任主持，医院领导或医务部门派人参加。 4院外会诊：由科主任申请，经院领导或医务部门同意，并与有关医院联系，商定会 诊时间。会诊由提出申请的科主任主持。必要时，也可由医生陪同病人，携带病历到院外去会诊，也可以将病历资料寄送到外地医院进行书面会诊。 5急诊会诊：凡病人病情发生急剧变化、需要立即会诊时，经管医生11、向有关科室提出 申请，被邀请人员随请随到，及时会诊、抢救。 6邀请本科会诊者，根据申请会诊科室或医院的要求，科主任亲自或指定主治医师以上的人员前往会诊。会诊时要耐心听取病情汇报，认真细致地检查病人，科学地、实事求是地提出诊疗意见，供其它科室或医院参考。转诊制度 1、对危重或疑难的涉及遗传咨询或产前诊断病例，限于本院技术水平或设备条件限制， 对不能诊治者，由科内讨论或科主任提出，方可转诊。 2、患者转诊时，应将病历资料随病员转去。 3、如估计途中可能加重病情或造成胎儿死亡者，应向患者及家属详细交代病情，如有 必要，应先留院处理，待病情稳定后或危险过后再行转院。较重病人转院时应派医护人员护送。4、12、应追踪转诊后在接诊单位的诊疗情况，孕妇及胎儿情况，记录存档。遗传咨询门诊特殊病例登记及追踪制度 1遗传咨询门诊中遇到特殊病例要单独登记在特殊病例登记簿上，内容包括就诊日期、患者姓名、年龄、联系方式、咨询内容、医师意见，以及随访结果等。2特殊病例包括罕见的遗传病，具有完整的、典型家系的遗传病，暂不能确定是否为遗传病的症状或体征，孕期接受过严重致畸因素影响的孕妇，超声发现为较少见胎儿畸形的孕妇等。3对患者进行随访追踪，填写追踪记录，了解疾病的最后诊断或妊娠结局，以便不断提高诊疗水平。4特殊病例登记与追踪由咨询医师完成。5殊病例登记簿实行保密原则，存档备查。专科档案建立和管理制度1设立产前诊断档案室13、，负责保存遗传咨询和产前诊断资料，专人负责。 2专人负责整理、督促产前诊断病历资料归档，定期向产前诊断中心主任汇报。 3归档时间：产前诊断病历、诊断结果等即刻归档。定期追踪随访结果，采集信息后及时归档。 4归档基本要求： 1)文件材料必须收集齐全、完整。 2)文件材料符合归档要求，做到内容准确，条理清楚、字面整洁工整。 3)照片、声像档案要有文字说明。 5档案的保存应执行保密原则。6信息档案资料保存期50年。遗传咨询诊疗常规 遗传咨询(genetic counseling)是通过咨询医生(counselor)与咨询者(counselee)共同商讨咨询者提出的各种遗传学问题和在医生指导帮助下合理14、解决这些问题的全过程。在这一过程中，需要解答遗传患者或其亲属提出的有关遗传病病因、遗传方式、诊断、预防、治疗、预后等问题，估计亲属或再生育时该病的再发风险(率)(recurrentrisk)或患病风险，提出可以选择的各种处理方案，供咨询者作决策的参考。 遗传咨询是在一个家庭范围内预防严重遗传病患儿出生最有效的程序。通过广泛开展遗 传咨询，配合有效的产前诊断和选择性流产的措施，就能降低遗传发病率，从而减轻家庭和 社会的精神负担和经济负担，从根本上改善社会人口素质，因而是我国目前一项十分重要而 急需开展的工作。 (一) 遗传咨询程序 咨询者除一般性咨询外，主要提出的问题是：所患疾病是否遗传病？这种15、病有无治疗方法，预后如何？对后代有无影响？这类问题的解决可循下列程序： 一、医生首先询问先证者病史。先证者又称索引病例，是指家族中第一个就诊或确诊的遗传病患者。详细询问先证者自觉症状、发病年龄、发病原因、有害因素接触史等。详细询问父母双方的血缘关系，父母的职业。母亲孕期，特别是怀孕前3个月有无接触有害因素，如射线、农药、有害化学物质、有毒气体；有无慢性病史，如肝炎、糖尿病、肾脏病、高血压等；有无病毒感染史；有无缺氧、高热及用药史如安眠药、四环素、氯霉素、烷化剂等。孕妇生育史，如是否生过畸形儿、遗传病儿、有无自然流产史等。 二、询问家族史并绘制系谱图。询问家族史时，应从患者的同胞开始问起，然后再16、分别沿父系和母系追问，尤其不要遗漏先证者的I（级亲属是指父母、子女、同胞兄妹）、级亲属。将上述情况绘制成系谱图。系谱是指一个人的家谱，它反映一个人与祖宗、同胞、子孙之间的血缘关系与成员构成情况。系谱图就是将上述关系和情况按国际通用的方式绘成的图解。系谱图中不仅要包括患病个体，也要包括全部的家族成员。 三、临床检查。按一般临床要求进行检查但要注意肤纹的检查。 四、实验室检查，根据需要确定检查项目。如染色体核型分析，分子生物学诊断，绒毛、羊水、脐血的产前诊断，生化、内分泌、免疫学检查及各种必要的物理检查等。 五、确定是否为遗传病：从家谱调查出发，结合患者的病史、体征及实验室检查，包括染色体分析、生17、化检查结果等，做出明确珍断。诊断的正确性至关重要。但有较难做到这点，因为许多遗传病病种发病率极低，临床上很罕见，对其认识还很不足，因此争取临床科室的支援，甚至外院专家的会诊，会很有益处。 六、确定疾病的类型。是遗传病，还是先天性疾病？是单基因病、多基因病，还是染色体病？ 七、确定遗传方式，推算再发风险率。所谓的再发风险率是指已经出生了一个遗传性疾病的患儿，以后再出生的每个子女发病的可能性。如常染色体隐性遗传病，再发风险率为25；如已有一个患儿，其第二胎的再发风险率为25；如已有了两个患儿，其第三、四胎的再发风险率仍各为25。所以说再发风险率没有记忆能力。 八、提出处理意见和建议，特殊病例登记建18、卡，便于以后的查询。九、资料整理存档。 (二) 遗传咨询种类和目的 根据大量遗传咨询过程中提出的各类问题可将遗传咨询分为下列几类： 一、婚前咨询 婚前咨询一般提出的问题是：因为男女双方或一方，或亲属中有遗传病患者的困扰，担心婚后是否会出生同样的遗传病患儿前来咨询；男女双方有一定的亲属关系，咨询他俩应否(或能否)结婚；如果结婚后果是否很严重？双方中一方患有某种疾病，但不知是否遗传病，可否结婚传给后代的机会如何？要求指导。 对于第个问题，在明确了遗传病的诊断后，可就再发风险作出估计，并告知目前作出产前诊断的可能性；对于近亲结婚，应我国婚姻法有关“直属血亲及在三代以内的旁系血亲禁止结婚的规定，耐心解19、释此项规定的科学依据，劝阻在禁止范围内的近亲结婚；对于第三个问题，是尽力帮助患者做出正确诊断。 二、生育咨询 生育咨询是已婚男女在孕期或孕后前来进行咨询，一般提出的问题如下：夫妻双方之一或亲属中有某种遗传病患者，他们生育该患儿的机会有多大？如何防止？这类问题可按婚前咨询的同类问题处理；咨询者曾生育过智能低下或残疾儿，或患儿因病早亡，询问再生育会否出现同样情况；女方为习惯性流产者，是否可再生育？如何防治？结婚多年不孕，是否有遗传因素？妇女孕期患过病、服过某些药物、接触过化学毒物或在有放射线污染的岗位上工作过，是否会影响胎儿健康？这类问题如何回答将在后面的例子中说明。 三、一般咨询 一般咨询是针对20、遗传学中一般问题进行咨询，例如，本人或亲属所患疾病是否遗传病？性别畸形能否结婚？能否生育？如何处理？已知患者有某种遗传病能否治疗？疑对方有婚外情，对所生子女有怀疑，要求做亲子鉴定，等等。四、行政部门咨询 卫生行政部门或计划生育部门制定有关优生政策时常征询从事医学遗传工作者的意见，例如：对某些优生法规、条件的制订是否合理；某地区常见遗传病的控制有何对策？某些遗传病的调查应如何进行？甚至委托某些遗传咨询门诊开展是否容许生育或生第二胎的鉴定等。在正确回答上述四类遗传咨询中提出的问题，要求咨询医生能灵活运用所学到的遗传学和临床知识，有针对性地去逐个解决。在许多情况下还需要向专科医生或遗传学工作者请教，21、对不熟习的疾病翻阅有关参考书及有关资料作下次咨询的准备是必不可少的，因为有许多遗传病是咨询医生前所未见的，要明确诊断非常困难，有时甚至是不可能的，特别在缺乏先证者(已夭折)的情况下更是如此。所以要求咨询医生一定要有实事求是的科学态度，向咨询者讲清，求得咨询者的理解和合作。(三) 咨询的对象 一、35岁以上的孕妇； 二、生过一胎先天性畸形儿者； 三、有原因不明的流产史、死眙史及新生儿死亡史的夫妇； 四、先天性智力低下者及其血缘亲属； 五、有遗传病家族史的夫妇； 六、有致畸因素接触史的孕妇； 七、原发性闭经和原因不明的继发性闭经； 八、生育过母儿血型不合引起核黄疸致新生儿死亡者；九、近亲婚配者。 22、(四) 常见遗传病再发风险估计和优生原则人类的遗传病可分为三大类，即单基因遗传多基因遗传及染色体病。临床医生在进行 遗传咨询时，必须牵固掌握常见的遗传病及其特点以便正确推算再发风险率。 常染色体显性遗传病 常见病种：软骨发育不全，成骨不全、腓骨肌萎缩，马凡氏综合症、先天性球形红细胞 增多症、视网膜母细胞瘤、无虹膜、节结性硬化症、强直性肌营养不良、原发性癫痫等。 再发风险率：(1)患者为杂合子时，他们的子女患病危险率为50。如果患者为纯合子，其子女再发风险为l00。(2)患者健康的同胞及其子女一般不发病。(3)患儿双亲正常时，经过家系调查分析，有两种可能性，一是患儿双亲之一带有致病基因，而末完全23、外显，其二是由于基因突变产生的，如为基因突变再发风险很低。 优生原则： (1)患儿父母之一患病时，因每胎都有12机会发病，再发风险太高，劝告做产前诊断或绝育。(2)患儿父母均正常时，经家系调查又除外外显不全时，可能为基因突变产生的，再发风险很低，可再生育。 常染色体隐性遗传病 常见病种：先天聋哑、白化病、苯丙酮尿症、半乳糖血症、小头畸形、肾上腺生殖综合征、散发性呆小症、糖元累积病、粘多糖病、恶性近视、视网膜色素变性、先天性青光眼、先天性全色盲、先天性肌弛缓、婴儿型进行性肌萎缩，早老病、多囊肾等。 再发风险率： (1)患者双亲表型正常，但为隐性致病基因携带者，其后代14的发病机率。 (2)患者与24、正常人婚配后所生子女一般不发病，但都是此致病基因携带者。 (3)患者的健康同胞中约有2/3的可能携带者，但其子女一般不发病，如为近亲婚姻时，发病危险性增加。因血缘愈近，患病率愈高。 优生原则： (1)虽然病儿父母表现正常，但都是致病基因携带者，每胎都有1/4机会发病，因再发风险太高，劝告做产前诊断或不再生育。 (2)根据新生儿期可以防治的病种，如苯丙酮尿症，半乳糖血症，散发性呆小症，因及时治疗，终身服药或控制饮食可治愈，可以再生育。 X性连锁显性遗传病 常见病种：抗维生素D性佝偻病、遗传性肾炎等。 再发风险率： (1)男性患者与正常女性婚配后，所生子女中，女儿都发病，儿子都正常。 (2)女性患25、者与正常男性婚配后所生子女中12发病。 优生原则： (1)患儿双亲正常，可能是由于突变所产生，再发风险很低，可以再生育。 (2)患儿母亲有病时，因子女各有12机会发病，再发风险太高，劝告不再生育。(3)患儿父亲有病时，女儿全部发病，儿子全部正常，因此孕期作胎儿性别测定，保留男胎，女胎流产。X性连锁隐性遗传病常见病种：假性肥大型进行性肌营养不良、血友病、无丙种球蛋白血症(Bmton)、导水管阻塞性脑积水、视网膜色素变性、血小板过少性免疫缺陷、肾性糖尿病、粘多糖病型、眼脑肾综合症(Lowe综合症)、慢性肉芽肿等。再发风险率： (1)女性患者所生儿子全部发病，女儿12为携带者。 (2)男性患者子女中26、一般都不发病，女儿都是携带者。 (3)女性携带者所生男孩有12发病，：女儿有12携带者。 优生原则：(1)母系亲属(如外祖父、舅舅或姨表兄弟)，如有同病患者，表明母亲为携带者，再发风险高，但因患儿限于男性，可作产前诊断或作胎儿性别测定，保留女胎，男胎流产。 (2)如家系中无同病患者，可能是由于基因突变产生，再发风险很低，可以生育男孩。 多基因遗传病 常见病种：先天性心脏病、重症肌无力，少年型糖尿病、哮喘、原发性癫痫，精神分裂症，先天性髋关节脱位、先天性巨结肠、脊椎裂、无脑儿、唇裂、腭裂等。 再发风险率： 多基因遗传是由于效果小的多种基因相累积的结果，环境因素占有重要位置，其再发风险率多根据经验27、来推测，其特点如下： 1一般人群中的频率比单基因遗传病明显增加，约占o.1以上。 2异常家族中出现频率高，患者一级亲属再发风险率为一般群体发病率的平方根，如 唇裂，群体中的发病率为0.17，其遗传度为76，患者一级亲属的发病率为4，故一般患者一级亲属中发病率比群体高3-15倍。 3单卵双胎儿的一致性为双卵胎的5-l0倍。 4近亲婚配再发风险明显增多。 5 因多基因遗传受环境因素影响较大，用遗传度来表示遗传因素和环境因素的相互作用，遗传度小则表示遗传作用少，当遗传度大于60，则认为该病的遗传作用大，如无脑儿、脊椎裂为60，先天性心脏病35，哮喘80。 6 一个家庭中如果有二个小孩受累，则以后再发28、畸形的危险率明显增加或达12-15，而且畸形越严重，再发畸形的危险率越高。7先天性畸形有性别之差，无脑儿70见于女性，幽门狭窄80见于男性。 几种常见先天性畸形的频率 疾病 人群发病频率 患者同胞的再发率 多发畸型 1/200 1/20 无脑儿 1/450 1/50 脑积水 1/550 1/60 唇裂 1/1000 1/25 多指 1/1200 1/20 先天性心脏病 1/200 1/50优生原则 1能作产前诊断的病种，如无脑儿、脊柱裂，可再生育，但一定作产前诊断，保留正常胎，畸胎流产。 2如果已生过二个畸形儿，因再发畸形危险率明显增加，可达12-15，而且畸形严重者，劝告不再生育。3不能作产29、前诊断的病种，要作家系调查一二级亲属无同病者，因再发风险低于5%，可再生育，如二级亲属中有同病患者，因再发风险高于10，劝告不再生育。染色体病 常见病种：先天愚型、13三体综合征、18三体综合征、猫叫综合征、先天性卵巢发育不全、先天性睾丸发育不全、脆性X综合征等。 再发风险率：染色体异常约有85由于亲代在生殖细胞减数分裂过程中发生畸变及染色体不分离所引起的，只有一小部分(约15%)是由于父母之一是染色体平衡易位携带者所造成的，因此在推算染色体再发风险时，必须先检查患儿及其父母外周血染色体核型分析，如果双亲染色体正常，其再发风险同一般群体发病率，如果父母一方是染色体平衡易位携带者，再发风险率高，30、以易位型21三体患儿为例：其母染色体核型45，XX，rob(13；21)，其所生后代中可出现四种类型配子，即14正常儿女；14易位型三体；1/4平衡易位携带者；14单体。但实际发病危险率要小得多。 各种染色体畸变引起的先天愚型综合征频发危险率 染色体组型 频发的危险率 患儿 父 母 易位D/G正常携带者携带者正常 10 5 易位21/21正常携带者携带者正常 100 100 21三体 正常 正常 5 嵌合体 正常 正常 8如果父母染色体正常，出生个21三体病儿后，再生育此病儿的危险率同一般群体，不超过1，但母亲年龄越大，染色体的再发危险越高。 优生原则： 1凡第胎是染色体病患儿，而且父母染色体31、均正常时，其再发风险低于1，可再生育，但一定要进行产前诊断，保留正常胎儿，病胎流产。2第一胎是染色体病患儿，父母之一为染色体平衡易位携带者，其再发风险高于10，且自然流产率很高，一定要生育者要作产前诊断，保留正常胎儿，病胎流产。(五) 孕期用药问题 一、胎龄对用药影响胎龄与药物致畸有着极大的关系。胚胎或在不同的发育阶段对药物的敏感性不同，而且随着胚胎或胎儿的发育药物所造成的危害程度也不同。一般将胎儿的发育分为三个阶段：第一阶段：受精至2周的胚胎。此期胚胎对药物高度敏感，极易受到药物的损害。虽然如此，但此期是以细胞的分裂为主，分化程度不高，胚胎受损后可能造成的后果只有两种：一是胚胎受损严重，造成32、胚胎死亡而发生早期流产；二是受损不严重，胚胎可完全修复所受的损害并继续发育而不发生后遗问题。这即是“全或无效应”。第二阶段：胚胎和胎儿发育的3周至12周。在这一阶段，胎儿药物的敏感性极高，同时又是胚胎和胎儿各器官处于高度分化、迅速发育和形成阶段。药物在此期的影响可使某些系统和器官发生严重畸形。所以此期用药应特别慎重。这阶段也叫做“敏感期”。 第三阶段：即胎儿发育至12周以后。在此阶段，胎儿对药物的敏感性降低，同时绝大多数系统和器官已经形成，只是以生长和功能的发育为主。但是仍有部分器官在发育，如小脑和大脑皮层及泌尿生殖系统则继续分化，所以在这一阶段仍有一些结构对药物敏感。故般来讲，在妊娠12周以33、后用药仅能影响生长发育过程，使全身发育迟缓(包括中枢神经系统的发育)。 二、对胎儿有害的部分药物 药 物 不 良 影 响 甲氨喋呤 多发畸形 环磷酰胺 多发畸形 氯霉素 灰婴综合征的危险性增加 甲本磺丁脲 新生儿低血糖、畸形率上升 可的松 腭裂几率上升 卡那霉素 听力、肾损害 巴比妥类、地西泮 长期用药新生儿对药物有依赖性 四环素 牙齿、骨骼发育受损 氯喹 视网膜损害 三甲双酮 骨骼畸形、小头畸形 碳酸锂 心血管畸形 美沙酮 长期应用新生儿对药物有依赖性 甲睾酮 女性胎儿男性化 炔诺酮女性胎儿男性化 己烯雌酚男性胎儿女性化、苗勒氏管发育障碍、阴道腺癌、宫颈透明细胞癌 苯妥英钠唇裂、腭裂 丙基硫34、氧嘧啶 先天性甲状腺肿大 沙立度胺 四肢短小畸形（海豹畸形） 双香豆素 鼻畸形、眼损害、智力发育障碍、心脏畸形、流产、死胎、 耳聋 丙咪嗪、阿米替林 血细胞损害 三、药物的剂量 药物效应与剂量有很大关系，小剂量的药物可能只造成暂时的机体损害，而大剂量的药物则可造成胚胎死亡或永久的机体损害。药物的剂量实际上包括单次剂量和用药时间的长短。用药时间愈长和重复使用都会加重对胚胎或胎儿的损害。药物的量除了取决于服用量外，还取决于通过胎盘的量。 四、妊娠期药物的选择原则 1用药必须有明确的指征并对治疗孕妇疾病有益，不宜滥用药物，可用可不用的药物宜不用。 2选用已证明对灵长目动物胚胎无害的药物。 3用药应清35、楚了解孕周，严格掌握剂量及持续时间；合理用药，及时停药。应考虑孕妇用药实际为母儿两人同时用药。 4有些药物虽然可能对胎儿有不良影响，但可治疗危及孕妇健康或生命的疾病，权衡利弊后仍需用药；如孕妇患甲状腺机能亢进用硫脲类药物。5当两种以上药物有同样疗效时，应选用对胎儿危害较小的一种药物。或选择已用于临床多年并对其是否对胚胎或胎儿有不良影响已有临床资料证实的药物，而少用或不用新上市虽然有动物实验资料但缺乏临床资料的药物。 6早孕期能不服药或暂时可停用的药应不用或暂时停用。分娩时或哺乳期用药必须考虑到对新生儿的影响： 五、妊娠期用药原则 妊娠妇女常因一些异常情况或疾病而需要用药物治疗。据统计平均每个妊36、娠妇女在妊娠期间服用过34种药物。孕妇用药对胎儿的影响随药物种类的不同而有差别。因许多药物可以自由地通过胎盘，有些药物可能会引起胎儿的发育异常，甚至造成胎儿畸形，所以，原则上孕期孕妇最好不用药，但如有用药的必要，则应注意以下八项原则： 1、用药必须有明确的指征和适应症。既不能滥用，也不能有病不用。孕妇因为疾病同样会影响胎儿，更不能自选自用药物，一定在医生的指导下使用已证明对胚胎与胎儿无害的药物。 2、有受孕可能的妇女用药时，需注意月经是否过期；孕妇看病就诊时，应告诉医生自己已怀孕和妊娠时间，而任何一位医生在对育龄妇女问病时都应询问末次月经及受孕情况。 3、可用可不用的药物应尽量不用或少用。尤其37、是在妊娠的头3个月，能不用的药或暂时可停用的药物，应考虑不用或暂停使用。 4、用药必须注意孕周，严格掌握剂量、持续时间。坚持合理用药，病情控制后及时停药。5、当两种以上的药物有相同或相似的疗效时，就考虑选用对胎儿危害较小的药物。 6、已肯定的致畸药物就禁止使用如孕妇病情危重，则慎重权衡利弊的，方可考虑使用。 7、能单独用药就避免联合用药，能用结论比较肯定的药物就不用比较新的药。 8， 禁止在孕期用试验性用药，包括妊娠试验用药。 六、药物FDA分类 怀孕或可能怀孕的妇女不可随便用药，因为没有任何一种药物对胎儿的发育是绝对安全的。目前已知有近百种临床所用的药物有致畸作用，而且作用一般发生在孕期开始38、3个 月内(此时受精卵正处于各器官组织的分化阶段)。为此，FDA就药物对妊娠妇女和胎儿的影响进行了分类，即分成如下A，B，C，D，X五类： A类：在妇女的对照研究中，未发现药物对妊娠初期，中期和后期的的胎儿有危险，对胎儿伤害的可能性很小。 B类：在怀孕妇女的对照研究中，药物对妊娠初期中期和后期的胎儿危险的证据不足或不能证实。 C类：动物实验显示药物能造成胎仔畸形或死亡，但无妇女对照研究，使用时必须谨慎权衡药物对胎儿的潜在危险。 D类：药物对人类胎儿危险的证据确凿，孕妇使用必须权衡利害，仅在妇女生命受到威胁或患有严重疾病非用不可时方可使用。 X类：在动物或人类中的研究已表明，药物可导致胎儿异常。39、已怀孕或可能怀孕的妇女 禁用。尚有很多的药物未能标出。但未标识或已标识安全的药物并不意味是安全的。一方面， 药物作用有剂量的差异，分类标识为常用剂量情况下。譬如维生素类药，许多标识为A类， 而大剂量时则为C类或X类，务请医生药师注意；另一方面，药物致畸有种属的差异，有的动物试验未见致畸，但对人类则可能致畸，因此，药物用于妊娠期妇女安全性的评价，还 需要临床大量的治疗实践；另外，由于信息不断变化以及可能的疏忽或错误，对已标识的药物还须读者进一步求证后应用。(六) 唐氏综合征的孕期筛查 唐氏综合征(Down SyndromeDS)又称为先天愚型或21三体综合征。是由21号染色体三体引起的先天畸形，40、也是智力低下最常见的遗传性病因，占整个新生儿染色体病的90。在美国，其发病率为9.2%。在我国，DS占新生儿的1左右，按每年2千万新生儿出生计算，约2.5万个DS患儿出生。患者存活时间长，且无生活自理能力或生活自理能力差，目前也无有效的治疗手段。因此，对国家、社会、家庭造成了巨大的负担。通过孕期筛查的方法预防DS患儿的出生有着重大的意义。DS患儿出生的危险度随着孕妇年龄的增长而迅速上升，特别是孕妇年龄超过35岁，危险度明显增高。35岁为0.25，而超过40岁，则危险度可达1以上。因此，中华人民共和国母婴保健法实施办法将孕妇年龄超过35岁作为法定进行产前诊断的年龄。所以，对年龄超过35岁的孕妇都41、建议作羊水染色体核型分析。2 Down syndrome孕期筛查的意义染色体核型分析是对DS作出诊断的唯依据，但就目前所施行的染色体核型分析的取材方法基本上都是有创性的。具有一定风险，在没有比较充分的依据时，孕妇及其亲属不易接受；另外，只能对有指征的孕妇建议作诊断性羊水穿刺，不适宜于普遍开展。但是，虽然孕妇年龄超过35岁出生DS患儿的危险度迅速增高，但实际超过35岁生育的妇女比例较小，而多数是在35岁以前生育第胎。因此，羊水穿刺检查用于DS患儿时，35岁的孕妇阳性检出率为30，而35岁的孕妇阳性检出率为70，而后部分人群在临床上往往被忽略，使本来可以避免的悲剧发生。所以，对35岁以下孕妇采用普42、遍性筛查的方法可以尽可能的减少DS患儿的出生。3 Down syndrome筛查的血清标记物采用血清标记物筛查DS越来越受到大家的重视和广泛应用。目前采用的筛查DS的血 清标记物主要有：AFP(甲胎蛋白)、hCG(绒毛膜促性腺激素)、u E3(游离雌三醇)、PAPP-A(妊娠相关血浆蛋白)另外，其他血清标记物对筛查DS的作用也受到关注： Inhibin-A(抑制素A)，SP1(妊娠特异性1糖蛋白)。31 AFP(甲胎蛋白)AFP是胎儿血清中最常见的球蛋白。孕早期由卵黄囊产生，孕晚期由胎儿肝脏大量产 生。AFP最早用于开放性神经管缺陷的诊断。1984年，Merkatz等首先报道一些21三体综 合43、征胎儿的孕妇AFP明显低于正常。很快，这一发现被其他人证实并用于DS等染色体异 常疾病的孕期筛查。如果母血清AFP水平低于正常人群中位数（Multipleesof Median，MOM) 1MOM时，结合年龄相关危险因素，可以发现25DS。由于单项AFP筛查阳性检出率比较低，目前除部分实验室还在使用外，多数实验室已采用了多项指标结合使用进行筛查。32 hCG(绒毛膜促性腺激素)hCG是由胎盘滋养层产生的孕期激素。它由和二聚体的糖蛋白组成：1987年，Bagart 最先报道孕18-22周时hCG的变化与21三体的发生有关。HCG在妊娠后持续上升，至孕8 周后逐渐下降，直到孕20周达相对稳定。对血44、清中各种不同的hCG状态含量的研究发现， 游离hCG是敏感性最高的标记物。其用于DS检测的敏感期从孕早期到孕中期(3-22 周)，但孕中期的检出率更高。在DS的孕妇中，血清游离hCG异常升高，一般大于 2.5MOM。由于游离hCG在血清筛查中具有稳定性好，检出率高等优点，这一血清标记物已成为筛查必选项目之一。33 uE3(游离雌三醇)uE3是由胎儿肾上腺皮质和肝脏提供前身物质，最后由胎盘合成的一种甾体激素，它以游离形式直接由胎盘分泌进入母体循环。母体血清中，uE3水平随孕周增加而上升。1988年，Canick等最先报道胎儿DS时uE3明显下降。推测可能与DS胎儿生长发育迟缓或DS胎儿不成熟致肝45、脏、肾上腺发育不全所致，由于对这指标筛查DS有争论，有的研究认为其检出率低，假阳性和假阴性率增高，故多数实验室已放弃了将uE3作为DS的筛查指标。34 PAPP-A(妊娠相关蛋白-A)PAPP-A是产生于胎盘合体滋养层的大分子蛋白复合物。在妊娠期间，随着孕周的增加 而升高。Zimmermann等对孕妇年龄25-44岁的1151例在孕10-13周进行研究时发现，21 三体和18三体胎儿的母亲血清PAPP-A水平低于正常，分别为0.51和0.08MOM。PAPP-A 作为孕早期一种单项血清标记物筛查DS有着重要意义。单项PAPP-A检测结合年龄对孕早 期DS的检出率为41-52.5，检出率高于单项46、检测AFP、uE3及hCG。由于PAPP-A随 着孕周的增加而升高，则胎龄对PAPP-A的检测有较大的影响，因此对PAPP-A的检测在孕早期进行才更有意义。孕12周以前认为是PAPP-A定量测定的适宜时间。35血清标记物的组合应用351 孕早期筛查血清标记物组合作为孕早期筛查DS的血清标记物的组成的首要条件必须是都能够在孕早期有较高的检出率和较低的假阳性和假阴性率。在众多的组合中，Waid的研究发现，hCG、PAPP-A 组合在孕10周DS的阳性检出率最高，可达63，相当于AFP、hCG、uE3三联标记在孕中期的水平。因此，这两项血清标记物的组合被认为是孕早期DS筛查血清标记物的最佳组合。3547、2 孕中期筛查血清标记物组合孕中期筛查即是指妊娠15周以后的筛查。AFP、-hCG、uE3是最先被使用的组合，也是目前世界上应用最为广泛的组合，被称为传统的三联标记。这组合的最敏感时期为孕 15-22周，DS阳性检出率为65-75，其中用于高龄孕妇则检出率更高。前面已经谈到过 uE3作为标记存在争议，许多实验室已放弃这指标。因此，近年来不少学者用其它指标 替换uE3，形成了其他组合，如AFP、hCG、Inhibin-A三联组合，DS的阳性检出率可达90 (但假阳性率为20)，因此认为，这一组合是比较理想的组合。4 Down syndrome超声筛查筛查候选标记：胎儿颈项皮肤厚度：为最常见最有效48、的一项指标。DS或其他染色体异常的胎儿这一标记可以发生异常，称为颈项皱褶增厚。长骨测量：目前被用于筛查胎儿DS的长骨有肱骨、股骨、胫骨、腓骨，其中前两者使用频率较高。脏器测量：主要有，肾盂扩大、肠回声增多。胚胎水肿：孕早期测量胎盘有无水肿对胎儿染色体异常的敏感性可达75%-90。若胎盘水肿同时出现卵黄囊高回声异常，则胚胎为染色体异常的可能性就很高。其他标记：包括胎儿心血管畸形、小指中线缺如、第一、二趾增宽、脐动脉搏动次数等。这些标记虽然在染色体异常的胎儿中阳性率也较高，但因超作难度大，不适用于产前常规筛查。多项标记联合应用：93的胎儿至少有一项标记异常，90以上的DS有两项以上的标记异常。 (49、七)遗传性疾病预防和治疗一、遗传性疾病的预防遗传性疾病系由遗传物质异常所引起，怎样避免生育遗传物质异常的婴儿是预防遗传性疾病的关键问题。现阶段应做好避免近亲结婚，预防患病个体出生，并发症状发生，检出携带者等预防措施，以减少遗传病的发病率，促进胎儿和新生儿正常生长发育。(一) 避免近亲结婚根据遗传病的发病原理，在个有遗传病个体的家族内随着家族内个体数的一代比一代增加，致病基因有扩散的趋势，近亲婚配将使患病个体数增加。所以，尽量避免近亲结婚对预防遗传病是条很重要的途径，从根本上来说，避免近亲婚配就是预防形成生长发育为患病个体的受精卵。有资料说明近亲婚配和非近亲婚配对于女健康的影响有明显的区别。近亲50、配婚和非近亲婚配对于女健康影响的比较项目 对数 双亲平均年龄 子代数 20岁前子代死亡数 患遗传病子代数 婚配方式近亲婚配 33 48.7(岁) 10l 14 10非近亲婚配 52 44.7(岁) 117 2 1苯丙酮尿症是常染色体隐性遗传病，人群中致病基因的携带率为150，在随机婚配的情况下，子女患病的可能性为15015014=1/10,000；如携带者与一般人群婚配，其子女患病的可能性为15014=1200；如果携带者与一个表型正常的近亲婚配，其子女患病的可能性明显增加为1814=132。这是由于表亲婚配有18共同基因来自同一祖辈，而且他们共同缺陷的基因不止一个，所以婚配后子代患有各种不同51、的遗传病。另外，在多基因遗传病，近亲婚配子代受累的机会也比随机婚配增加，因此应尽量避免近亲结婚，提倡优生。 (二) 预防患病个体的出生为了预防畸胎的发生，应强调孕妇在妊娠早期积极预防病毒感染，避免应用某些已证明可致胎儿畸形的药物和放射线照射。大量事实证明：先天性心脏病、小头畸形、脑积水等可由风疹病毒、弓形体、巨细胞病毒感染所引起。中枢神经系统发育异常、食道闭锁、唇裂 则可由流感病毒引起。唐氏综合征可能与传染性肝炎病和肝炎相关抗原(HAA)有关。要预防患病个体的出生还应该明确某种遗传病的具体遗传形式及其子代患病的可能性，然后采取相应的措施。例如：血友病A和先天性肌营养不良，它们都是X连锁隐性遗传52、病。女性隐性致病基因携带者所生的男孩，可能一半发病，一半正常，当预测胎儿性别为男胎时，可建议流产。加强产前诊断，可避免畸胎的形成和出生。(三) 预防症状的发生这是在患病个体已经出生之后，为预防某些临床症状的发生和加重所采用的方法：例如：对已确诊的半乳糖血症病儿在出生后应避免以乳类食品喂养，这样可以不发生症状，使病儿生长发育良好。如发现食用乳类食品后出现症状的病儿，则应立即停食乳类食品，也可控制症状的发生和加重。对G-6-PD缺乏症病儿，应禁用樟脑、维生素K、伯氨喹啉、匹拉米洞、非那西丁等药物，可以预防溶血症的发生。(四) 检出携带者生化遗传学的发展已经提供了可以检出某些遗传病的携带者的方法。例53、如：a1-抗胰蛋白酶缺乏症，家族内的个体可以采用抑制胰蛋白酶的分解活动，来检出携带者。正常人 1.1mg的胰蛋白酶被每ml正常人血清所抑制，病人则往往缺乏或明显低下，而携带者则处于两者之间。同样，对G-6-PD缺乏症家族内的个体可以进行高铁血红蛋白还原试验和红细胞血红蛋白洗脱检查来检出携带者。又如，对苯丙酮尿症家族内的个体可口服一定量的L苯丙氨酸，然后检查血浆苯丙氨酸含量或测定尿中苯丙氨酸含量，在座标纸上画出曲线 并与正常人和病人的曲线加以比较鉴定，检出携带者。如果在结婚前就能检出携带者，即可 预测婚后生育子女患病可能性的大小，并采取相应的措施。二、遗传性疾病的治疗从遗传病的发病过程看，有关遗54、传性疾病的防治可从4个方面来探讨：(一)基因水平； (二)酶水平；(三)代谢水平；(四)临床水平。一般来说，遗传病发展到临床水平时，对已形成的临床症状已无法预防，治疗往往也为时太晚。所以应当从第三、第二甚至第一水平进行识别、控制，是最为理想的。从基因水平认识别突变致病基因，并人为地改变异常基因的根治遗传病的工作，称基因工程或基因治疗。目前此水平在临床上尚难广泛应用，如从第二、第三水平上早期作出正确诊断，从而通过控制饮食或其他措施，调节代谢的平衡，达到治疗和预防遗传病的发病，这种控制或改变环境因素的防治方法，叫做环境工程。环境工程防治遗传性疾病的关键：(1)出生前即予确诊，进行产前治疗或在出生后55、开始 治疗。(2)典型症状出现前予以确诊，尽量治疗。其治疗方法：(1)饮食控制疗法：如蚕豆病禁食蚕豆及禁止使用非那西丁等药物，可控制发病；(2)药物治疗；(3)酶的补充、替代；(4)手术治疗；(5)对症治疗等。第二部分 介入性产前诊断产前诊断人员职业道德操守1实事求是、严格严谨的科学态度。 2患者第一、公平公正的工作原则。3保守患者秘密、保护遗传资源。4遵守社会公德和各种规章制度。5自觉接受舆论监督。介入性产前诊断手术医师职责1术前询问病史并复习病历，复核患者是否存在产前诊断指征。2检查患者是否签署产前诊断的知情同意书。3检查患者术前准备资料是否齐全，包括： 1) 常规B超检查：了解胚胎或胎儿56、大小、脐带、羊水、胎盘位置以及孕妇子宫附件等情况； 2) 术前常规血检：血常规、凝血功能、血型、乙肝两对半、RPR+HIV。了解孕妇有无合并感染等情况； 3) 术前体温：处于发热状态者不宜手术。4按照介入性产前诊断手术常规完成手术，术时严格执行无菌操作制度。5掌握手术并发症的诊断和处理。6术后记录手术日期、术前体温、血压、手术过程、所取标本类型、性状、标本量及术毕B超复查胎儿情况、血压，并签名。7术后向患者交代注意事项，包括： 1) 患者术后须休息30分钟，无不适状态方可离去；术后口服止血药和硫酸舒喘灵3天(或带药备用)。 2) 电话通知后及时取检验结果。 3) 术后1周产科常规检查。8随访患57、者至分娩后。9整理产前诊断资料及随访结果，及时归档。介入性产前诊断手术护士职责 1做好术前室内清洁卫生和各类物品的准备(器械、药品、敷料、一次性物品及用于处 理标本的物品等)。 2术前应了解病人情况及所施手术。病人进人手术室后，根据不同情况给予介绍和安慰，以减少病人的恐惧与紧张。 3认真做好查对工作：查对姓名、性别、年龄、孕龄、手术名称、产前诊断项目、术前检查及手术同意书是否签字等内容。 4供应洗手需要的用物，负责参加手术人员的衣服穿着，保持手术间的整洁、安静，适时调节室温。 5随时督促手术人员严格执行无菌操作，对违反者应立即予以纠正。注意参观人员不可直接接触手术者或手术床，以防污染。坚守工作58、岗位，了解手术进展情况，不得擅自离开手术间。 6负责术时一次性物品的递送和术者所取标本的接收。 7. 术毕，协助护送病人出室。 8整理手术间，室内一切用物归还原处。9经常检查手术室各种器材是否合用，如有损坏或需添补者应向主任汇报或进行必要的修补。10认真执行各项规章制度，严格执行无菌操作，防止交叉感染。定期核对医疗器材、敷料的消毒日期，防止差错事故的发生。11每月做一次空气、物表、无菌物品、医务人员手和使用中消毒剂的细菌培养。每月1次紫外线强度监测。监测结果归档，备查。12做好医疗器械、敷料的准备、清洗、包装、消毒、保管和供应工作。13做好急救物品的清点和核实有效期。14指导工人做好室内外清洁59、卫生。介入性产前诊断手术室工人职责1在手术室护士的指导下进行工作。2负责做好清洁卫生工作。清扫地面及洗刷手术室，做好洗手用物的供应与料理以及手术后的清洁料理工作。3负责运送和领取消毒物品。4学习掌握必要的医学知识、清洁卫生和消毒隔离的基本知识，熟悉担负工作的操作程序、方法，不断提高工作质量。5认真执行各项规章制度，严格进行相应操作，防止污染及差错事故。 介入性产前诊断工作流程遗传咨询符合产前诊断指征签署手术同意书和某项指标产前诊断的知情同意书产前诊断手术(绒毛活检、羊膜腔穿刺、脐静脉穿刺等) 所取绒毛送检 患者术后1周产科检查（绒毛、羊水或脐血）（若继续妊娠）追踪结果随访至分娩后遗传咨询 提出60、意见或建议整理资料归档保存介入性产前诊断手术操作常规绒毛活检术：1适应症：1) 高龄孕妇2) 曾生育过染色体异常患儿史3) 夫妇之一是染色体平衡易位携带者或倒位者4) 有脆性X综合征家系的孕妇5) 夫妇之一为某种单基因病患者，或曾生育过某一单基因病患儿的孕妇6) 曾有不明原因的自然流产史、畸胎史、死产或新生儿死亡的孕妇。7) 孕妇血清学唐氏筛查异常者。 2取样时间： 多数主张在妊娠911周之间进行； 3绒毛活检量：不同诊断目的所需的组织量不同，染色体分析约需绒毛l0mg，DNA分析5mg绒毛即可，而生化测定也仅需3-5mg组织。故次绒毛活检获取20mg左右的绒毛组织可满足任何产前诊断的需要。461、经宫颈绒毛活检取样途径及操作方法： (1)术前常规超声检查，了解胎儿情况及胚胎种植的位置。取绒毛器是一根长20cm、直径1.5mm，内有铅质芯的软塑料管。 (2)孕妇取膀胱截石位，常规消毒铺巾，用扩阴器扩张阴道，膀胱适当充盈以显示宫底为度。(3)在腹壁超声监视下，将导管从子宫颈外口缓缓地经官颈内口进入官腔，当进入孕囊种植部位时，取出针芯接上20ml针筒，并形成负压，停留约半分钟即有绒毛和血液进入针管，边抽边退，随即将吸出物放入显微镜下或放入生理盐水小瓶中，观察有无绒毛，如未见到绒毛或抽取量不够时，可再取一次。5并发症1)流产：经宫颈途径绒毛活检后流产发生率约为3-5；2)出血： 20发生少量阴62、道出血，多能自行止血。然而亦有少数患者因损伤血管可出现血肿。血肿较大者可导致流产。3)感染：常见于导管消毒不严或未严格掌握适应征。4)刺破胎膜：抽吸时误入羊膜腔内，可抽出羊水或血水。5)肢体发育障碍：过早进行绒毛活检有导致胎儿肢端发育障碍的风险，可能与绒毛血管横断致肢体远端供血障碍有关。因此目前多主张应在9周之后进行CVS，以尽量防止胎儿肢端发育障碍的可能。羊膜腔穿刺术1适应症：除与绒毛活检适应症相同之外，亦可用于曾生育过神经管缺损儿孕妇的产前诊断以及胎儿成熟度的评价等。2取样时间及抽取羊水量：穿刺时间：16-24周羊水穿刺量：可抽吸约20ml。3操作方法：1) 孕妇排空膀胱取仰卧位，常规消毒63、铺巾。2) 超声检查了解胎儿情况，胎盘位置，羊水深度以便选择穿刺部位。 3) 用7号腰穿针，左手固定穿刺部位皮肤，右手将针垂直方向刺入宫腔，此时可有两次落空感，拔出针芯，见有淡黄色清亮羊水溢出，接上20ml注射器，根据取样时孕周的大小，决定所取的羊水量，然后插入针芯，拔出穿刺针。术毕超声观察胎心情况。4并发症：1) 流产：羊膜腔穿刺是一种较安全的产前诊断技术，与之相关的流产率仅为05。2) 羊水渗漏：极个别病例可出现羊水自穿刺孔渗漏现象。如渗漏较严重可影响胎儿肺 脏发育。3) 官内感染：严格的无菌操作可避免感染的发生。4) 损伤脐带、胎盘或胎儿：穿刺针偶可刺伤脐带或胎盘，导致脐带或胎盘血肿，亦64、可 刺伤胎儿引起血肿。5) 母体损伤：刺伤血管，导致腹壁血肿，子宫浆膜下血肿或刺伤胎盘可导致胎儿血进 入母体。对Rh阴性孕妇，应预防性注射抗D免疫球蛋白，预防发生致敏反应或羊水栓塞。经腹脐静脉穿刺术1适应症：1) 快速染色体核型分析2) 胎儿溶血性疾病3) 诊断或地中海贫血4) 血友病5) 血小板疾病6) 遗传性免疫缺陷症7) 先天性代谢病：如假性肥大性肌营养不良(DMD)，分析胎血的肌酸磷酸激酶(CKP)， 亦可提取DNA行分子基因诊断等。8) 非免疫性胎儿水肿(NIHF)：可分析了解NIHF的原因，同时可做出妊娠期相应的处理计划。9) 胎儿宫内感染的产前诊断10) 胎儿宫内生长迟缓(1UG65、R)的监测与胎儿宫内状况的评估11) 胎儿宫内输血治疗。12) 其他。2穿刺时间及取血量：脐静脉穿刺术在妊娠17至40周内均可进行。过小孕周或过大孕周进行穿刺，流产、 早产发生风险较高。目前认为最适穿刺孕周为：20-28周。若病情需要在小于20周或大于28周进行穿刺时，要特别向病人交代脐穿风险。一般认为，妊娠20-28周取血量为1-5ml，取血量过多将影响胎儿血循环，令胎儿心动过缓等并发症发生率增高。3脐静脉穿刺方法：实施经腹脐静脉穿刺术采用实时超声显像仪引导。1) 穿刺材料与器械：(1) 仪器设备：(2) 无菌穿刺针G22型，长17cm；5ml注射器。(3) 高压灭菌穿刺包：术巾3条，纱布266、块，袖套l条，巾钳2个，卵圆钳l把，不锈钢油高罐2个，手套2对。2) 穿刺步骤：术前孕妇先排空膀胱，取平卧位，常规消毒铺巾后，常规超声检查胎儿，了解胎儿一般情况，测胎儿双顶径、羊水、胎盘位置、脐静脉直径及胎心等，观察脐带位置及走向，进行初步定位。腹部常规消毒、铺巾，用消毒穿刺探头再次定位脐带，将脐带清晰地显示在引导区内。将探头固定。术者选好适当穿刺角度，进针，同时观察针尖轨迹是否与穿刺引导线一致，偏离时应调整。当针尖靠近脐带附近时作迅速、有力而有节的冲击，针尖便能刺入圆滑的脐静脉：针刺入脐静脉后拔出针芯，吸胎血1-5ml，拔针。用酒精棉球压迫穿刺点片刻，继续超声观察胎盘脐带穿刺处有无渗血，监测67、胎心音有无变化，若无异常，休息半小时后，病人无不适即可离院。4胎血的鉴定：所获取的胎血标本必须行抗碱变性试验进行鉴定以确定该标本无母血污染。5并发症及处理：1）、穿刺失败：如果孕周过小，脐静脉直径太细小；羊水过少，脐带显影不清；孕妇精神紧张，子宫收缩，胎儿肢体运动至脐带难以固定等，均可造成穿刺失败。所以术前要确定孕周，胎儿官内情况，并安抚孕妇情绪。如果连续3次进针均未抽到胎血，谓穿刺失败，应停止继续穿刺，观察胎心变化。2）、胎儿一过性心动过缓：如果出现一时性子宫收缩、脐静脉痉挛，可能会引起胎儿迷走神经兴奋而出现胎儿一过性心动过缓。此时要立即停止穿刺，让孕妇左侧卧位，吸氧， 必要时给予静注50的68、葡萄糖和0.5mg的阿托品。3）、胎儿宫内死亡、早产：发生几率为l9%。(文献报道相关胎儿流产率为12，此与术者操作技术熟练程度成正比)，必须把握好产前诊断指征术前向病人告知产前诊断 风险，术时做好预防抢救措施。4）、羊膜感染：穿刺必须严格遵守无菌操作，避免引起官腔感染。5）、胎盘、脐带渗血：穿刺针经过胎盘或脐带可引起渗血，一般出血3-3.5秒则自会停止，此时需B超监测出血情况和胎心变化。患者知情同意制度患者有产前诊断指征时，应向其解释产前诊断的益处、手术风险、某种诊断实验技术的敏感性，并给予患者阅读产前诊断需知材料。若患者同意产前诊断，本人签署手术同意书和某项指标产前诊断的知情同意书。具体同69、意书见下。附一：绒毛产前诊断知情同意书绒毛活检术是在超声引导下，经孕妇宫颈或腹壁穿刺采集胎盘绒毛组织。一般比较安全，但即使医务人员在严格按照医疗技术规范进行操作的情况下，也有可能发生下述并发症和意外，接诊医师必须在术前向病人告知产前诊断的必要性和可能发生的风险，并取得病人的理解和同意。1、 通过本次检查，可以排除拟诊断的染色体异常疾病，但受现有医学技术水平的限制，有时难以分辨染色体的某些微小异常，也不能排除一些多基因病、或其他原因导致的胎儿畸形或异常。绒毛染色体培养成功率及检查的准确率为98，染色体异常千变万化，诊断不能达到百分之百的准确。2、 多数情况下，穿刺术较安全。少数可能造成流产、死胎70、（正常胎儿发生率约35%，多胎高于单胎）；穿刺部位出血、血肿形成；胎儿畸形、胎儿肢体发育缺陷（发生率在孕龄10周时为12%，1012周时为1：3000）；宫内感染；穿刺失败（失败率约0.23.4%）。3、染色体检查有时会出现下述情况：母体细胞污染、病原体污染、个体差异、孕妇用药、水电或机械故障等原因，可导致细胞培养失败或影响结果的准确性。孕妇方已充分了解该检查的性质、合理的预期目的、风险性和必要性。对其中的疑问已得到经治医生的解答。经本人及家属慎重考虑同意接受绒毛活检术。为确认上述内容为双方意思的真实表达，医方已履行了告知义务，孕妇方已享有充分知情和选择的权利，签字生效。孕妇同意（签字）： 谈71、话医生： 年 月 日附二：脐血产前诊断知情同意书经母腹脐静脉穿刺术是在B超介导下进行的，一般比较安全，但即使医务人员在严格按照医疗技术规范进行操作的情况下，也有可能发生下述并发症和意外，接诊医师必须在术前向病人告知产前诊断的必要性和可能发生的风险，并取得病人的理解和同意。3、 通过本次检查，可以排除拟诊断的染色体异常疾病，但受现有医学技术水平的限制，有时难以分辨染色体的某些微小异常，也不能排除一些多基因病、或其他原因导致的胎儿畸形或异常。胎血染色体培养成功率及检查的准确率为98，染色体异常千变万化，诊断不能达到百分之百的准确。4、 多数情况下，穿刺术较安全。少数可能造成胎儿宫内死亡(1-2)、72、早产、胎儿一过性心动过缓、脐带和胎盘渗血、羊膜感染之可能。3、染色体检查有时会出现下述情况：母血细胞污染、病原体污染、个体差异、用药时间、水电或机械故障等原因，可导致细胞培养失败或影响结果的准确性。 孕妇方已充分了解该检查的性质、合理的预期目的、风险性和必要性。对其中的疑问已得到经治医生的解答。经本人及家属慎重考虑同意接受羊膜腔穿刺。为确认上述内容为双方意思的真实表达，医方已履行了告知义务，孕妇方已享有充分知情和选择的权利，签字生效。孕妇同意（签字）： 谈话医生： 年 月 日附三：羊水产前诊断知情同意书羊水产前诊断是通过羊膜腔穿刺术获取胎儿细胞，作染色体分析，行细胞遗传学诊断。但该项操作是以细73、针穿刺进入羊膜腔，为有创检查，存在但不局限于以下医疗风险和局限性：1通过本次检查，可以排除拟诊断的染色体异常疾病，但受现有医学技术水平的限制，有时难以分辨染色体的某些微小异常，也不能排除一些多基因病、或其他原因导致的胎儿畸形或异常。2多数情况下，穿刺术较安全。少数可能造成孕妇出血、出血性休克、羊水外流、羊水栓塞、流产及伤及胎儿之可能。如术前孕妇存在隐性感染或术后卫生条件不佳，有发生宫内感染之可能。3孕妇若合并心脑血管疾病，由于疼痛、紧张等刺激，有发生心脑血管意外之可能。4极少数孕妇因穿刺失败（如子宫畸形、胎盘位于前壁、腹壁太厚、羊水过少等原因）或细胞培养失败将造成无法进行诊断。 医务人员将严格74、按照医疗技术规范进行操作，尽最大努力减少上述风险的发生。孕妇方已充分了解该检查的性质、合理的预期目的、风险性和必要性。对其中的疑问已得到经治医生的解答。经本人及家属慎重考虑同意接受羊膜腔穿刺。为确认上述内容为双方意思的真实表达，医方已履行了告知义务，孕妇方已享有充分知情和选择的权利，签字生效。孕妇同意（签字）： 谈话医生： 年 月 日介入性产前诊断保护患者隐私制度 1.术前患者签署手术同意书和某项指标产前诊断的知情同意书。 2.手术医师有责任向患者说明产前诊断工作者的保密原则，以及应用这一原则的限 度。 3.手术时除与本次手术有关的工作人员外，其他任何人不得随意进入手术室。 4.术时除必须暴露75、的术野外，应注意遮蔽患者身体其他隐私部位。 5.由于医疗教学目的安排进修医师或实习医师参观手术时，应事先征求患者同意。 6.介入性产前诊断工作中的有关信息，包括病案记录、辅助检查结果和其他资料，均属专业信息，应在严格保密的情况下进行保存，不得列入其他资料之中。7只有在患者或家属同意的情况下才能对手术过程进行影象学资料采集，并向患者声明采集影象学资料的目的。在因专业需要进行案例讨论，或采用病例进行教学、科研、写作等工作时，应隐去那些可能据以辨认出患者的有关信息。介入性产前诊断手术标本运送防差错制度 1收集产前诊断标本的试管或离心管应标记患者的姓名、性别、年龄、标本类型和 采集日期。 2标本收集时76、要注意无菌操作，严防污染。 3核对送检单上与收集标本的试管或离心管上患者信息是否一致。 4手术后在专用登记簿上记录每例患者姓名、性别、年龄、孕龄、手术名称、手术 日期、标本类型、性状和标本量，以备复查。 5标本在处理前的存放状态(如抗凝、是否低温)要符合不同检查目的的要求。 6对于远距离运送的标本在递(寄)送过程中应做适当处理(如低温保护)，要符合 不同检查目的的要求。7收到或送到标本时双方应执行核对和签收。介入性产前诊断手术病例追踪制度 1手术前必须取得患者本人签署手术同意书和某项指标产前诊断的知情同意书。 2产前诊断病历上应记录患者的联系方式(地址、电话等)。3建议患者术后1周产科复诊，了77、解孕妇有无阴道出血、下腹痛、发热等不适症状，必要时B超了解胎儿宫内情况(包括胎心、羊水、胎盘等)。 4专人负责继续追踪随访患者直至产后6个月内。记录患者本人妊娠情况，胎儿情况，分娩和新生儿出生后健康情况。对于引产的孕妇需记录胎儿外观、尸检情况等。对于分娩时取脐血或取新生儿血复查产前诊断某个项目的，应记录检查结果。 5专人负责整理产前诊断病例追踪随访资料、及时归档。6定期分析有完整随访资料的产前诊断病例，总结产前诊断手术的并发症和诊断符合率。介入性产前诊断手术结果追踪制度 1手术前必须取得患者本人签署手术同意书和某项指标产前诊断的知情同意书。 2产前诊断病历上应准确记录患者的联系方式(地址、电话78、等)。 3术后建议患者按约定时间来院取产前诊断实验室结果报告单。 4专人负责追踪产前诊断实验室结果。若结果异常，即刻通知患者产前诊断结果并建议来院遗传咨询。若结果正常且已过约定时间患者仍未拿取，应及时通知患者。介入性产前诊断特殊病例登记制度 1介入性产前诊断手术时遇到特殊病例要单独登记在特殊病例登记簿上，内容包括手术日期、患者姓名、年龄、联系方式、孕龄、产前诊断指征、手术过程以及随访结果等。 2特殊病例包括罕见的胎儿异常者，产科(如多胎妊娠、羊水过少)或其他并发症可 能引起手术风险增加或操作困难者，手术出现并发症者。 3术后随访患者，追踪产前诊断病例结果和介入性产前诊断手术结果。 4. 特殊病79、例登记与追踪由手术医师完成。5. 特殊病例登记簿实行保密原则，存档备查。介入性产前诊断手术室控感制度 1手术室布局合理，符合功能流程和洁污分开的要求；分非限制区、半限制区、限制区。 2天花板、墙壁、地面无裂隙，表面光滑，有良好的排水系统，便于清洗和消毒。 3手术间限置于手术床。如手术间有限，应先做非隔离手术，再做隔离手术。严格隔离管理，术后器械及物品消毒，标本按隔离要求处理，手术间严格终末消毒。 4手术器具及物品必须灭菌。对接台手术需要重复使用的物品(如B超探头)要有足够的消毒时间。 5对凡是耐高压的手术用器具、物品均采用高压蒸汽灭菌。严格按照要求，各种包体积不能太大，不超过55cm33cm280、2cm大小，在每个包的中间部放置消毒指示卡，包外贴三M胶带，胶带上应保证有2条斜纹以上。消毒后，指示卡和三M胶带上的乳白条纹均变为黑色，表示达到灭菌目的。 6对精密仪器采用2%中性戊二醛液浸泡消毒，时间30min，每周过滤次，第二周 更换次，浸泡容器每周高压蒸汽灭菌一次，消毒液每月进行细菌培养一次，合格率达100。 7医务人员必须严格遵守消毒灭菌制度和无菌技术操作规程。 8入室人员进入限制区必须戴圆顶帽，戴口罩。 9工作人员外出必须更换工作衣、帽、裤、鞋。 10严格限制手术室内人员数量。实习进修人员，一律按手术室参观条件严格管理，进 入手术间不准大声喧哗，每个手术间参观人员不得超过2个人，参观81、者与术者保持l尺以上距离，并限制人员流动，避免空气污染。 11严格执行卫生、消毒制度，必须湿式清洁；每周固定卫生日。12手术废弃物品须置黄色或有明显标识的塑料袋内，封闭运送，无害化处理。介入性产前诊断手术室消毒隔离制度 1手术室必须分清非无菌区、相对无菌区、无菌区。 2手术间有限，应先做非隔离手术，再做隔离手术。 3对隔离手术，所用的器械、敷料等用物要有严格消毒处理措施。不得与其他敷料混合，并有标记。手术后手术间地面和空气严密消毒。 4手术室洗手、铺台、戴手套和手术过程均应符合无菌操作要求。 5护士进行各种治疗注射，拿放无菌物品，应符合无菌操作要求。 6接台手术人员在两台手术之间要洗手、更换无82、菌手套，更换一次性中单。对需要重复使用的物品(如B超探头)要有足够的消毒时间或更换消毒套。 7各种无菌包及无菌容器中的消毒液，由专人负责定期消毒或更换。 8工作人员熟悉各种消毒液的浓度及使用方法，可根据其效能定期检测。 9经常启盖的无菌盒，每周重复消毒灭菌，固定的敷料包、器械包，过期应重新灭菌。 10每月对各项灭菌项目进行细菌监测，每月对工作人员手指作细菌培养，并做好记 录。 1l用紫外线杀菌灯消毒时，应有时数登记和紫外线强度监测并登记。空气净化机使用要有时数登记，定期擦洗保养。12手术室应有定期清洁卫生制度，每日、每周、每月定人、定点、定时，做好清洁、消毒工作。定期做空气培养，手术室空气中细83、菌总数不得超过规定标准。介入性产前诊断手术室清洁要求 l每月做好手术室人员手、空气、物品表面、消毒液等的细菌培养，菌落数应在正常范围内。 2每月测定紫外线的辐射强度作为参考，每季用紫外线测定仪测定其辐射强度。若低于70uwcm2；应及时更换，以保证空气消毒效果。3手术室的清洁要求为，手术前室内空气菌落数在200个m3。介入性产前诊断手术室安全制度 1定期学习消防安全知识，爱护消防设施，不准移动或挪做他用。消防器材专人负 责，定期更换，定期检查。 2熟悉手术室的各种电器设备，遵守操作规程，手术结束后，应拔去所有电源插头。 电器设备由专人负责，定期检查，发现问题，及时处理。 3特殊药品应有专柜贮藏84、，并派专人保管，使用进行登记。 4易燃物品，应安置在通风阴暗处，要求远离火源，专人管理。 5值班人员应巡视手术室每个房间，负责氧气、水、电、门窗及大门的安全检查，坚守工作岗位。 6凡在手术室工作的各级人员均应按常规行事，以保障病人的安全。 7非值班人员勿任意进入手术室。 8手术室内严禁吸烟。 9接送病人注意安全，防止碰伤、摔伤。10如发现意外情况，应立即汇报有关部门。第三部分 唐氏筛查唐氏筛查实验室工作人员职责 1) 严格遵守实验室的规章制度及操作规程。 2) 严格做好三查三对工作。 3) 熟练掌握唐氏筛查的操作程序，包括标本处理、存放、试剂登记、时间分辨仪的使用、唐氏风险评估、唐氏报告发放。85、4) 严格把好质量关，每批实验完毕检查质控、结果分布情况，以此判断此批结果是 否采用。 5) 严格做好质控工作，如质控品失控，及时向上级汇报。 6） 学风严谨，态度认真，及时准确做好各项实验工作记录。7） 将唐氏筛查项目进展情况定期总结及时向科主任汇报。唐氏筛查实验室管理制度 1凡进入实验室的各类人员，必须遵守实验室有关规定和安全规程，爱护公共财物，保持室内安静和整洁。2仪器设备由专人管理，未经许可不得开启任何仪器设备，仪器设备的使用应依照操作规程，严禁将腐蚀性物质污染到仪器上，仪器使用后应顺序关机，盖上防尘罩。 3未经许可任何人不得随意改动实验室内任何插头、插座、开关及电源线；计算机和仪器设86、备的数据、程序不得任意删除、更改。 4未经实验室主任许可不得借出、移动、调换任何仪器设备。 5实验室冰箱为试剂或标本专用，严禁存放食物或饮料。6未按常规操作而损坏或丢失的物品，应按有关规定办理赔偿手续。7每次实验结束后，认真搞好清洁卫生，保持窗台、实验台、地面和仪器设备表面的清洁；实验物品用完后归于原处并摆放整齐。 8下班前，检查门、窗、水、电和各仪器设备状态，经常做好防水、防火、防盗、防止意外事故发生。9严格执行实验室卫生值日制度。唐氏筛查实验室标本管理制度 1实验室人员接收标本时应注意核对申请单：如科别、姓名、孕龄等，发现错误应及时处理。 2确定申请单各项是否填写清楚，如出生日期、末次月经87、体重、电话号码等，以及申请单上是否有同意筛查孕妇的签名。对月经周期不规则者，需有孕期B超记录。 3检查标本是否符合实验要求，如不符合要求的退回重留标本。 4标本要求为不抗凝外周静脉全血2ml，4小时内将标本送到实验室，实验人员接到标本后立即分离血清，若不及时处理，血清放置-20冰箱保存待测。 5将标本编号并在电脑上登记入库。6报告发放后，产前筛查标本须保留至少一年。唐氏综合症产前筛查操作常规一、仪器及试剂：仪器使用芬兰wa!lac公司主产的1235型全自动时间荧光分辨仪。试剂盒含有： 标准品一套，由盐酸缓冲液配牛血清蛋白组成，需存放在2-8冰箱稀释后2星期有效，标准品用叠氮钠(l)防腐(如与88、皮肤接触极吸入则有毒)，使用1.1ml蒸馏水溶解，30分钟后摇匀即可，注意不要有空泡。 96孔微孔板。 铕、钐标记物，生物素抗体，缓冲液。 另外需准备扩增液、洗板液、PAPPA血清稀释液。二、标本要求： 抽母血后尽快分离血清，贮存于-20冰箱(如在室温放置时间过长则会引起Free-HCG浓度降解导致结果偏低)，并在标本上写上编号。不能使用血浆标本，因EDTA会影响荧光测定，肝素会与PAPPA分子结合而使浓度下降，高脂、严重溶血的标本对荧光测定有影响。将需测定的标本置室温溶解、摇匀，离心除去气泡，按孕周不同将标本分为两组：孕早期(7-13周零6天)测PAPPA，孕中期(15-20周零6天)测AF89、PFree-HCG，月经周期不准的则需用B超定孕周，要三查三对才可上机测。PAPPA标本需稀释(1：5)，测定前要准备好稀释液及稀释管，稀释工作由仪器操作进行。三、实验步骤： 1将所有试剂及标本置室温，标本解冻后摇匀，除气泡。 2取出所需做数量板条，未用板条放回28冰箱保存。 3如需作标准曲线，则先加1.1ml蒸馏水至每标准管后30分钟溶解、摇匀、除气泡。4将试剂标本按要求放置仪器内。 5开机。四、PAPPA、AFPFree-HCG、Free-HCG、uE3工作程序： *PAPPA工作程序：稀释抗体液（1:12.5）每孔加入已稀释好的抗体l00ul/well摇匀孵育30分钟稀释样本（:）稀释标90、记物(1:125)洗板2次每孔加入稀释后标记物l00ul/well每孔加入稀释后的样本加50ul/well 摇匀孵育2H洗板6次每孔加入扩增液200ul/well摇匀孵育5分钟测定结果*AFPFree-HCG工作程序稀释所有的标记物(1:lOO)每孔加入已稀释好的标记物200ul/well每孔加入样本25uIwell摇匀孵育2.5H洗板6次 每孔加入扩增液200ul/well摇匀孵育5分钟测定结果* Free-HCG工作程序稀释所有的标记物(1:lOO)每孔加入已稀释好的标记物200ul/well每孔加入样本25uIwell摇匀孵育2.5H洗板6次 每孔加入扩增液200ul/well摇匀孵育591、分钟测定结果*uE3工作程序：稀释抗体液（1:34.3）每孔加入已稀释好的抗体l00ul/well摇匀孵育15分钟每孔加入样本50ul/well每孔加入已稀释好的标记物100ul/well摇匀孵育1H洗板6次每孔加入扩增液200ul/well摇匀孵育5分钟测定结果五、结果分析(一)曲线制作 1PAPPA荧光强度(CPS)的对数IgCPS为纵坐标，PAPPA浓度(muL)为横坐标绘制曲线。 2AFP：lgCPS为纵坐标，AFP浓度(Uml)为横坐标绘制曲线。 3Free-HCG：IgCPS为纵坐标，Free-HCG浓度为横坐标绘制曲线。 测出每标本的荧光强度，则仪器自动根据以上曲线拟合出相应标本92、的被测物浓度。由程 序1235AutoDelfia进行。 (二)风险分析保存结果后结合病人的资料(孕周数、体重、年龄)进行风险分析。参考结果以l/300为高风险，建议到我院遗传门诊咨询，以便进一步确诊，1/300以下的则属正常风险范围，高风险的患者资料需进行追踪，风险在l/20要及时追踪。孕中期的还要同时看神经管缺陷风险值l/1000为高风险与18三体风险值l/350为高风险，高风险建议遗传咨询并做进一步确诊和临床追踪。唐氏综合征筛查的质控制度1保证标本符合实验条件：取静脉血2-3ml，2000rpm离心10分钟，取上清液放入冷 冻管中，-20冷冻保存，等实验当天解冻，切忌反复冻融。2实验室人93、员：经培训，有实验技师上岗证的专业人员。3保证孕妇临床资料信息的准确性，特别是孕周的正确估计。4实验过程：严格按照说明书操作，每次新批号都做标准曲线。5.实验室质量控制：定期做室内及室外质量控制。1) 室内质量控制测定：在每次实验中加做室内质控标本，并用S2SD法则判断是否失控，若失控应查找原因并写失控报告提交科主任。2) 室外质量控制测定：定期参加卫生部或当地卫生技术监督部门的质量控制监测，成绩必需达到合格。6所有筛查阳性的孕妇需要首先对血清进行重复核对，以减少检测过程中的误差， 并同时核对孕周，以排除由于孕周错误所致的阳性结果。7超声核对孕周应以双顶径作为指标。因为部分唐氏儿的股骨偏短。894、每次实验结果应有2位技术人员核对，遇到可疑数据，在排除实验操作误差后，应 请示实验室主任后再发报告。9、产科医生应熟悉实验室报告，能对筛查结果进行解释。实验结果的判断要结合临床。特别注意病理状态对实验结果的影响。10筛查结果的原始数据和血清标本必须保存一年以上以备复查。产前筛查室内质量控制失控处理制度1当产前筛查室内质量控制失控时，在第一时间把失控情况上报科主任。2相关人员与科主任一起分析寻找失控原因。3纠正失控因素，重新进行实验。4查看重做的室内质控值，若在控方可发出产前筛查报告单。5即时填写失控报告并交科主任签字。产前筛查室间质量控制失控处理制度1当产前筛查室间质量控制不合格时，在第一时间95、把失控情况上报科主任。2相关人员与科主任一起寻找不合格原因。3纠正不合格原因，避免影响实验室报告不正确。4填写失控报告并交科主任签字，争取之后室间质量控制成绩合格。5下批室间质量控制成绩回报后应即时报告科主任。唐氏综合征筛查报告发放制度 1筛查诊断结果必须以书面形式报告。 2筛查报告应包括以下信息：(1)筛查指标及其中位数值 (2)经校正后的风险度 (3)阳性切割值应与临床医生常规以年龄为唯一唐氏儿风险指标行产前细胞遗传学诊断人群的切割值相一致 (4)筛查阳性者中，真正有问题的胎儿仅仅是很少一部分 (5)针对神经管缺陷的高危指标-AFP应报告MOM值。 3报告应包括相应的进一步处理的建议。 496、报告发放要及时，一般最多为7个工作日，对于筛查结果为极高风险的要及时电话通知孕妇。5筛查报告需两个以上相关技术人员核对后方可发出。产前筛查及产前诊断工作流程图 早孕建卡时进行产前筛查宣教不同意筛查同意筛查告知筛查的意义、疾病的检出率、假阳性率孕妇知情选择并签署同意书定期常规产前检查据不同孕周选择筛查方案低风险定期常规产前检查高风险或高危孕妇B超核对孕周解释结果，建议行羊水穿刺并告知其局限性及风险不同意需告知可能导致的不良后果同意并签字羊水穿刺，细胞培养，染色体核型分析结果正常结果异常告知患者情况并进行遗传咨询继续产前检查继续产前检查同意终止妊娠并签字不同意终止妊娠并签字终止妊娠并行遗传学检查记97、录妊娠结局唐氏筛查患者知情同意制度1遗传咨询医师、产科医师、妇科医师应向孕妇解释唐氏综合征的基本知识，包括疾病发生率、患儿情况以及孕妇高危因素等。2遗传咨询医师、产科医师、妇科医师应向孕妇解释开展孕期唐氏筛查的意义，特别是对阻止生育唐氏患儿的意义。3遗传咨询医师、产科医师、妇科医师应向孕妇解释筛查试验的效率及其局限性，特别是筛查试验并非确诊手段，有一定的假阴性率，对高危者需要产前诊断。4实施孕期唐氏筛查自愿和知情同意的原则，严禁执行强制性筛查。5孕妇若同意筛查必须在知情同意书上签字。6附产前筛查申请单。（见附表）唐氏综合征产前筛查追踪随访制度1医师填写唐氏筛查申请单时须包括被筛查人的电话号码或98、联系地址，以便随访。2应将筛查结果及时通知高危孕妇，并由有关遗传咨询医生进行解释和给予相应的 医学建议。3对于高危孕妇，若患者同意进一步进行产前诊断，应追踪诊断结果。若孕妇不同 意产前诊断，应继续追踪随访至分娩后，了解孕期是否顺利及胎儿或新生儿是否正常。4应将随访结果登记在唐氏筛查随访结果记录簿上，并定期总结统计分析。唐氏综合征筛查后高危人群的处理原则1应及时将筛查结果通知孕妇和/或家属，并由产前咨询人员与他们解释并共同讨论,提出进一步检查、诊断和转诊的建议。2对筛查结果怀疑神经管缺陷的孕妇建议进行超声检查。对唐氏儿高风险的孕妇建议 行细胞遗传学检查。在患者知情同意的基础上签署知情同意书。3对99、筛查出的高危病例，在未作出明确诊断之前不得随意为孕妇做终止妊娠的处理。4筛查机构应对筛查对象进行跟踪观察，直至分娩，并将观察结果准确记录(流产者应尽量争取获取组织标本行细胞遗传学诊断)。唐氏筛查实验原始记录和档案管理制度1实验室工作人员在工作时，应按照实验室的各项规章制度和程序文件认真负责完 成工作。2设置唐氏筛查资料柜。3实验室工作人员应及时、完整保存各项实验室工作原始记录单。实验原始记录要字迹清楚，不能随意涂改。4每份标本均要登记病人的详细资料，包括病人姓名、年龄、性别、地址、联系方式等。 5每份标本的检验结果均应录入电脑数据库，由专人管理。6将筛查结果为高风险、低风险的病人资料及其随访资100、料分类归档保管。唐氏筛查结果统计分析和上报制度 1实行每季度统计制度。 2统计内容包括：被筛查人数，不同风险类别人数，产前诊断人数及结果，追踪随访结果等。3将统计结果汇总分析，及时向科主任和上级主管部门汇报。 唐氏综合征筛查试剂管理制度1 唐氏筛查的试剂选购由医院设备科、唐氏筛查实验室共同确认。原则上不应随意 更换筛查试剂及消耗品。2 所有要购进的试剂、消耗品要填写试剂、消耗品申购单，科主任签字后送设备科执行。 3所有新进的试剂均在试剂、消耗品购买登记本上登记名称、数量、批号、购买日期，并在专用的位置合理存放，注意符合试剂的存放条件。 4当购买使用不同品牌或批号的新试剂时，必须重新绘制曲线。5101、负责管理化学试剂的工作人员应定期检查化学试剂的状态、数量及存放情况。如发现试剂过期、变质应及时处理；如发现所需试剂储备不足，应及时补充。唐氏综合症产前筛查仪器设备维护及保养制度 1、1235WALLAC时间分辨仪维护、保养 1)洗板测试 进入(保养板架菜单)。将一个空板架装上运输器并按下INOUT按钮，板架被运进仪器检查板条并装满洗液回到原位，目测是否每个孔都被装满液体，然后放回板架吸干液体，再检查液体是否被完全吸干，重复试验或关闭此检测程序。 如果有某些孔未被完全充满/吸干，则按洗板机清洁指示说明进行清洗。如果大部分的孔未充满大量液体未吸干，检查是否有吸管被挤压或漏气，如未有发现，则找一个工102、程师检查洗板机。 2)废品槽 3)样本处理器管道系统 检查样本处理器管道系统在充液时是否有气泡小气泡影响不大，但如果有大的气泡则使用MaintenanceSampleprocessorRinse命令进行冲洗，如果是大量气泡不能移动或位于探针的底部，则检查各接口是否连接紧密。 4)漂洗：进入(保养/样品处理器菜单)，系统将自动进行漂洗。每次工作时，漂洗会在最后个样品加样完后进行。 5)工作温度 进入(选项显示湿度)检查温度。仪器启动最少两个小时使温度稳定。在板架处理器盖子已盖上且室温为15-30时，系统工作温度应处于252。如果温度不在上述范围，联系工程师。 6)洗液瓶 清空并清洗样品及板架处理103、器的洗液瓶。清空废液瓶并用次氯酸盐液进行消毒一将大约1L浓度为01-05%的次氯酸盐缓冲液(含1000-5000活性氯)倒入瓶内，旋转液体，将液体保留30分钟，间中旋转，最后用清水清洗。 7)样本处理器管道系统：先用一个浓的洗液(1：20的洗液稀释液)冲洗，然后用蒸馏水及70-80的酒精(内不含丙酮)顺序冲洗。 8)板盖、样品板、镜子的清洁 用70-80的乙醇清洗仪器的塑料板盖。用蒸馏水清洗标准品放置盘(包括黑色及白色的部分)。再清洗试剂盖、试剂架、及样品架。注意：试剂架不可浸泡，洗完后须马上弄干。如果试剂分配器上有红色的残留物，则用湿纸巾将其擦拭干净。用70一80的乙醇浸过的纱布擦拭试剂运输104、杆。清洁板架装载器上的镜子。 9)洗板器清洗进入(保养板器处理器)，此项保养须由经过专业培训过的工程师进行。 10)探针检测：做精度及回收试验，如果结果不可信，更换探针： 11)溢液：仪器任何地方的溢液都必须擦拭干净。 12)血清溢出如果在样本处理器处有血清溢出，则先用清洁剂浸过的布擦洗传输带，再用清水洗去清洁剂，最后用70-80的乙醇擦一次。注意：小心血样有感染性。 13)孵育器：如果孵育器被血样或试剂污染，请叫工程师进行相应的清洁： 14)扩增液冲洗 进入(保养板架处理器菜单)。当仪器有一段时间没用时，旋用这个命令冲洗扩增液瓶。如果时间超过一个星期，扩增液应换成蒸馏水并再一次执行这个命令。105、重新开机时，记得换回扩增液并再次冲洗： 15)吸样探针 吸样探针应保持湿润，关机时，利用探针支撑器将探针浸入其下的蒸溜水液中，开机时记得将支撑器取出： 16)厂家保养或保修 2低温冰箱保养程序 1)每天检查低温冰箱的温度。 2)每月清洁一次。如果箱内积压太多的霜，或箱内太脏，则应关闭电源，将箱内所有标本取出溶霜，用干布将水分吸附掉，用中性洗涤剂进行清洗。清洗后，用纯净水将洗涤剂冲干净，再用干净的干布将冰箱抹净。3)压缩机和其他器械部件完全密封。第四部分 细胞遗传细胞遗传室工作人员职责 1) 熟练掌握各种细胞遗传实验技术，包括各种染色体标本的采集、制备和相关实验 试剂的配制等工作。 2) 熟练掌106、握染色体的核型分析，并能对各种染色体异常或变异情况进行理论解析。 3) 对人类染色体病有基本了解，对有关染色体病的基本知识、基本理论、风险计算 等应较为熟练。 4) 熟悉实验室有关标准操作规范和管理制度。 5) 具备严格的科学作风和工作态度，能及时、准确和清楚地做好实验记录。 6) 担负新技术人员的培训工作，指导进修、实习人员的学习，做好各类人员业务培 训和提高工作。7) 协助科主任制定科研计划及其实施，不断改进实验方法，提高质量。外周血染色体标本的采集程序 1材料：1640培养基(2瓶/人)，无菌肝素，一次性注射器（5ml）。2程序：1) 1640培养基放于-20保存，使用前取出在常温下溶解107、，注意使用的有效期。2）抽血前在培养基、注射器、申请单记录受检者姓名、编号，每人接种2份培养基。 3) 75酒精消毒培养基及肝素瓶盖，再在酒精灯上烧灼一下，用注射器吸0.1ml肝素抗凝, 抽取受检者3ml血并充分颠倒混匀。4) 分别注入2瓶培养基中(每瓶约26-30滴)，将余血保存4冰箱备复查。5) 病房接种完毕后将血标本与外周血染色体送检单一并送细胞遗传室。 6) 培养前认真核对培养瓶标签上患者信息与送检单是否一致，若核对无误立即将标本放于37培养箱培养。 7) 培养的标本应在外周血染色体检查登记本上记录。胎血染色体标本的采集程序 1材料：1640培养基(2瓶/人)，无菌肝素，一次性注射器。108、 2程序： 1) 1640培养基放于-20保存，使用前取出在常温下溶解，注意使用的有效期。 2) 抽血前在采集标签上记录受检孕妇姓名，并在标签上额外注明“E字(代表胎儿)，每人2份培养基。 3) 75酒精消毒培养基及肝素的瓶盖，再在酒精灯上烧灼一下，用注射器吸0.1ml肝素抗凝, 抽取受检者3ml血并充分颠倒混匀。 4) 取受检者血分别注入2瓶培养基中(每瓶约20-25滴)。 5) 接种完毕将血标本与胎血染色体送检单一并送细胞遗传室。 6) 细胞遗传室工作人员接到标本后应核对培养瓶标签上患者信息与送检单是否一 致，若核对无误立即将标本放于37培养箱培养。 7) 收到的标本在胎血产前诊断登记本上109、记录。羊水染色体标本的采集程序 l、材料：10ml无菌离心管2支，一次性注射器。 2、程序： 1) 羊水培养基放入-20冰箱保存，使用前取出在37水浴箱中预温，注意使用的有效期。 2) 采集羊水前在离心管上标记孕妇姓名和编号，每人2支离心管。 3) 介入性产前诊断医师行羊膜腔穿刺术抽取20ml羊水，分装于2支离心管，盖好橡皮盖，注意无菌操作。 4) 羊水标本与孕妇的羊水染色体申请单一齐送细胞遗传室。 5) 细胞遗传室工作人员收到标本后应核对离心管上患者信息与送检单是否一致，若核对无误按羊水染色体处理常规处理羊水标本。 6) 在羊水染色体细胞培养记录本上记录病人资料。绒毛染色体标本的采集程序1、110、材料：生理盐水10ml，玻璃瓶或培养皿个。2、程序：1) 采集绒毛前在玻璃瓶或培养皿上标记孕妇姓名。2) 按流产术常规取孕妇绒毛，粗略去除血凝块和母亲蜕膜组织后装入盛有生理盐水的玻璃瓶或培养皿内。3) 绒毛标本与孕妇的绒毛染色体检查申请单一齐送细胞遗传室。4) 细胞遗传室工作人员收到标本后应核对患者信息无误，按绒毛染色体处理常规处理绒毛标本。5) 接收标本后在绒毛染色体检查登记本上记录染色体标本采集质控制度1所有工作人员在采集各种染色体标本之前要接受培训，考核为合格。2对于脐血、羊水和绒毛等产前诊断病例在采集以前要核对指征，若有产前诊断禁忌症者，不宜采集。3采集前核对患者姓名、性别、年龄以及培111、养瓶或离心管上的标签。4采集前检查手术包和无菌管是否常规消毒并在使用有效期内。5. 严格执行各种操作技术常规及无菌技术，染色体标本采集、交接过程应防止污染。染色体标本接收制度l接收标本时应注意核对检验单上与无菌管上的患者信息是否一致，发现错误应及时与采集者联系。2检查标本是否符合实验要求，是否有交叉污染。不符合要求将标本退回，重留标本。3检查合格后，在染色体检查登记本上记录。羊水和无菌绒毛产前诊断标本在产前诊断登记本上登记记录。外周血淋巴细胞染色体培养制备操作常规一、原理：取外周血行体外培养，使淋巴细胞增殖转化处于有丝分裂中期，从而获取染色体分裂相。二、试剂和设备：（一）试剂： 11640培养112、基：湖南湘雅试剂。2 500单位/ml肝素：取每支2ml含肝素12500单位一支，用无菌生理盐水稀释至25ml。330ug/ml秋水仙素： 1）原液：10mg秋水仙素粉加100m1生理盐水，高压灭菌，避光保存。2）工作液：原液3ml加生理盐水至10ml。40075MKCL：5.6gKCL加1000m1蒸馏水溶解，备用。5固定液：甲醇，冰乙酸以3：l混合，每一份标本需40m1固定液。6PH74磷酸盐缓冲盐(PBS) 1）贮藏液： A液：1/15MNa2HP04称Na2HP0412H2O 23.87g加入1000ml蒸馏水溶解配制。 B液：1/15M KH2P04称KH2P04 9.073g加入1113、000ml蒸馏水溶解配制。 2）工作液：A液80.8ml和B液19.2ml混合7胰蛋白酶粉剂AMRESCO TRYPSIN l:250 1瓶 放于4储存。82.5胰蛋白酶使用液称2.5g胰蛋白酶粉剂加入100ml生理盐水，37水浴箱放置30分钟溶解后，放4冰箱4小时，分装1ml/管，置-20保存。9吉姆萨染色原液称1g吉姆萨染料加66ml甘油研磨溶解后，移入瓶内置5560水浴2小时，不时摇动使其溶化，待冷后加入甲醇66ml，放置室温23周后，以粗滤纸过滤备用。10吉姆萨染色使用液5ml吉姆萨染色原液混合45mlPH7.4磷酸盐缓冲盐。（二）设备：37恒温箱，干烤箱，37水浴箱，离心机，10 m114、1离心管和吸管，载玻片，垂直染色缸，双筒显微镜三、程序：(一) 种血无菌操作：用7号针头接种肝素抗凝血（2630滴/瓶），分别种入两瓶1640培养基，放入37培养箱72小时。(二) 收获1加秋：秋水仙素能干扰有丝分裂纺锤体的形成，使细胞“阻留”在分裂的中期，可增加适于染色体观察的有丝分裂细胞的数目。早上8：00加秋水仙素，用7号针头加秋水仙素(30ugm1)1滴于各培养瓶中，放回37恒温箱。2低渗：使细胞胀大，(胀大的程度取决于低渗液的浓度、渗透压)，染色体易于分布。10：00AM从培养箱取出培养瓶，移入离心管（有编号），离心1500rpm/min10分钟，去上清液，剩沉渣，每瓶加0.075M115、KCL低渗液8ml，吸管吹打10-20次，于37水浴30分钟。3预固定、固定：低渗后，每管加lml 3:1甲醇:冰乙酸，吹打匀，离心1500rpm/min10分钟；去上清液，加8ml固定液，吹打匀，离心1500rpm/min10分钟；去上清液，加8ml固定液，打散沉渣，置于室温中到中午，等待滴片。4滴片、烤片：离心1500rpm/min10分钟，去上清液，沉渣加少量固定液稀释，将沉渣均匀滴到相应已编号玻片上，吹开后即用酒精灯火焰烤干，最后放入75烤箱烤3小时。5显带：取2.5胰蛋白酶使用液1ml溶解后，加到装有50mlPH7.4磷酸盐缓冲盐的染色缸中，将玻片浸入消化约50秒，取出后依次浸入装有116、生理盐水的两瓶染色缸中泡洁净后，即放入染色液中。6染色：用吉姆萨染色使用液，染色5-10分钟(新配液时，时间短些，配液时间已久，染色时间要长些)，取出水洗吹干，看片。四、质控： 1、所有工作人员在进行染色体标本处理之前要接受培训，考核为合格。2、处理前核对培养瓶、离心管及吸管上的病人标签，防止混淆标本。 3、处理前应检查试剂有无变质，是否在使用有效期内。五、注意事项：l、固定液和染色液应新鲜配制。2、低渗要掌握好时间和水浴温度。3、吹打混均标本时手法力度要适中，防止染色体因操作不当而丢失或核型分散不良。4、烤片时要注意烤箱温度。绒毛染色体直接制备法常规一、原理： 取绒毛提取染色体，用于分析胚胎117、染色体核型。二、试剂和设备： 试剂：秋水仙素(100ugm1)，1640培养基，甲醇，冰乙酸，1%枸椽酸钠，磷酸缓冲液，10Giemsa染色液设备：37水浴箱，离心机，干烤箱，10mI离心管和吸管，载玻片，垂直染色缸，双筒显微镜，酒精灯三、取材：1、患者取膀胱截石位，查明子宫位置大小。2、按常规消毒外阴、阴道，子宫颈管、铺巾。3、直接用长200毫米，直颈2毫米塑料管按子宫方向慢慢进入宫腔稍感阻力，则停止。4、用10ml针筒，以5-8毫升负压，在“B超”指导下吸取绒毛。四、程序：1、将绒毛用生理盐水漂洗干净，湿重不低于5mg，置2ml“1640”培养基中（PH7.27.4），加100ug/ml秋118、水仙素7号针头1滴，在37温箱培养1小时。2、取出培养物，轻轻吸去上清液，用1%枸椽酸钠2ml低渗15分钟后，加固定液（甲醇：冰醋酸3：1）0.5ml。3、吸去上清液加固定液3ml，固定30分钟。4、吸去上清液，加入60%冰醋酸1ml处理2分钟，同时将绒毛用眼科剪剪碎，肉眼可见到米汤样液体，再加入固定液2ml，重新固定。5、将处理好的培养物移入离心管，以800转/分，离心8分钟取出，去掉上清液。 6、制片：一般用火烧法可得到较好的分裂像。70-80烤片2小时。 7、显带：时间是外周血的13-12。 五、质控： 1、所有工作人员在进行染色体标本处理之前要接受培训，考核为合格。 2、处理前核对培养119、瓶、离心管及吸管上的病人标签，防止混淆标本。 3、处理前应检查试剂有无变质，是否在使用有效期内。六、注意事项： 1、新鲜绒毛只选几枝绒毛枝，陈旧绒毛要选多些。 2、固定液和染色液应新鲜配制。 3、低渗与消化要掌握好时间和水浴温度。 4、吹打混均标本时手法力度要适中，防止染色体因操作不当而丢失或核型分散不良。5、烤片时要注意烤箱温度。羊水染色体直接制备法常规一、原理： 抽取羊水行体外原位培养，使羊水细胞增殖转化处于有丝分裂中期，从而获取胎儿染色体分裂相。二、试剂和设备： 试剂：羊水培养基(贝因美公司提供)，秋水仙素(30mgm1)，EDTA-胰酶，0.4柠檬酸钠，0.4KCL，甲醇，冰乙酸，0.120、5胰蛋白酶，磷酸缓冲液，10Giemsa染色液。 设备：37C02培养箱，干烤箱，37水浴箱，离心机，l0ml离心管和吸管，载玻片，垂直染色缸，双筒显微镜三、程序： 1、取材与接种：1）吸取妊娠16-24W孕妇羊水10-20ml，置已消毒的2只10ml离心管内（每只离心管内装8ml左右的羊水）2）以800转/分离心8分钟。3）吸去上清液，留下沉淀物，吸取羊水培养基3-4ml置离心管内，与细胞沉淀物混匀。4）将混匀细胞置预先准备好的一次性方形细胞培养瓶内。 2、培养与换液：1）培养瓶平放37CO2培养箱内，松开螺旋盖，培养7-8天。2）取培养瓶于倒置显微镜下，观察细胞生长情况，镜下见到羊水细胞贴121、壁，并形成许多细胞小岛，此时即可换液。3）倒去旧培养液，加入新鲜培养液5ml。3、收获：1） 置37培养箱，松开螺旋盖继续培养，之后每天观察细胞生长情况，如见到许多透亮圆形细胞出现，即可收获细胞。2） 加入秋水仙素（30ug/ml 7号针头1滴）置37培养箱，继续培养4小时。3） 将培养液倒去，加0.5%EDTA胰酶消化液2ml，置37恒温箱中5分钟，滴管吹打3-4次，使细胞冲击下来，然后把消化液吸到刻度离心管，再用0.85%生理盐水2ml，冲洗培养瓶内残留细胞，亦倒入刻度离心管中。4） 离心800-1000转/分8分钟。5） 吸去上清液，留下细胞沉淀物。6） 加低渗液（0.4%枸椽酸钠与0.122、4%kcl按1：1配成）3-4滴,以手指轻弹或气泡冲匀加至1ml,低渗（37）5分钟（低渗液应先置37水浴锅预热）。7）预固定加甲醇与冰醋酸（3：1）7滴轻轻以气泡冲匀。8）混匀，离心800-1000/转/分8分钟，去上清液加入固定液4ml，轻轻以气泡冲匀，静置40分钟。离心800-1000/转/分8分钟，去上清液，加固定液2ml，再固定20分钟。4、滴片与显带：1）离心800-1000转/分8分钟，去上清液，加入新鲜固定液3-4滴，气泡冲匀，即可进行滴片2-3张。2）新制的羊水片置75烤箱，烤片2小时。3）作胰酶G显带处理，方法同外周血染色体。 四、质控：1、所有工作人员在进行染色体标本处理123、之前要接受培训，考核为合格。2、处理前核对培养瓶、离心管及吸管上的病人标签，防止混淆标本。3、处理前应检查培养液及各种试剂有无变质，是否在使用有效期内。五、注意事项：l、获取的羊水标本要注意观察有无带血，若为血性，可用无菌肝素抗凝。2、严格遵守无菌技术操作，羊水的接种和换液过程要防止污染。3、其他如外周血染色体制备方法。C显带法一、实验原理 C显带技术由Arrighi和Hsu于1971年发明，是显带技术中最简单的一种带型。其方法起源于原位杂交。Arrighi和Hsu发现用碱处理载玻片上的染色体使DNA变性之后，再在SSC溶液中、65的条件下使其复性，在受控制的条件下经Giemsa染色可显示出在124、染色体的一定部位是深染的。70年代用原位杂交的方法证明深染的区域(C带区)是结构异染色质的区域，也就是一般而言的DNA高度重复序列的区域。然而，现在更为流行的看法认为氢氧化钡或其它碱性物质的处理是优先提取了非C带区的DNA，SSC的处理有助于带型的清晰。 二、实验用品 光学显微镜，恒温水浴箱，培养皿，lml注射器，擦镜纸，小镊子，未染色的染色体标本片(片龄一周以内)，5氢氧化钡溶液，2SSC液，0.2mol/LHCl，PBS，Giemsa染液。三、实验方法 1) 制片：常规外周血法制备的标本。 2) 氢氧化钡处理：将标本浸入60的5(饱和)氢氧化钡液中，10秒至几分钟(随气温和标本龄而变动，常125、规：14分钟；1月片龄：816分钟，最好设置梯度)，碱性处理可能通过产生一个高水平的DNA变性，促进继发的DNA溶解。 3) 2SSC处理：在60的2SSC液中处理90分钟时，用自来水冲洗干净。2SSC温育可使DNA骨架断裂并使断片溶解。 4) 染色：在5Giemsa染液染色10分钟，用自来水冲洗干净，室温下风干后即可镜检。 5) 镜检：用显微镜高倍镜镜下检查显带标本，如着丝粒区域或异染色质部位、次缢痕部位及Y染色体深染，染色体其它部位浅染，即为可取标本。若观察到染色体均呈白色，那么，可能是碱处理或2SSC温育过度。 四、显带观察 严格地讲，C带显示的是紧邻着丝粒的异染色质区。可见，在人体染色126、体C带标本中，深染的有：1、绝大多数染色体的着丝粒区；2、第1，9和16号染色体的次缢痕；3、Y染色体长臂的远侧端。 巴黎会议(1971)对各条染色体的C带描述如下。 1号大，从着丝粒扩展到长臂。 2号小。 38号中等 9号大，从着丝粒扩展到长臂。 10号中等。 11号中等，但比10号或12号大些。 12号中等。 13号中等，分为二节。 14号15号中等。16号大，从着丝粒向长臂扩展。17号中等。 18号中等，但比17号大些。 19-22号中等。 X中等。Y在着丝粒处有一条非常窄的带；长臂末端有一宽带。1，9，16号的C带和YQ上的宽阔的远侧带都有明显的形态变异及异态性。G-11显带法 一、实127、验原理 G11式显带是一种特异性显示9号染色体次缢痕的显带方法，一般用于9号染色体次缢痕多态分析、家系调查，亲子鉴定等研究以及9号染色体倒位的细胞遗传学分析。 二、实验用品 光学显微镜、恒温水浴箱、染色缸、吸管、记时器、pH试纸或pH计、蒸馏水、0.1N氢氧化钠、Gimesa染液等。 三、实验方法 1) 3 ml Gimesa原液中加入蒸馏水47 ml，混匀，用氢氧化钠调pH至11。 2) 将染色体玻片放入其中染色5分钟左右。 3) 自来水冲洗，干燥。 4) 观察可见9号染色体次缢痕染成紫红色。 四、注意事项 1) 染色体玻片片龄一般不要超过一周，且在显带之前最好再次75烤片5分钟。 2) p128、H值为11是显带成功的关键。 3) 染色时间可先摸索，如整个背景为蓝色、次缢痕未出现，可相应地延长染色时间；如整个背景为紫红色、次缢痕不明显则可相应地缩短染色时间。 五、显带观察 9号长臂次缢痕显紫色。N显带法一、实验原理 人类的近端着丝粒染色体(即13、14、15、21和22号染色体)的次缢痕处与核仁形成有关，故称核仁形成区(nucleolus-organizing region，NOR)，它是中期染色体上的明显结构之一。应用DNA-RNA分子杂交技术，证明人类的18S和28S核糖体RNA(rRNA编码结构)的基因(rDNA)位于NOR。目前已有多种技术可以显示中期染色体上的核仁形成区。其中129、最简单而又准确的方法是银染法，即利用硝酸银将具有转录活性的核仁形成区(rRNA基因)特异性地染成黑色，人们将这种银染阳性的核仁形成区称为Ag-NOR，它们是具有转录活性的18SrRNA基因和28SrRNA基因所在的部位。由于具有转录活性的rRNA基因(rDNA)往往伴有丰富的酸性蛋白质，该类蛋白质含有巯基(-SH)和二硫键(-S-S-)，能使AgNO3中的Ag+还原成Ag颗粒，因此有转录活性的核仁形成区常被镀上银颗粒而呈现黑色，没有转录活性的NOR则不着色。故其着色程度与细胞中rRNA基因的转录活性相一致。在同一物种，Ag-NOR的数目以及它们在染色体上的位置是相对恒定的，如果发生了改变就意味130、着rRNA基因的活性发生了变化，故此项技术是目前探讨rRNA基因功能的方法之一。此外，人类近端着丝粒染色体的随体间易发生联合，这种联合可能是造成近端着丝粒染色体不分离、断裂和易位的原因。利用银染技术可在发生联合的染色体间清楚地看到有银染物质相连。因此，银染近端着丝染色体联合(Azstained acrocentric asSOCiation，Ag-AA)可以作为准确地判断人体细胞是否存在近端着丝粒染色体随体联合的客观标准。目前，也将Ag-AA看作反映rRNA基因活性大小的一个指标。所以银染技术已逐渐受到重视，并已开始广泛应用于肿瘤细胞遗传学、体细胞遗传学、进化遗传学、临床细胞遗传学及药物、化学131、因素等的遗传效应的研究上。二、实验用品 光学显微镜、恒温水浴箱、移液枪、培养皿(干燥)、吸管、擦镜纸、小镊子、未染色的染色体标本片(片龄一周以内)、硝酸银、甲酸、Giemsa染液、一次性离心管(15m1)、去离子水、锡箔纸。三、实验方法 1) 设60水浴箱，另置Giemsa染液缸于37水浴箱。 2) 临时配制新鲜的AgNO3溶液：取一次性离心管(15m1)一支，称取AgNO35g溶于10ml去离子水中，加l0ul甲酸，混匀。将一干燥培养皿漂于60水浴箱水面上。 3) 将玻片用4层干净擦镜纸(略小于玻片大小)盖好。 4) 用吸管将AgNO3溶液慢慢滴于玻片纸上，直至擦镜纸呈棕黄色(黑色)为止，一132、般10ml能滴两张玻片。5) 擦镜纸变黑后，用镊子轻轻启开擦镜纸，将玻片用自来水冲干净。6) 6Giemsa染色液染色5分钟。 7) 染色后的玻片标本用自来水洗去多余染料，染色过深可用磷酸缓冲液脱色。室温下风干后即可镜检，必要时可用树胶封片。镜检时先在低倍镜下选择分散好、长度适中的分裂相，然后转换油镜观察其显带的情况，选择显带好的标本进行核型分析。 四、注意事项 1) AgNO3工作液应现用现配，并注意避光。用锡箔纸包住离心管，放置时间不能超过20分钟，如放置的时间较长，溶液出现混浊即不宜再使用。 2) 滴AgNO3液时，不能让玻片干燥。注意防止银染液溅至衣物和手上，以免留下难以去除的黑色污点133、。 3) 滴片时染色体标本片一定要平置，以使染液均匀分布在标本上，使标本着色均匀。 4) 一定要让玻片擦镜纸变黑后再冲洗。 5) 染色时间因材料而异，因Giemsa染料批号不同、质量上有差异，因此其染色液浓度和染色时间需作适当调整。 五、显带观察 13、14、15、21和22号染色体的随体和随体柄为黑色。核型分析的阅片、审片、报告发放制度 l外周血染色体报告发放程序 1) 染色体核型分析时，所有被分析和计数的分裂相都要记录玻片号、显微镜座标和显微镜号。 2) 核型分析常规计数20个核型，分析3个中期分裂相。如疑嵌合体或镶嵌体，计数 100个核型，并计算百分比。 3) 报告发放时间为接收标本后1134、5个工作日，如因特殊原因不能准时发放报告者，应及时通知受检者和送检医师。 4) 正常染色体核型需由审片小组中一人审片签字后，方可发放报告。如发现染色体核型异常(包括数目或结构异常)，需由审片小组成员同时审片签字后，方可发放报告。 5) 发现受检者染色体结构异常者(平衡易位、重复、缺失等)，应建议受检者家系调查。 2羊水和脐血染色体报告发放程序 1) 染色体核型分析时，所有被分析和计数的分裂相都要记录玻片号、显微镜座标和显微镜号。 2) 羊水和脐血染色体核型分析常规计数30个核型(2张玻片各计数15个核型)，分析3个中期分裂相。如疑嵌合体，计数lOO个核型，并计算百分比。 3) 羊水染色体报告发135、放时间为接收标本后15个工作日，脐血染色体报告发放时间为接收标本后7个工作日。如标本培养失败，应即时通知受检者和送检医师，以便能及时复查。 4) 产前诊断染色体结果正常染色体核型需由审片小组中一人审片签字后，方可发放报告。如发现染色体核型异常(包括数目或结构异常)，需由审片小组成员同时审片签字后，方可发放报告。 5) 产前诊断结果应及时通知受检者，并建议遗传咨询。 6) 发现胎儿染色体结构异常者，应建议夫妇双方染色体检查，如有必要，建议家系 调查，以明确异常染色体的来源或是否突变。 7) 一般情况下产前诊断严禁发放有关性别报告，除非医学上具有明确的需要进行胎 儿性别鉴定指征者。 8) 产前诊断136、结果必须以书面形式报告，内容包括：孕妇姓名，孕妇年龄，标本采集时的孕龄，产前诊断指征，标本类型，染色体分析方法，产前诊断结果，阅片人姓名，审片人姓名，报告发放日期。9） 产诊断结果必须只进行核型异常与否或异常类型的客观描述，不作出临床诊断。染色体产前诊断随访制度1产前诊断前孕妇签署书面手术同意书，记录孕妇的联系电话和地址。2由专人负责产前诊断孕妇的随访追踪至分娩后6个月，包括妊娠经过、分娩情况、 新生儿情况等。3对于引产的孕妇需了解胎儿外观、病理检查等。4专人负责产前诊断病例追踪随访资料保管、督促产前诊断资料归案。5专人负责定期总结统计分析数据，并交于科主任审查。患者知情同意制度1遗传咨询时医137、师应向患者详细解释某种染色体病的发病原因、遗传方式、诊断与 防治，以及在亲属与子女中再发此病的风险等，供患者参考。2患者有染色体产前诊断指征时，应向其解释产前诊断的益处、手术风险以及染色 体核型分析技术的技术指标和局限性。 3若患者同意产前诊断，本人签署手术同意书。六、支持性文件：胎儿染色体检查申请单、外周血染色体检查书保护患者隐私权制度 1患者的病历资料和检验结果由专人负责登记保管。 2各种染色体检查登记本和产前诊断病历须妥善保存，无关人员不能随意翻阅。 3严禁在无关医务人员或其他病人面前谈论受检者病情和预后。3 患者的检验结果发放给受检者本人或其监护人、委托人，未经受检者本人或其监护人同意138、，不能随意告知无关人员。实验室资料管理保存制度 1每份标本均要登记完善病人资料和检验结果，包括病人姓名、年龄、性别、职业、籍贯、联系地址或电话、既往史和现病史、体格检查以及染色体核型分析记录和结果等。 2原始申请单应保留五年以上，产前诊断资料则应保留十年以上。 3染色体核型分析时，所有被分析和计数的分裂相都要记录玻片号和显微镜座标及显微镜号，并与原始申请单共同保存。 4病人的染色体玻片亦应保留五年以上。 5每份病人资料和染色体核型报告均应录入电脑，由专人管理。录入电脑的资料可 定期刻录于光盘上，长期保存。 6产前诊断染色体检查病例应做好定期随访，随访记录与产前诊断资料统一保存。六、支持性文件：139、外周血染色体检查登记本 羊水染色体检查登记本绒毛染色体检查登记本 Applied Imaging软件 室间质控制度1细胞遗传室应与外院同行及上级相关部门建立工作联系，定期交流工作经验。2如遇疑难病例可按疑难病例会诊制度进行院外会诊。3. 各细胞遗传室按相关制度建立专家小组，定期指定专人负责检查和评估抽查各实验室的工作条件、实验操作常规、染色体标本的制片效果和核型分析的准确性。染色体检查信息统计制度 l、外周血、绒毛及产前诊断(包括羊水和胎血)染色体检查结果均应每季度统计汇总分析。包括受检人数、异常核型数量和类别等。2、总资料应及时向负责人和上级主管部门汇报。细胞遗传室档案管理制度 1实验室工作140、人员在工作时，应按照实验室的各项规章制度和程序文件认真负责的 完成工作。 2同时及时、完整填写各项实验室工作记录，每项记录册有指定负责人。 3各项染色体检查登记本由工作人员在将接收标本时按各项标本采集程序和标本采集质控制度完成。 4染色体检查获得结果时，应由工作人员在电脑AI软件中录入病人资料、结果和染色体核型分析图片。 5试剂、消耗品购买登记本由室主任指定专人负责接收试剂，将试剂的批号、接收时间、数量项目记录在册。 6试剂配制登记本由各项实验的试剂配制人，在配制试剂时填写。 7各项细胞遗传室仪器运行状况登记本由操作人在操作仪器后按登记本要求填 写。 8各项仪器维修保养记录由操作人在仪器维修和141、保养后按细胞遗传室仪器运行状 况登记本要求填写。 9接种培养室消毒记录表由实验室工作人员和清洁工人，在每次完成各项消毒清洁工作时记录。10室内质量控制记录表由各项实验操作人员在完成实验时将实验数据详细记录，判断是否失控。室内质控制度 1细胞遗传室的工作人员必须受过细胞遗传实验技术的培训，熟练掌握各种细胞遗传 实验技术和染色体的核型分析技术。 2严格遵守本实验室各种有关标准操作规范和管理制度。 3使用新购买的或新配置的试剂时，必须先与既往相应的试剂进行对照实验，当确定 新试剂效果时方能常规使用。 4每次染色体G显带应有至少320条带纹。 5染色体核型分析时，所有被分析和计数的分裂相都要记录玻片号142、和显微镜座标及显微镜号。 6每个病人的染色体片和分析结果必须按实验室资料管理保存制度保存。 7科主任定期指定专人负责抽查染色体标本的制备过程、制片效果和核型分析的准确性。疑难病例会诊制度1科内会诊：由细胞遗传室技术人员提出，科主任召集本科室所有工作人员参加会诊。 2院内会诊：由于病情疑难复杂，须由科主任通知其它科室有关人员参加，并确会诊时间。院内会诊一般科主任主持，并由专人在疑难病例会诊记录册做记录。3院外会诊：由科主任申请，经院领导或医务部门同意，并与有关医院联系，商定会诊时间。会诊由提出申请的科主任主持，也可以将病历资料和染色体标本寄送到外地医院进行书面会诊。试制配制及存放常规11640培143、养基的配制1)原理：为了制备染色体标本，应用含一定组成成份的培养基进行血细胞培养，使血细胞在离体的环境下得以生长与繁殖。2)材料：(1) 1640（纯液体）华美公司提供、小牛血清、PHA、10%NaHCO3 (2) 滴管、盐水瓶、量杯、橡皮塞，以上材料需要无菌消毒；(3) 一次性滤器。 3）配制程序：取1640（纯液体）80ml和小牛血清20ml按（4：1）混合后，加入已经一次性滤器滤过无菌处理的PHA0.4ml，并用无菌10%NaHCO3调PH为7.2。20.075MKCL溶液(低渗液)的配制：1)原理：用于细胞低渗处理。2)材料和方法：取KCL 5.6g加双蒸水至1000ml，混匀，室温保144、存。30.25胰蛋白酶溶液的配制：1)原理：用于G显带前的消化处理。2)材料和方法：称2.5g胰蛋白酶粉剂加入100ml生理盐水，37水浴箱放置30分钟溶解后，放4冰箱4小时，分装1ml/管，置-20保存。4PH7.4磷酸缓冲液的配制：1)原理：用于稀释Giemse染色液和0.25%胰蛋白酶溶液2)材料和方法：贮藏液： A液：1/15MNa2HP04称Na2HP04.12H2O 23.87g加入1000ml蒸馏水溶解配制。 B液：1/15M KH2P04称KH2P04 9.073g加入1000ml蒸馏水溶解配制。 工作液：A液80.8ml和B液19.2ml混合5Giemsa染色液的配制：1)原145、理：用于染色体显带。2)材料与方法：称1g吉姆萨染料加66m1甘油研磨溶解后，移入瓶内置5560水浴2小时，不时摇动使其溶化，待冷后加入甲醇66ml，放置室温23周后，以粗滤纸过滤备用。6秋水仙素溶液的配制：1)原理：促使细胞分裂终止与有丝分裂中期，从而得到较好的染色体核型。2)材料与方法：(1)原液：10mg秋水仙素粉加100m1生理盐水，高压灭菌，避光保存。(2)工作液：原液3ml加生理盐水至10ml。用棕色瓶装好，高压消毒后分装，放于-20避光保存，备用。使用时每瓶培养基用7号针头加1滴。7500单位/ml肝素的配制：取每支2ml含肝素12500单位一支，用无菌生理盐水稀释至25ml，备146、用。使用时每支注射器吸0.1ml。8EDTA-胰蛋白酶的配制：1)原理：用于羊水细胞脱落和消化处理。2)材料与方法：(1)EDTA胰蛋白酶原液：NaCl 8g， KCl 0.4g， NaHCO3 0.58g， EDTA 0.2g，葡萄糖粉1 g，胰酶0.5g，1酚红0.2ml加三蒸水至100m1，冰存，用时1:9稀释。(2)EDTA胰蛋白酶使用液：取EDTA胰蛋白酶原液4ml，加三蒸水至40ml,用无菌漏斗(Gelman SciencesProductNo4612)过滤，并放入-20冰箱保存。实验室试剂、消耗品采购验收储存程序 1实验人员每月月中根据本室工作需要，结合近期试剂、消耗品的消耗情况147、，作出采购试剂、消耗品的申请计划，送交科主任审批。 2科主任审批同意后，向医院设备科提出购买申请。 3由医院设备科直接向生产厂家购买。 4收到试剂、消耗品的实验室工作人员首先检测外包装包括厂家名称、批准文号、批号和有效期。对试剂盒的性能进行质检，并在试剂、消耗品购买登记本详细作好登记。5从厂家购买的试剂首先按要求保存在试剂冰箱中。试剂管理制度 1所有新进的化学试剂均由指定的专人负责在试剂、消耗品购买登记本上登记名称、数量、批号，并在专用的位置合理存放，注意试剂存放的温度及是否需要避光。 2新配制试剂时，工作人员应在试剂配制登记本上做记录。3使用新试剂时，必须先与既往相应的试剂进行对照实验，当确148、定新试剂效果时方能 常规使用。4 负责管理化学试剂的工作人员应定期检查化学试剂的状态、数量及存放情况，如发现试剂过期、变质应及时处理；如发现所需试剂储备不足，应及时补充。C02培养箱保养程序 1C02培养箱应放于接种培养室，室内应有恒温设备，室内定期消毒，具体措施详见接种培养室的消毒隔离制度。 2每日检查并记录CO2培养箱的温度和CO2浓度，如发现异常或报警，应立即查明故障原因以排除故障。 3每日检查CO2泵压力和蒸溜水液量，如发现CO2压力和蒸馏水液量已很低，应及时更换CO2瓶和蒸馏水。 4每月应对培养箱进行一次大清洁： 5每季度用CO2测量仪检测一次CO2培养箱内的实际CO2浓度，并对比控149、制面板所显示的值与实际值是否吻合。若出现较大误差，应立即清工程师检修。C02培养箱操作程序 1使用前连接好C02通气管道，和蒸馏水管，并用75酒精清洁培养箱内壁、金属托盘。 2接通电源，开机。3把减压阀出气压力调到0.06Mpa，最大不能超过0.1Mpa。4按Mode键选Set是设定你所需要控制的值，按左右箭头选择设定项，如TEMP是温度设定（37），OTEMP是超温报警设定（38），CO2是二氧化碳设定（5%），然后按上下箭头设定新的数值，最后按ENTER键确认保存。另外除非特殊情况，请不要动Cal和Config内的参数。5. 要高温消毒，请把箱内过滤器和增湿盘拿出来，IR传感器换下来把CO150、2设定为零，整个消毒过程需要12小时，包括升温、消毒、降温三个步骤。消毒结束后把增湿盘放回箱内，把过滤器复位，以及把CO2设定为你所需要的值。 6专人负责每日检查CO2培养箱的温度、湿度和C02浓度，并记录于CO2培养运行记录表上。 7取出标本或放入标本时都应迅速关闭箱门，减少C02泄漏。六、注意事项：1.如果显示Replace HEPA，表示要更换箱内高效过滤器。2.如果不用二氧化碳，请把二氧化碳设定到零点，否则会报报警。3.培养箱在使用时，室内温度要保持在28左右，否则会超温报警。4.培养箱在使用时，增湿盘内不能缺水。显微镜保养操作程序 1使用上的注意事项 1) 由于显微镜系精密仪器，所以151、务请不要碰击，精心地加以对待和使用。 2) 取出显微镜时，请拿OM固定部和荧光用投光管的固定螺丝部。 3) 关于显微镜的搬动：搬动显微镜时，握住显微镜的固定部或从镜台侧面及后面把手插入镜台底部抬起。由于支手座是塑料制成的，所以请不要拿着这部分向上抬提。否则有可能损坏仪器。 4) 光源灯是指定类型的卤素灯，请不要使用其他类型的灯。 5) 请不要在阳光直射、高温多湿、灰尘多和有震动的地方使用。 6) 粗调控制钮的重量调节，一定要用调节环来进行。 7) 换保险丝时，请拔掉电源线插头后再操作。 8) 为了防备万一，务请接好地线。 2检修和保存时的注意事项 1) 清扫透镜等要用纱布轻拭，对指纹及油脂类的152、污迹要用三分酒精，七分乙醚兑成的混合液，或二甲苯少许，沾在擦镜纸上轻轻拭擦。 2) 清扫各部时要避免使用有机溶剂，特别是塑料部分，要用中性洗剂洗。 3) 操作培养液等液体时，请充分注意不要泼撒出来。万一撒出来时，清立即擦掉。当有泼出的危险时，请使用另售的防水罩。 4) 转换器的物镜安装螺丝，在没有安装物镜时，一定要罩上镜罩，以防灰尘及泼撒的培养液沾到下面的透镜上。 5) 不使用显微镜时务必罩好防尘罩。 显微镜操作程序 1NIKON倒置显微镜TE2000-S型操作程序 1） 明场观察 放入标本。 打开透射光电源开关。 调节光源亮度旋至合适亮度。 把减光片，滤光片，隔热片插入光路。 把起偏器和检偏153、器拉出光路。 把系统聚光器5孔转盘转到空位。 将荧光滤色块转轮放在空位上。 把10X物镜转进光路，按照物镜上所标工作距离（W.D）大概目测调节粗调旋纽，到接近距离时，通过目镜边观察边粗调，到出现模糊图像时改为微调，直到图像清晰。再根据所需放大倍率转放物镜。 关机时先把光源亮度旋至最小，关掉电源开关。2）相差观察 放入标本。 打开透射光电源开关。 调节光源亮度旋至合适亮度。 把减光片，滤光片，隔热片插入光路。 把起偏器和检偏器拉出光路。 将荧光滤色块转轮放在空位上。 把系统聚光器5孔转盘转到PH1。 把10X物镜转进光路，按照物镜上所标工作距离（W.D）大概目测调节粗调旋纽，到接近距离时，通过目154、镜边观察边粗调，到出现模糊图像时改为微调，直到图像清晰。当用20X物镜时，把系统聚光器5孔转盘转到PH1，当用40X物镜时，把系统聚光器5孔转盘转到PH2 关机时先把光源亮度旋至最小，关掉电源开关。3）荧光观察 打开荧光电源开关，黄灯亮，按激发开关，绿灯亮。 将Shutter拨到“O”位置。 插入适当减光片到光路中。 选择所需荧光滤色块，把其转到光路中。 放入标本。 把10X物镜转进光路。 按照物镜上所标工作距离（W.D）大概目测调节粗调旋纽，到接近距离时，过目镜边观察边粗调，到出现模糊图像时改为微调，直到图像清晰。选择所需物镜。 关机。（注意开关时间要间隔20分钟以上,当暂时不观察时，将Sh155、utter拨到“C”位置来保护标本） 2AI染色体自动分析仪操作程序 1) 接通电源，依次打开显微镜、显示屏、打印机和电脑主机。 2) 把标本放于载物台上，先将10x物镜调入光路，用粗调按钮对焦，然后用微调对 焦，使视野清晰。 3) 使用高倍镜和油镜对焦时只能使用微调对焦，防止损坏镜头和载玻片。 4) 打开AI软件，先取图，再按染色体自动分析程序依次操作。 5) 所记录的病人资料和染色体图片应贮存入数据库长期保存。 6) 使用荧光系统时应在暗室内进行。荧光镜的选择使用荧光镜转换器按钮调换。 7) 使用完毕，应先把光源调节旋钮调到最低亮度，然后关闭显微镜。电脑必须于退出所有运行中的程序后方可关机156、。 8) 使用完油镜三分酒精、七分乙醚兑成的混合液或二甲苯少许，沾在擦镜纸上进行 拭擦。 冷冻离心机保养程序 1当日使用完清洁一次。 2用干布将离心机外部和内部以及附件上的少量脏物擦拭掉。如果箱内非常脏，应 用中性洗涤剂进行清洗。在清洗之后，用纯净水将洗涤剂完全冲洗干净。 3决不能将水倾倒于离心机上或箱内，这样会破坏箱体的电气绝缘和导致故障发生。 4压缩机和其他机械部件被完全密封，保存箱完全不需要润滑。冷冻离心机操作程序 1、每日保养：每天需检查系统中仪器各部分的基本状态及清洁仪器表面的灰尘和样 品盘上的冷凝水。 2、开电源开关，在“LED”(开盖指示)状态下，方能开盖放入离心管。 3、离心管157、必须对称放置在转头内。对称放置的离心管应重量相当。 4、盖好盖子，把盖锁锁紧，设定机器的转速，离心温度、时间，按“ENTER”键确定设置好的程序，然后按“START”键启动。 5、离心完成，当机器显示“OPEN”时方能开盖。取出离心管后，待内腔温度接近室温时，用干净布将离心腔内的水擦干，若积水太多，先用专用吸水器将水吸出。 6、机器长时间不用，请关机，并把转头取出。 7、使用中的离心机半年必须对转头进行清洗、晾干、涂脂并上光。 8、忽然停电时电子锁会自动打开，此时转头仍在旋转，应待转头停转后再开盖。 9、关闭电源后，在细胞遗传室贵重仪器运行状况登记表上详细记录使用情况。六、支持性文件：冷冻离心158、机使用说明书医用冰箱保养程序 1每月清洁一次。 2用干布将保存箱外部和内部以及附件上的少量脏物擦拭掉。如果保存箱非常脏， 应用中性洗涤剂进行清洗。在清洗之后，用纯净水将洗涤剂完全清洗干净。 3决不能将水倾倒于保存箱上或箱内。这样会破坏保存箱的电气绝缘和导致故障发生。 4压缩机和其他机械部件被完全密封，保存箱完全不需要润滑。医用冰箱操作常规 1安全注意事项 1) 启动冰箱时，请按“记忆及报警”键。长时间停电、修理或清洁后再启动时，此项操作也应进行。 2) 发生故障或清洁、维护冰箱时，必须拔下冰箱的电源插头。 3) 盛有液体的玻璃瓶或罐不能放在冷冻室里，否则完全冷冻时可能爆裂： 4) 冰箱顶部及两159、侧应保留30CM以上的空间。 5) 冷冻室温度没定在-18和+2之间。 6) 将高温物品放入冰箱前，应充分冷却。 2除霜 1) 冷藏室能自动除霜，不要堵塞排水孔和排水槽，以保证凝结水的正常流动。 2) 冷冻室蒸发器上结的霜层大约有5MM厚时，要进行除霜。一年应给冷冻室除霜一到二次。 3清洁 1) 冷藏室应一个月清洁一次，冷冻室最好在每次除霜后清洁。 2) 清洁门封条时必须用清洁水并且随后擦干。细胞遗传室值班制度 1外周血接种时间常规定为每周二、五上午；羊水接种时间常规定为每周一、三上午。 2如遇急病、重病患者需即时行染色体检查，本着为病人服务的宗旨，由负责人安排相关工作人员为病人接种染色体，如160、当时为节假日、双休日或下班后，按加班计算。 3节假日一般不行染色体接种，但节前接种的染色体需节假日处理者，安排细胞遗传室工作人员轮流值班。值班人员接到通知后应及时回到工作岗位，按常规工作，认真负责，不得马虎行事或无故推卸。实验结束后，值班人员应检查各仪器运行情况，切断不需使用的电源和水源，维护实验室的安全。消毒制度1工作人员的消毒隔离制度1) 进入无菌室前应更换室内专用鞋，并佩戴一次性的帽子和口罩。2) 无菌操作前应先修剪指甲并洗手。3) 用流水冲洗双手及前臂。4) 用灭菌巾自手擦前臂，再取约3-5m1灭菌王液涂擦双手及腕臂2分钟，再待干2 分钟后即可穿戴手套进行操作。5) 操作时注意无菌技术161、。2接种培养室的消毒隔离制度1) 每日用含有效氯200-500mg/L消毒液拖地二次，抹洗台面、超净台，每周彻底清扫一次。2) 手术间术前紫外灯照射30分钟，紫外灯管每周用 9 5酒精擦拭一次。强度保持70VWCM2以上，执行者要记录签名。3) 室内拖鞋用含有效氯200-500mg/L消毒液浸泡3 0分钟，每周清洁一次。4) 每月做细菌培养一次，包括空气、消毒物品、物体表面、工作人员的手，监测消毒效果。3器械物品消毒隔离制度1) 无菌物品与有菌物品严格分开，各种无菌物品标签清楚，并有灭菌日期,使用前检查；消毒有效期为一周，超过期限须重新消毒。2) 超净工作台在使用前应先行紫外灯照射30分钟，然162、后开动风机，使已经滤过的无菌空气源源而入，实验完毕后关掉风机，用含有效氯200-500mg/L消毒液抹洗工作台，并用紫外灯照射30分钟。3) 一切培养用品均需高压灭菌消毒，过期不用。4）新配制的培养液均应做无菌试验后方可使用。第五部分 优生优育血清学筛查优生优育血清筛查实验室管理制度 1凡进入实验室的各类人员，必须遵守实验室有关规定和安全规程，爱护公共财物， 保持室内安静和整洁。 2仪器设备的使用应依照操作规程。未经许可任何人不得随意改动实验室内任何插 头、插座、开关及电源线；计算机和仪器设备的数据、程序不得任意删除、更改。 3每次实验结束后，认真搞好清洁卫生，保持窗台、实验台、地面和仪器设备163、表面 的清洁；实验物品用完后归于原处并摆放整齐。 4未经实验室主任许可不得借出、移动、调换任何仪器设备。 5未按常规操作而损坏或丢失的物品，应按有关规定办理赔偿手续。 6下班前，检查门、窗、水、电和各仪器设备状态，经常做好防水、防火、防盗、防止意外事故发生。 孕期TORCH筛查阳性孕妇处理原则 1TORCH检查阳性报告及时通知患者，并建议遗传咨询。 2如遇可疑者一般2周左右复查TORCH-IgM，TORCH-IgG。 3结果判断TORCH：IgM(+)、IgG(+)怀疑为近期内感染；IgM()、IgG(+)怀疑为既往感染；IgM(一)、IgG()为无感染；IgM(+)、IgG()建议追踪复查。164、4 咨询医师应告知孕妇血清学筛查TORCH感染的局限性，以及产前诊断的意义及其局限性。优生优育血清筛查标本管理制度 1标本要求为不抗凝静脉血1.5ml，4小时内送实验室存放4冰箱，3天内不能 完成检测，须分离出血清置-20冰箱待检. 2收集标本时要注意核对检验单患者姓名和检查项目，避免弄错标本。 3实验室人员接收标本时要注意检查试管内血是否符合标准，并对标本进行编号。4将试管上条码信息输入电脑登记，以备实验后打印报告单和留档备查。TORCH-IgM检测操作规程一、实验原理： TORCH-IgMELISA检测系统是针对由于感染TORCH抗原而产生IgM类抗体，并对此抗体进行检测而设计的测试系统。165、整个检测步骤包括三步温育过程。 1用提供的样品稀释液稀释待测血清。样品稀释液中含有抗人IgG，它可以将样品中的IgG和类风湿因子沉淀掉，使IgM得以和抗原反应。在样品温育过程中，特异性的IgM抗体将与免疫抗原结合，然后洗去未结合的抗体和血清中其他的成分。 2结合有过氧化物酶的羊抗人IgM(u链)，加到微孔板上温育。结合物与第一步中事 先连接在板上的抗体杂交,然后洗去未反应的结合物。 3固定在微孔板上的免疫过氧化物酶结合物与其底物溶液反应，底物水解发生颜色变 化。一定时间后终止反应，读取光吸收值即可。溶液颜色的深浅与原始待测样本中 的抗体浓度有关。二、试剂要求：美国Zeus(宙斯)三、主要器材：166、酶标仪：美国BIORAD 洗板机：奥地利Anthos四、操作步骤： 1试剂盒组成 (1) 酶标板：96孔12条X8孔板，用灭活抗原包被的酶标板，酶标板放置在酶标板框架上并密封在一个含有干燥剂的包装袋中。 (2) 结合剂：辣根过氧化物酶结合的抗人IgM(u链)。直接使用，15ml一瓶，白色盖子，内加防腐剂。 (3) 阳性对照(人血清)：035ml一支，红色盖子，内加防腐剂。 (4) 校正品(人血清)：05ml一支，蓝色盖子，内加防腐剂。 (5) 阴性对照(人血清)：035ml一支，绿色盖子，内加防腐剂。 (6) 样品稀释液：30ml，一瓶(蓝色盖子)。溶液中含有Tween-20、BSA、磷酸盐缓167、冲液 (PH7202)和抗人IgG(链)，紫色溶液，直接使用。注：使用前充分混匀，内加防腐剂。 (7) TMB：15ml一瓶，琥珀色瓶子(琥珀色盖子)，含有TMB，直接使用。溶液中含DMSO 15(W)。 (8) 终止液：15ml一瓶，红色盖子，溶液中含有1 M H2S04，0.7M HCl。直接使用。 (9) 浓缩洗板液(10X浓度)：1份浓缩洗板液加9份的去离子水或蒸馏水。100ml一瓶(透 明盖子)，含有10X浓度磷酸盐缓冲液(PH7202)、Tween-20(蓝色溶液)，内加防腐剂。2样本收集与保存 使用血清样本，静脉穿刺术采集血液。样本于2-8C可保存2天，于-20可长期保存。不要使168、用脂血或溶血的样本。样本避免反复冻融。3试剂准备(1) 洗液：使用前用蒸馏水按1：10稀释，即100ml浓缩洗液+900ml蒸溜水。若有结晶，稀释前应先在37熔解。稀释后，室温可保存5天，2-8可保存2周。(2) 样品准备：采用新鲜或解冻的血清。按1：21倍数稀释阳性对照、校正品、阴性对照和每个病人的血清样品(例如：10ul血清+200ul样本稀释液，使用前充分混匀)。4操作步骤 (1) 将试剂盒组分从贮存条件取出，使其恢复至室温(20-25)。(2) 确定试验所需微孔板数量。每次试验都应设六个质控品校正品(一个试剂空白对照、一个阴性对照、三个校正品和一个阳性对照)。每次试验均需设置试剂空白对169、照。检查软件和酶标仪以确认质控品校正品的参数。将剩余的板条仍然放入有干燥剂的密封袋中，保存在28。(3) 在每个孔内加入100ul稀释过的对照、校正品和样本。保证标本充分混匀。不同的样本使用不同的吸头。(4) 加入100ul样本稀释液于A1作为试剂空白对照。检查软件和酶标仪以确认试剂空白的参数。(5) 板条在室温(20-25)温育255分钟。(6) 洗板5次。 A手工洗板步骤： a甩掉孔中的液体。 b在每个孔内加入洗板液，确保孔中无气泡。 c重复a和b步骤，洗板5次。 d甩掉孔中的洗板液，在纸巾上拍干孔中的洗板液。目测微孔中无残留洗板液。 把洗板液收集在废液缸中，并在每天实验结束用05次氯酸钠170、处理。 B自动洗板步骤： 如果使用自动洗板机，把洗板溶液体积设置为300-350pl孔。设置无间隔循环清洗五次。最后将微孔板从洗板机上取下，置于纸巾上拍干。 (7) 每孔中加入100ul结合剂，按照样品加入的顺序以相同的速率和顺序依次加入微孔板中。 (8) 微孔板在室温(2025)温育255分钟。 (9) 按照步骤6进行洗板。 (10) 每孔中加入100ulTMB，按照样品加入的顺序以相同的速率和顺序依次加入微孔板中。 (11) 微孔板在室温(2025)温育10-15分钟。 (12) 每孔加入50ul终止液以终止反应，按照TMB底物溶液加入的顺序以相同的速率和顺序依次加入微孔板中。阳性的标本会171、从兰色变为黄色。加入终止液后，拍打平板数次以确保样品完全混合。 (13) 将微孔板置于450nm波长下读取每个孔的光密度值，以空白试剂作对照。应在加入终止液30分钟内读取数据。5质量控制：(1)每次试验中，校正品都要重复3次。同时包括一个试剂空白对照、阴性对照、阳性对照。(2)计算3个校正品的平均值。如果有一个值超过平均值的15，则剔除后计算另两个孔的平均值。(3) 校正品的平均OD值和阳性对照、阴性对照的值应在以下范围： OD值范围 阴性对照 0.250 校正品 0.300阳性对照 0.500A 阴性对照的OD值除以校正品的平均OD值应0.9 B阳性对照的OD值除以校正品的平均OD值应1.2172、5 C如果不符合上述要求，认为本次试验无效应重复试验。(4) 阳性对照和阴性对照用来监控试剂的情况，但不能保 Cutoff值的准确性。(5) 根据要求还可以加入其他对照。(6) 本质量控制参照NCCLS的C24号文件：定性测试的统计学质量控制。 6结果判断(1) 计算：A校正因子 阳性对照的cutoff值由生产者确定，并与校正品有关。校正因子(CF)可以帮助你判断阳性标本的域值，纠正每次实验中细微的读数变化。校正因子的确定应决定于不同批的试剂盒的不同组分，并打印在试剂盒的组分表中。 BCutoff值： 用校正因子乘以校正品的平均值即获得Cutoff值。 C参考值或OD比率： 每个标本都要计算参173、考值或OD比率，方法是它们的OD值除以步骤B中得来的Cutoff值。 例如： 校正品的平均OD值 =0.793 校正因子(CF) =0.25 Cutoff值 =0.793x0.25=0.198 未知标本的OD值 =0.432 标本的参考值或OD 比率 =0.4320.198=2.18 (2) 说明：参考值或OD比率按如下判断： 参考值或OD比率 阴性样本 0.90 阳性样本 1.10 OD比率0.90表明没有检测到IgM抗体。阴性结果表明近期或以前未感染过弓形虫。这样的个体怀疑为早期感染者，早期感染阶段如果标本采集时间过早，则可能检测不到IgM抗体。如果怀疑该患者为早期感染者，应该在7天内再次174、采集该个体的标本，并将新采集的标本与前面的标本同时重复试验。 OD比率110则表明IgM抗体阳性。该结果表明该个体为感染或近期感染。检测到高于Cutoff值的结果的数值，并不表明抗体存在的数量。 样本的OD比率如果在以下范围内(091-109)，应该重复试验。如果重复实验的结果相同，该个体的标本应该在7天内重新采集并与前面的标本重复实验。如果第二次的结果仍在上述范围内(或阴性)，两个标本均应做IgG抗体检测试验。如果第一个标本，或两个标本结果为IgG抗体阳性，很可能是早期感染过病源虫，在IgG存在的情况下，残留IgM被检测。如果两个标本检测IgG时均为阴性，很可能是早期感染患者。按照临床要求，175、应该采集另一标本并同时与第一标本同时试验，或者二者选一。TORCH-IgG检测操作规程一、 实验原理：TORCHIgG ELISA试剂盒用来检测人血清中的IgG抗体。通过与抗原的被动吸收使检测变得更灵敏。整个检测步骤包括三步温育过程。1待测血清经过适当稀释后，在包被有抗原的微孔板上温育。样本中特异性抗体将与免疫抗原结合。然后洗去未结合的抗体和血清中其他的成分。2结合有过氧化物酶的羊抗人IgG(链)，加到微孔板上温育。结合物与第一步中事先连接在板上的抗体杂交。然后洗去未反应的结合物。3固定在微孔板上的免疫过氧化物酶结合物与其底物溶液反应，底物水解发生颜色变 化。一定时间后终止反应，读取光吸收值即176、可。溶液颜色的深浅与原始待测样本中的抗体浓度有关。 二、试剂要求： 美国Zeus(宙斯)三、主要器材： 酶标仪：美国BIORAD 洗板机：奥地利Anthos四、操作步骤：1试剂组成(1) 酶标板：96孔12条X8孔板，用灭活抗原包被的酶标板，酶标板放置在酶标板框架上并密封在一个含有干燥剂的包装袋中。(2) 结合剂：辣根过氧化物酶结合的抗人IgG(链)。直接使用，15ml，一瓶，白色盖子。内加防腐剂。(3) 阳性对照(人血清)：035ml一支，红色盖子。内加防腐剂。(4) 校正品(人血清)：05ml一支，蓝色盖子。内加防腐剂。(5) 阴性对照(人血清)：035ml一支，绿色盖子。内加防腐剂。(6177、) 样品稀释液。30ml，一瓶(绿色盖子)。溶液中含有Tween-20、BSA、磷酸盐缓冲液 (PH7202)和抗人IgG(Y链)，紫色溶液，直接使用。注：使用前充分混匀。内加防腐剂。 (7) TMB：15ml一瓶，琥珀色瓶子(琥珀色盖子)，含有TMB，直接使用。溶液中含DMSO 15(W)。 (8) 终止液：15ml一瓶，红色盖子，溶液中含有1 M H2S04，0.7M HCl。直接使用。 (9) 浓缩洗板液(10X浓度)：1份浓缩洗板液加9份的去离子水或蒸馏水。100ml一瓶(透 明盖子)，含有10X浓度磷酸盐缓冲液(PH7202)、Tween-20(蓝色溶液)。内加防腐剂。(注：1X浓度178、的溶液PH应为7202。)2样本收集与保存使用血清样本，静脉穿刺术采集血液。样本于2-8可保存2天于-20可长期保存。不要使用脂血或溶血的样本。样本避免反复冻融。3试剂准备(1) 洗液的配制：使用前用蒸馏水按1：10稀释，即100ml浓缩洗液+900ml蒸馏水，若有结晶，稀释前应先在37溶解。稀释后，室温下可保存5天，2-8下可保存2周。(2) 样本稀释：按l：21倍数稀释阳性对照、校正品、阴性对照和每个病人的血清样品(例如：10ul血清+200ul样本稀释液，使用前充分混匀)。 4操作步骤(1) 将试剂盒组分从贮存条件取出，使其恢复至室温(20-25C)。(2) 确定试验所需微孔板数量。每次179、试验都应设六个质控品校正品(一个试剂空白对照、一个阴性对照、三个校正品和一个阳性对照)。每次试验均需设置试剂空白对照。检查软件和酶标仪以确认质控品校正品的参数。将剩余的板条仍然放入有干燥剂的密封袋中，保存在2-8。(3) 在每个孔内加入100ul稀释过的对照、校正品和样本。保证标本充分混匀。不同的样本使用不同的吸头。(4) 加入100ul样本稀释液作为试剂空白对照。检查软件和酶标仪以确认试剂空白的参数。(5) 板条在室温(20-25)温育255分钟。(6) 洗板5次。 A手工洗板步骤：a甩掉孔中的液体。b在每个孔内加入洗板液，确保孔中无气泡。 c重复a和b步骤，洗板5次。 d甩掉孔中的洗板液，180、在纸巾上拍干孔中的洗板液。目测微孔中无残留洗板液。把洗板液收集在废液缸中，并在每天实验结束用05次氯酸钠处理。 B自动洗板步骤： 如果使用自动洗板机，把洗板溶液体积设置为300-3501al孔。设置无间隔循环清洗五次。最后将微孔板从洗板机上取下，置于纸巾上拍干。(7) 每孔中加入100ul结合剂，按照样品加入的顺序以相同的速率和顺序依次加入微孔板中。(8) 微孔板在室温(20-25)温育255分钟。(9) 按照步骤6进行洗板。(10) 每孔中加入100uiTMB，按照样品加入的顺序以相同的速率和顺序依次加入微孔板 中。(11) 微孔板在室温(20-25)温育10-15分钟。(12) 每孔加入5181、0ul终止液以终止反应，按照TMB底物溶液加入的顺序以相同的速率和顺序依次加入微孔板中。阳性的标本会从兰色变为黄色。加入终止液后，拍打平板数次以确保样品完全混合。(13) 将微孔板置于450nm波长下读取每个孔的光密度值，以空白试剂作对照。应在加入终止液30分钟内读取数据。 5质量控制： (1) 每次试验中，校正品都要重复3次。同时包括一个试剂空白对照、阴性对照、阳性对照。 (2) 计算3个校正品的平均值。如果有一个值超过平均值的15，则剔除后计算另两个孔的平均值。 (3) 校正品的平均OD值和阳性对照、阴性对照的值应在以下范围： OD值范围 阴性对照 0.250 校正品 0.300 阳性对照182、 0.500 A阴性对照的OD值除以校正品的平均OD值应0.9 B阳性对照的OD值除以校正品的平均OD值应1.25 C如果不符合上述要求，认为本次试验无效应重复试验。 (4) 阳性对照和阴性对照用来监控试剂的情况，并不能保证Cutoff值的准确性。 (5) 根据要求还可以加入其他对照。(6) 本质量控制参照NCCLS的C24号文件：定性测试的统计学质量控制。6结果判断(1) 计算： A校正因子 阳性标本的cutoff值由生产者确定，并与校正品有关。校正因子(CF)可以帮助你判断阳性标本的域值，纠正每次实验中细微的读数变化。校正因子的确定应决定于不同批的试剂盒的不同组分，并打印在试剂盒的组分表中183、。 BCutoff值 用校正因子乘以校正品的平均值即获得Cutoff值。C参考值或OD比率每个标本都要计算参考值或OD 比率，方法是它们的OD值除以步骤2中得来的cutoff值。 例如： 校正品的平均OD值 =0.793 校正因子(CF) =0.25 Cmoff值 =0.7930.25=0.198 未知标本的OD值 =0.432 标本的参考值或OD比率 =0.4320.198=2.18 (2) 说明： 参考值或OD比率按如下判断： 参考值或OD比率 阴性样本 0.90 阳性样本 1.10 OD比率0.90表明没有检测到抗体。阴性结果表明近期或以前未感染过。这样的个体怀疑为首次感染者，首次感染如184、果标本采集时间过早，则可能检测不到IgG抗体。如果怀疑该患者为早期感染者，应该在814天内再次采集该个体的标本，并将新采集的标本与前面的标本同时重复试验以确定是否血清转化。 OD比率1.10则表明IgG抗体阳性。该结果表明该个体为感染或近期感染。 样本的OD比率如果在以下范围内(091-109)，应该重复试验。如果重复实验的结果仍然是可疑的，则应用另一种血清学方法测定。 为评价成对的(急性和预后的)血清，要同时对两个样本检测。如果急性的标本是阴性的而预后的是阳性的，则发生了血清转化，预示着首次弓形虫感染。ACA-IgM检测操作规程一、实验原理：抗核抗体酶联免疫法检测试剂盒用来检测人血清中系列核185、酸抗原的IgM抗体。通过与抗原的被动吸收使检测变得更灵敏。整个检测步骤包括三步温育过程。 1、待测血清经过适当稀释后，在包被有抗原的微孔板上温育。样本中特异性抗体将与 免疫抗原结合。然后洗去未结合的抗体和血清中其他的成分。 2、结合有过氧化物酶的羊抗人IgG(链)，加到微孔板上温育。结合物与第一步中事 先连接在板上的抗体杂交。然后洗去未反应的结合物。3、固定在微孔板上的免疫过氧化物酶结合物与其底物溶液反应，底物水解发生颜色变化。一定时间后终止反应，读取光吸收值即可。溶液颜色的深浅与原始待测样本中的抗体浓度有关。二、试剂要求： 美国Zeus(宙斯)三、主要器材： 酶标仪：美国BIORAD 洗板机186、：奥地利Anthos四、操作步骤：1试剂组成(1) 酶标板：12条 8孔包被有灭活抗原的微孔板。装置在一个框架上，放入有干燥剂的密封袋中。(2) 结合剂：HRP结合的羊抗人IgG(链)。可以直接使用。15ml一瓶，白色盖子。加有防腐剂。(3) 阳性对照(人血清)：0.35ml一支，红色盖子。加有防腐剂。(4) 校正品(人血清)：0.5ml一支，蓝色盖子。加有防腐剂。(5) 阴性对照(人血清)：0.35ml 一支，绿色盖子。加有防腐剂。(6) 样品稀释液：30ml一瓶(绿色盖了)。溶液中含有Tween20、BSA、磷酸拈缓冲液(pH7202)。绿色溶液，直接使用。注：使用前充分混匀。加有防腐剂。187、(注：本试剂可适用于所有的ZeusELISA试剂盒)(7) TMB：15ml琥珀色瓶子一瓶(琥珀色盖子)。溶液中含有TMB，直接使用。另含有 DMSO15(W)。(8) 终止液：15ml一瓶(红色盖子)。溶液中含有1MH2S04，0.7MHCl。直接使用。(9) 浓缩洗板液(10X)：1份浓缩洗板液加9份的蒸馏水或去离子水。100 ml瓶(透明盖子)。含有10X浓度的磷酸盐缓冲液和Tween20溶液(兰色)。加有防腐剂。(注：1X浓度的溶液pH应在7202)2样本收集与保存使用血清样本，静脉穿刺术采集血液。样本于2-8可保存2天于-20可长期保存。不要使用脂血或溶血的样本。样本避免反复冻融。3188、试剂准备(1) 洗液的配制：使用前用蒸馏水按1：10稀释，即100ml浓缩洗液+900ml蒸馏水，若有结晶，稀释前应先在37溶解。稀释后，室温下可保存5天，2-8下可保存2周。(2) 样本稀释：按l：21倍数稀释阳性对照、校正品、阴性对照和每个病人的血清样品(例如：10ul血清+200ul样本稀释液，使用前充分混匀)。 4操作步骤(1) 将试剂盒组分从贮存条件取出，使其恢复至室温(20-25C)。(2) 确定试验所需微孔板数量。每次试验都应设六个质控品校正品(一个试剂空白对照、一个阴性对照、三个校正品和一个阳性对照)。每次试验均需设置试剂空白对照。检查软件和酶标仪以确认质控品校正品的参数。将剩189、余的板条仍然放入有干燥剂的密封袋中，保存在2-8。(3) 在每个孔内加入100ul稀释过的对照、校正品和样本。保证标本充分混匀。不同的样本使用不同的吸头。(4) 加入100ul样本稀释液作为试剂空白对照。检查软件和酶标仪以确认试剂空白的参数。(5) 板条在室温(20-25)温育255分钟。(6) 洗板5次。 A手工洗板步骤：a甩掉孔中的液体。b在每个孔内加入洗板液，确保孔中无气泡。 c重复a和b步骤，洗板5次。 d甩掉孔中的洗板液，在纸巾上拍干孔中的洗板液。目测微孔中无残留洗板液。把洗板液收集在废液缸中，并在每天实验结束用05次氯酸钠处理。 B自动洗板步骤： 如果使用自动洗板机，把洗板溶液体积190、设置为300-350ul孔。设置无间隔循环清洗五次。最后将微孔板从洗板机上取下，置于纸巾上拍干。(7) 每孔中加入100ul结合剂，按照样品加入的顺序以相同的速率和顺序依次加入微孔板中。(8) 微孔板在室温(20-25)温育255分钟。(9) 按照步骤6进行洗板。(11) 每孔中加入100ulTMB，按照样品加入的顺序以相同的速率和顺序依次加入微孔板 中。(12) 微孔板在室温(20-25)温育10-15分钟。(13) 每孔加入50ul终止液以终止反应，按照TMB底物溶液加入的顺序以相同的速率和顺序依次加入微孔板中。阳性的标本会从兰色变为黄色。加入终止液后，拍打平板数次以确保样品完全混合。(1191、4) 将微孔板置于450nm波长下读取每个孔的光密度值，以空白试剂作对照。应在加入终止液30分钟内读取数据。 5质量控制： (1) 每次试验中，校正品都要重复3次。同时包括一个试剂空白对照、阴性对照、阳性对照。 (2) 计算3个校正品的平均值。如果有一个值超过平均值的15，则剔除后计算另两个孔的平均值。(3) 校正品的平均OD值和阳性对照、阴性对照的值应在以下范围： OD值范围 阴性对照 0.250 校正品 0.300 阳性对照 0.500 A阴性对照的OD值除以校正品的平均OD值应0.9 B阳性对照的OD值除以校正品的平均OD值应1.25 C如果不符合上述要求，认为本次试验无效应重复试验。 192、(4) 阳性对照和阴性对照用来监控试剂的情况，并不能保证Cutoff值的准确性。 (5) 根据要求还可以加入其他对照。(6) 本质量控制参照NCCLS的C24号文件：定性测试的统计学质量控制。 6结果判断(1) 计算： 阳性校正品 阳性对照的cmoff值由生产者确定，并与校正品有关。校正因子(CF)可以帮助你确定待测样本的域值，纠正每次实验中细微的读数变化。校正因子的确定应决定于不同批的试剂盒的不同组分，并打印在试剂盒的组分表中。 OD值到MPL值的转换 OD值到MPL值的转换可根据以下公式计算： 待测样本MPL=(AB)C 其中： MPL= 待测样本值 A= 待测样本OD值 B= 校正品的M193、PL值C= 校正品的平均OD值 例： 待测样本的OD值=0.946 校正品的OD值=0.435 校正品的MPL值=155MPL 则：待测样本MPL值=(0.946155)0.435待测样本为337MPL (2) 结果说明： 病人标本按如下判断： MPL 正常人 20 弱阳性 20至30 中等阳性 20至80强阳性 80(3) 限制: 抗心磷脂抗体IgM酶联免疫检测试剂盒不能作为唯一的诊断依据，试验结果应结合临床评价和其他诊断方法结果进行病情判断。 脂血、溶血、黄疸的标本不适用于本试剂盒。 虽然研究已经证明aCL与某些SLE病有关，但这方面的临床意义还要继续观察。 正常aCL值的范围可能会因人群194、不同而变化。以上所定的正常值范围只是基于美国当地的正常人群所测得的值。建议使用者应根据当地实际情况建立自己的正常值范围。 任何检测结果的临床意义的判断有赖于和其他病人之间的比较。疾病诊断和处理也应该先和其他相似病人的资料比较。 假阳性结果可能与风湿因子和抗心磷脂IgG的存在有关。ACA-IgG检测操作规程 一、实验原理：心磷脂IgG酶联免疫法检测试剂盒用来检测人血清中抗心磷脂的IgG抗体。通过与抗原的被动吸收使检测变得更灵敏。整个检测步骤包括三步温育过程。 1、待测血清经过适当稀释后，在包被有抗原的微孔板上温育。样本中特异性抗体将与 免疫抗原结合。然后洗去未结合的抗体和血清中其他的成分。 2、195、结合有过氧化物酶的羊抗人IgG(链)，加到微孔板上温育。结合物与第一步中事 先连接在板上的抗体杂交。然后洗去未反应的结合物。3、固定在微孔板上的免疫过氧化物酶结合物与其底物溶液反应，底物水解发生颜色变化。一定时间后终止反应，读取光吸收值即可。溶液颜色的深浅与原始待测样本中的抗体浓度有关。二、试剂要求： 美国Zeus(宙斯)三、主要器材：酶标仪：美国BIORAD 洗板机：奥地利Anthos四、操作步骤：1试剂组成(1) 酶标板：12条 8孔包被有灭活抗原的微孔板。装置在一个框架上，放入有干燥剂的密封袋中。(2) 结合剂：HRP结合的羊抗人IgG(链)。可以直接使用。15ml一瓶，白色盖子。加有防196、腐剂。(3) 阳性对照(人血清)：0.35ml一支，红色盖子。加有防腐剂。(4) 校正品(人血清)：0.5ml一支，蓝色盖子。加有防腐剂。(5) 阴性对照(人血清)：0.35ml 一支，绿色盖子。加有防腐剂。(6) 样品稀释液：30ml一瓶(绿色盖了)。溶液中含有Tween20、BSA、磷酸拈缓冲液(pH7202)。绿色溶液，直接使用。注：使用前充分混匀。加有防腐剂。(注：本试剂可适用于所有的ZeusELISA试剂盒)(8) TMB：15ml琥珀色瓶子一瓶(琥珀色盖子)。溶液中含有TMB，直接使用。另含有 DMSO15(W)。(9) 终止液：15ml一瓶(红色盖子)。溶液中含有1MH2S04，197、0.7MHCl。直接使用。(10) 浓缩洗板液(10X)：1份浓缩洗板液加9份的蒸馏水或去离子水。100 ml瓶(透明盖子)。含有10X浓度的磷酸盐缓冲液和Tween20溶液(兰色)。加有防腐剂。(注：1X浓度的溶液pH应在7202)2样本收集与保存使用血清样本，静脉穿刺术采集血液。样本于2-8可保存2天于-20可长期保存。不要使用脂血或溶血的样本。样本避免反复冻融。3试剂准备(1) 洗液的配制：使用前用蒸馏水按1：10稀释，即100ml浓缩洗液+900ml蒸馏水，若有结晶，稀释前应先在37溶解。稀释后，室温下可保存5天，2-8下可保存2周。(2) 样本稀释：按l：21倍数稀释阳性对照、校正品198、阴性对照和每个病人的血清样品(例如：10ul血清+200ul样本稀释液，使用前充分混匀)。 4操作步骤(1) 将试剂盒组分从贮存条件取出，使其恢复至室温(20-25C)。(2) 确定试验所需微孔板数量。每次试验都应设六个质控品校正品(一个试剂空白对照、一个阴性对照、三个校正品和一个阳性对照)。每次试验均需设置试剂空白对照。检查软件和酶标仪以确认质控品校正品的参数。将剩余的板条仍然放入有干燥剂的密封袋中，保存在2-8。(3) 在每个孔内加入100ul稀释过的对照、校正品和样本。保证标本充分混匀。不同的样本使用不同的吸头。(4) 加入100ul样本稀释液作为试剂空白对照。检查软件和酶标仪以确认试199、剂空白的参数。(5) 板条在室温(20-25)温育255分钟。(6) 洗板5次。 A手工洗板步骤：a甩掉孔中的液体。b在每个孔内加入洗板液，确保孔中无气泡。 c重复a和b步骤，洗板5次。 d甩掉孔中的洗板液，在纸巾上拍干孔中的洗板液。目测微孔中无残留洗板液。把洗板液收集在废液缸中，并在每天实验结束用05次氯酸钠处理。 B自动洗板步骤： 如果使用自动洗板机，把洗板溶液体积设置为300-3501al孔。设置无间隔循环清洗五次。最后将微孔板从洗板机上取下，置于纸巾上拍干。(7) 每孔中加入100ul结合剂，按照样品加入的顺序以相同的速率和顺序依次加入微孔板中。(8) 微孔板在室温(20-25)温育2200、55分钟。(9) 按照步骤6进行洗板。(10) 每孔中加入100ulTMB，按照样品加入的顺序以相同的速率和顺序依次加入微孔板 中。(11) 微孔板在室温(20-25)温育10-15分钟。(12) 每孔加入50ul终止液以终止反应，按照TMB底物溶液加入的顺序以相同的速率和顺序依次加入微孔板中。阳性的标本会从兰色变为黄色。加入终止液后，拍打平板数次以确保样品完全混合。(13) 将微孔板置于450nm波长下读取每个孔的光密度值，以空白试剂作对照。应在加入终止液30分钟内读取数据。 5质量控制 (1) 每次试验中，校正品都要重复3次。同时包括一个试剂空白对照、阴性对照、阳性对照。 (2) 计算3个201、校正品的平均值。如果有一个值超过平均值的15，则剔除后计算另两个孔的平均值。(3) 校正品的平均OD值和阳性对照、阴性对照的值应在以下范围： OD值范围 阴性对照 0.250 校正品 0.300 阳性对照 0.500 A阴性对照的OD值除以校正品的平均OD值应0.9 B阳性对照的OD值除以校正品的平均OD值应1.25 C如果不符合上述要求，认为本次试验无效应重复试验。 (4) 阳性对照和阴性对照用来监控试剂的情况，并不能保证Cutoff值的准确性。 (5) 根据要求还可以加入其他对照。(6) 本质量控制参照NCCLS的C24号文件：定性测试的统计学质量控制。 6结果判断(1) 计算： 阳性校正202、品 阳性对照的cmoff值由生产者确定，并与校正品有关。校正因子(CF)可以帮助你确定待测样本的域值，纠正每次实验中细微的读数变化。校正因子的确定应决定于不同批的试剂盒的不同组分，并打印在试剂盒的组分表中。 OD值到GPL值的转换 OD值到GPL值的转换可根据以下公式计算： 待测样本GPL=(AB)C 其中GPL= 待测样本值 A= 待测样本OD值 B= 校正品的MPL值C= 校正品的平均OD值 例： 待测样本的OD值=0.946 校正品的OD值=0.435 校正品的GPL值=155MPL 则：待测样本GPL值=(0.946155)0.435待测样本为337GPL (2) 结果说明： 病人标本203、按如下判断： GPL 正常人 20 弱阳性 20至30 中等阳性 20至80强阳性 80(3) 限制: 抗心磷脂抗体IgG酶联免疫检测试剂盒不能作为唯一的诊断依据，试验结果应结合临床评价和其他诊断方法结果进行病情判断。 脂血、溶血、黄疸的标本不适用于本试剂盒。 虽然研究已经证明aCL与某些SLE病有关，但这方面的临床意义还要继续观察。 正常aCL值的范围可能会因人群不同而变化。以上所定的正常值范围只是基于美国当地的正常人群所测得的值。建议使用者应根据当地实际情况建立自己的正常值范围。 任何检测结果的临床意义的判断有赖于和其他病人之间的比较。疾病诊断和处理也应该先和其他相似病人的资料比较。优生优204、育血清筛查报告发放制度 1诊断结果必须以书面形式报告。 2报告应包括检查所选用的试验名称及参考范围，明确给出被检者的以下信息： TORCH-IgM及ACA-IgM阴性、阳性、弱阳性，可疑；TORCH-IgG及ACA-IgG阴性、阳性、弱阳性、可疑。 3TORCH-IgM、 ACA-IgM、TORCH-IgG和ACA-IgG均2周内发报告。 洗板机操作程序1、开机后，仪器界面如下SELECT，RUN IN YES OUT 2、按YES键，进入以下界面SELECT：WASH12F IN YES OUT 3、按或键，选择相应的洗涤程序(比如A2)SELECT：A2 IN YES OUT 4、按YES205、键，确认LAST STRIP：H YES ESC 5、按或键，确认最后一条酶标条的位置 (比如洗涤2条，按或键滚动至B)LAST STRIP：B YES ESC 6、按YES键，确认CONNECT THE WASH W1YES ESC 7、按YES键，确认洗涤液，仪器开始运行洗涤操作，自动回到如下界面PUMP PRIMINGESC 8、酶标条洗涤完成，仪器自动返回操作界面SELECT：A21N YES OUT 9、下次需洗涤时，按“2”以后的操作步骤执行程序洗板机保养程序 l仪器需置于通风，干燥环境。 2保持清洁，每次使用完毕用清洁液抹洗表面。 3仪器使用完后，关机，倒出废液，盖好机罩。 4保206、养方法，定时清洗洗板机管道(1) 保养时间： 每天开机前 每天关机后 其他认为有必要清洗的时间(2) 清洗洗板机的操作步骤： 在清洗瓶(RINSE)中装上纯净水 拧下洗涤瓶(WASH)的瓶盖，装到清洗瓶上 打开洗板机电源，按如下步骤操作洗板机程序 A开机SELECT：RUNIN YES OUT B按或键，选择到PRIMERINSE界面SELECT：PRIMERINSE IN YES OUT C按YES键，开始清洗D清洗完成后，仪器自动回到SELECT：RUN IN YES OUT酶标仪操作保养程序 酶标仪操作程序： 1接通电源，再开酶标仪，预热15分钟。 2将实验室所需要的波长输入酶标仪中。 207、3将要比色的标本放入酶标仪的比色座中比色。 4比色完毕，关机及稳压器，切断电源，用塑料罩将仪器罩好。 酶标仪保养程序： 1仪器使用前首先预热15分钟。 2比色完毕，要切断电源，用塑料罩将仪器罩好。 3要保持仪器清洁、干燥，定期用清洁的擦布抹洗。 4仪器要每年校正一次，防止滤光片有污物或老化，影响实验结果。 第六部分 超声产前诊断超声产前诊断人员职业道德操守 一实事求是、严格严谨的科学态度。 二患者第一、公平公正的工作原则。 三保守患者秘密、保护医疗资源。 四遵守社会公德和各种规章制度。 超声产前诊断医师职责 一具有人道主义精神。本着对患者个人、家庭及社会负责的原则，以热情关怀的态度对待每一位就208、诊者，并对患者的病情做到严守秘密。 二熟练掌握产科超声诊断技术及有关的基本知识，基本理论。 三认真执行各项规章制度和技术操作规程，防止医疗过失和医疗事故。 四认真细致完成每一例超声检查，准确及时发出诊断报告。发现疑难问题或遇到不能解决的问题，要与主任联系，及时请求会诊、转诊或其他帮助。 五完成病案随访，资料统计、储存工作超声仪器操作程序 一工作程序： 1开启稳压器电源，观察稳压器电压表盘，电压稳定于220V 10分钟。 2开启超声仪器电源，待仪器自动检测完毕。 3开始工作，根据检查器官将仪器调至该工作状态，并选择探头。 4开始对病人进行检查。 5下班时，擦拭探头及仪器操作平台，关闭超声仪器电源209、，最后关闭稳压器电源 二仪器使用注意事项： 1仪器使用过程中不能随意移动，注意探头、荧光屏幕、按键的保护，防止碰撞及用力不当。 2仪器连续使用时间不得过长，关闭后不得立即重新开启(10分钟后)；突然停电应立即关闭仪器，雷电天气禁止使用仪器。 3非本科室工作人员、不熟悉本机性能者，不得使用仪器。进修人员要在本科人员指导下操作仪器。 4仪器要远离腐蚀物，注意防震、防潮、防火、防尘。 5如遇妊娠合并接触性传染病患者，应在该病人超声检查后，用消毒剂擦拭探头两次。 6仪器使用过程如出现故障应立即关机，并请有关技术人员检修正常运行后方能使用。 三工作环境： 1夏季工作室室温保持在20-25(空调、风扇调节210、)：2冬季工作室室温保持在16以上(空调、加热器调节)；3雨季或空气潮湿季节须开启抽湿机以保持室内空气干燥4工作间内避免非医疗活动，禁止摆放私人生活物品。注意保持工作间整齐、清洁、安静。超声产前诊断患者知情同意制度 患者有超声产前诊断指征时，应向其说明超声产前诊断的必要性、局限性，并针对患者的具体情况予以解释。若患者同意超声产前诊断，本人签署超声产前诊断知情同意书。具体知情同意书见下面附表。附表1：关于产前超声检查的说明（知情同意书） 1 超声是一种影像学检查方法，有一定的局限性，检查意见仅供临床参考。2 由于受孕妇本人、孕周、胎儿体位、羊水、胎儿活动、胎儿骨骼声影等多种因素的影响，胎儿部分器211、官或部位可能无法显示或显示不清，超声显像也不可能将胎儿的所有结构显示出来。3 胎儿畸形的形成是一个动态发展的过程，没有发展到一定程度时，有可能不为声所显示。4 尽管超声检查能发现胎儿畸形，但不能检出所有的胎儿畸形。超声检测胎儿畸形的总的敏感性约50%。5 产前超声检查的目的是检查胎儿生长发育及发现胎儿重大结构异常。黑白超声主要检查胎儿生长发育，对胎儿畸形只进行粗略的筛查。彩超主要进行不同时期的系统胎儿超声检查，是胎儿畸形检查的主要影像手段。6 产前超声检查的三个重点时间是孕10-14周、18-24周、32-36周。建议至少在18-24周选择系统胎儿超声检查。7 对以上说明表示理解，同意检查并签212、名。 受检者姓名 身份证号 联系电话受检者家属姓名身份证号联系电话 超声产前诊断工作流程 符合超声产前诊断指征 签署超声产前诊断的知情同意书 产前超声检查 超声诊断结果 异常 临界 正常 定期超声复查 追踪妊娠结局 孕妇和新生儿信息及实验室、病理结果 整理资料归档保存超声产前筛查规范 (一)早期妊娠超声筛查 1筛查对象：妊娠12周以内的孕妇。 2筛查方法：经腹部超声检查、经阴道超声检查。 3筛查内容：确定宫内妊娠，排除宫外孕；诊断单胎或多胎妊娠；评估孕周(月经龄)； 排除异常妊娠及妊娠合并症(各种流产、滋养细胞肿瘤、盆腔包块、子宫畸形等)。 4报告内容：子宫位置、大小(上下径左右径前后径mm3213、)；妊娠囊位置，形态、大小(上下径左右径前后径mm3)或头臀径(mm)、胚胎数目，有无胎心搏动及胎体活动；盆腔情况。 (二)中晚期妊娠超声筛查 1筛查对象：妊娠12周以后的孕妇。 2筛查方法：经腹部超声检查。3筛查内容：胎儿生长评估、估计孕周，筛查胎儿发育异常；羊水测量，胎盘情况，确定胎位；排除异常妊娠及妊娠合并症(各种流产、滋养细胞肿瘤、盆腔包块、子宫畸形等)。4报告内容：胎儿双顶径。腹围、股骨径(mm)，胎心率和节律；羊水暗区，胎盘附着部位、成熟度；如发现胎儿及妊娠附属物异常应描述并建议超声产前诊断；检查医师签名及记录日期。超声产前诊断规范1检查对象： 1)羊水过多或过少。2)有影响胎儿发214、育异常的高危因素：如孕早期接触过可能导致胎儿先天缺陷的物质 者、有遗传病家族史；或曾经分娩过先天性严重缺陷婴儿者；有两次以上不明原因的流产、死胎或新生儿死亡者；孕妇年龄35周岁者。3)产前筛查发现或疑诊胎儿畸形。2检查时间：妊娠12周以上的任何孕周，最佳时间在妊娠2025周。3检查方法：经腹部超声检查。4检查内容：除观察超声产前筛查内容外，还需针对性观察以下相关器官超声解剖 结构：1)头颅：颅骨、脑室、丘脑、脑中线、小脑、脉络膜丛、小脑延髓池(后颅窝)、透明隔腔等结构。2)颜面部：眼、鼻、唇。3)脊柱：脊柱的连续性、弯曲度。4)胸腔：I、肺、心胸比例、心轴、心率、心律。II、心脏(要求显示以下215、切面)：a)四腔心切面：四腔心对称性，心脏中央“十”，宇交叉，左、右房室连接隋况。b)左右心室流出道切面：大动脉形态、大小，主肺动脉内径比较、心室与大动脉的连接关系，大动脉起始部的交叉关系。5)腹部：肝、脾、胃泡、肠管、肾、膀胱等器官。6)肢体：四肢长骨形态、股骨长度。7)胎儿附属物：脐带血管数目及脐带缠绕情况、胎盘厚度及内部回声。8)血流参数：在正常妊娠28周后，或当有妊娠并发症和胎儿发育异常时，测量脐动脉血流参数，必要时测量大脑中动脉等其它血管血流参数。5注意事项：1)首次检查某些必检器官因胎位或其他原因观察不清者，应作特别的注明，以便下次检查详细现察。 2)某些器官的异常回声：如腔内的积216、液(胸，腹，心包，肾，脑室，肠管)，某些脏器的不充盈(胃，膀胱)，作出异常诊断者，应动态观察二次以上。3)胎儿四肢应逐一观察：如姿势异常，应注意手或足的周围有无子宫壁、胎盘或胎体的压迫，且至少观察手、足运动2次以上。如果异常姿势不随胎儿肢体运动而改变，且多次扫查均显示同样声像特征，才可对胎儿手足姿势异常作出诊断。4)对一些特殊部位发育异常，如复杂的心脏畸形，应建议到专科会诊或专科医院进行特殊专项检查，以进一步明确诊断。 5)超声产前诊断需掌握适应征，在最低超声暴露条件下获得必要的诊断信息。但要明确指出超声检查并不能发现所有的胎儿畸形。执行上述标准可以最大限度地检出胎儿畸形。6)根据卫生部200217、2年12月31日制定的产前诊断技术管理办法。要求超声产前诊断应诊断的严重畸形包括在妊娠1624周诊断无脑儿、脑膨出、开放性脊柱裂、胸腹壁缺损内脏外翻、单腔心、致命性软骨发育不良。超声产前诊断质量控制制度1从事超声产前诊断的人员必须符合从事产前诊断卫生专业技术人员的基本条件的标准。2超声设备应为高分辨率的彩色多普勒超声诊断仪，并具有完整的图象记录系统和图文管理系统。3超声产前检查时应严格按照超声产前诊断规范进行。4对临床可疑病例或产前筛查高危孕妇，如果一次超声检查未发现异常，需要随访后再做诊断。5超声产前诊断报告，应由经审批认证的专业技术人员签发。必要时由二名专业技术人员签发。6每一例超声产前诊218、断的病例应追踪随访。超声产前诊断报告书写规范1基本要求 1) 超声产前诊断报告书写是指医务人员通过询问病史和相关辅助检查结果、超声检查等医疗活动获得有关资料，并进行归纳、分析、整理形成超声产前诊断报告记录的行为。 2) 超声产前诊断报告书写应当客观、真实、准确、及时、完整。 3) 报告书写应当使用超声工作站系统打印报告或使用蓝黑、黑墨水书写。 4) 报告书写应当使用中文和医学术语，通用的外文缩写和无正式中文译名的综合征、疾病名称等可以使用外文。 5) 报告书写应当文字工整，字迹清晰，表述准确，语句通顺，标点正确。书写过程中出现错字时，应当用双线划在错字上，不得采用刮、粘、涂等方法掩盖或去除原来的字迹。 6) 报告按照规定的内容书写，并由相应医务人员签名。实习医务人员、试用期医务人员、进修医务人员书写的报告，应当经过在本医疗机构合法执业的医务人员审阅、修改并 签名。 2超声产前诊断报告书写内容 1) 一般情况，包括检查日期、患者姓名、年龄、送诊部门。 2）超声产前诊断描述内容详见超声产前诊断规范，并记录能够提示超声诊断的主要图像。